西藏EBSS缓冲液价格信息
Buffer组份浓度:137mMNaCl,mMKCl,10mMNa2HPO4,2mMKH2PO4配制量:1L配制方法:1.称量下列试剂,置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至,然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压**后,室温保存。注意:上述Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mMCaCl2和mMMgCl2。10M醋酸铵组份浓度:10M醋酸铵配制量:100ml配制方法:1.称量g醋酸铵置于100~200ml烧杯中,加入约30ml的去离子水搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。3.使用mm滤膜过滤**。4.密封瓶口于室温保存。注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压**。Tris-HCl平衡苯酚配制方法:1.使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。2.操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。长时间或过量使用PBS缓冲液可能会对人体产生耐受性,导致恶心、呕吐、腹泻等症状。西藏EBSS缓冲液价格信息
1:50~l:800)后,按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照),保温,洗涤。加工作浓度酶标抗体,洗涤,加底物显色,加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值;为0.8左右,阴性参考血清A值<0.1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg/L、lmg/L、/L三个浓度按行包被,每一个浓度包被三行(每行3孔),分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原,弱阳性抗原和阴性对照,将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度,分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色,加酸终止反应,分别读取A值。以强阳性抗原液A值在,阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1.1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择:①用IgG进行包被,洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中,保温、洗涤。③加酸终止反应后,读取吸光度(A)。读取A值在1.0时的酶标抗体稀释度,作为酶标抗体的工作浓度。浙江HBSS缓冲液市场报价PBS缓冲液可以用于分子克隆和细胞培养等实验。
3.高温高压**后,4℃保存。SolutionI(质粒提取用)组份浓度:25mMTris-HCl(),10mMEDTA,50mMGlucose配制量:1L配制方法:1.量取下列溶液,置于1L烧杯中。2.高温高压**后,4℃保存。3.使用前每50ml的SolutionI中加入2ml的RNaseA(20mg/ml)。SolutionII(质粒提取用)组份浓度:200mMNaOH,1%(W/V)SDS配制量:500ml配制方法:1.量取下列溶液,置于500ml烧杯中10%SD50ml2NNaOH50ml2.加**水定容至500ml,充分混匀3.室温保存,此溶液保存时间比较好不要超过一个月注意:SDS易产生气泡,不要剧烈搅拌SolutionIII(质粒提取用)组份浓度:3MKOAc,5MCH3COOH配制量:500ml配制方法:1.称量下列试剂,置于500ml烧杯中。2.加入300ml去离子水后搅拌溶解。3.加去离子水将溶液定容至500ml。4.高温高压**后,4℃保存。MEDTA()组份浓度:MEDTA配制量:1L配制方法:1.称取gNa2EDTA·2H2O,置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水,充分搅拌。3.用NaOH调节pH值至(约20gNaOH)。注意:pH值至,EDTA才能完全溶解。4.加去离子水将溶液定容至1L。5.适量分成小份后,高温高压**。6.室温保存。1MDTT组份浓度:1MDTT配制量:20ml配制方法:1.称取gDTT,加入到50ml塑料离心管内。2.加20ml的MNaOAc()。
三、缓冲液使用中的注意事项在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理,当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时,为使缓冲溶液达到要求,就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节,以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值,然而,结果却适得其反,这样的溶液pH值虽然调对了,可是它的缓冲体系却被破坏了,作用也就失去了,缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。使用缓冲溶液的注意事项:不少缓冲溶液都含有易挥发组分,如,氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在,不少实验室引入了定量加液器,用定量加液器加试剂,具有简便准确误差恒定的特点,特别是在做成批样品时更显出它的优越性,不少同志也喜欢用它来加缓冲液,但是,应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中,因该器皿不密闭,易造成氨的挥发(醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理),从而,导致溶液失效,正确的做法是缓冲液应适量配制,使用后及时密闭并置于低温中保存。PBS缓冲液是一种常用的生物学缓冲液。
生物缓冲液pH计校正及使用方法
生物缓冲液在实验分析中经常被用到,它的作用是稳定溶液的pH值。然而,很多人在实验中会遇到无法调节缓冲液pH值的情况,这是为什么呢?如何解决这个问题呢?下面我将详细介绍。首先,从目前使用的pH计来看,国产的pH计或酸度计,校正缓冲液时需要注意以下两种情况:
1、购买市场上配置好的标准溶液,在聚乙烯瓶中密封储存。如果在室温条件下保存1-2个月后,若出现浑浊、沉淀或发霉等情况,就不能继续使用了。已经使用过的校正缓冲液也不能再倒回去使用。2、购买缓冲剂并自己配置。大部分厂家生产的缓冲剂都是干燥型的pH缓冲剂,使用时需要将其溶解在之前煮沸15-30分钟的去离子水中,然后倒入250ml容量瓶中,稀释至刻度,充分摇匀即可。 在生物化学研究中,为什么要使用缓冲液?在使用缓冲液时应注意那些问题?陕西DPBS缓冲液价格查询
生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris(三羟甲基氨基甲烷)等系统。西藏EBSS缓冲液价格信息
2.配制方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)混合均匀后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。10%(W/V)SDS组份浓度:10%(W/V)SDS配制量:100ml配制方法:1.称量10g高纯度的SDS置于100-200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水,68℃加入溶解2.滴加浓盐酸调节pH值至3.将溶液定容至100ml后,室温保存。2NNaOH组份浓度:2NNaOH配制量:100ml配制方法:1.量取80ml去离子水置于100~200ml塑料烧杯中(NaOH溶解过程中大量放热,有可能使玻璃烧杯炸裂)。2.称取8gNaOH小心地逐渐加入到烧杯中,边加边搅拌。3.待NaOH完全溶解后,用去离子水将溶液体积定容至100ml。4.将溶液转移至塑料容器中后,室温保存。NHCl组份浓度:NHCl配制量:100ml配制方法:1.在ml的去离子水中加入ml的浓盐酸(N),均匀混合。2.室温保存。5MNaCl组份浓度:5MNaCl配制量:1L配制方法:1.称取gNaCl置于1L烧杯中,加入约800ml的去离子水后搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至1L后,适量分成小份。3.高温高压**后,4℃保存。20%(W/V)Glucose组份浓度:20%(W/V)Glucose配制量:100ml配制方法:1.称取20gGlucose置于100~200ml烧杯中,加入约80ml的去离子水后,搅拌溶解。2.加去离子水将溶液定容至100ml。西藏EBSS缓冲液价格信息
上一篇: 甘肃EBSS平衡盐溶液供应商家
下一篇: 贵州无酚红缓冲液哪家好