宁夏Ham's F12培养基产品介绍

    无动物组分无血清细胞培养基的应用三、细胞培养基的质量标准和检测方法澄清度水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取，细胞才能生长增殖，因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查，判断细胞培养基的澄清度。按中华******典2005年版二部附录ⅨB进行。pH值哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度，pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品，用注射用水（水温20℃-30℃）溶解至1L，加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中，用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中华******典2005年版二部附录ⅥH进行；加入规定量的碳酸氢钠（见表4-12）到上述溶液中，按中华******典2005年版二部附录ⅥH进行。干燥减量的质量分数细胞培养基具有吸湿性，在空气中放置水分会很快升**燥减量的质量分数表示产品中含湿量。细胞培养基是有菌制剂，其丰富的营养成分有利于微生物生长，控制细胞培养基中的水分可以防止微生物的繁殖，保持细胞培养基的养分。DMEM培养基提供了细胞生长所需的基本营养成分。宁夏Ham's F12培养基产品介绍

    导致细胞培养基变质失效。控制细胞培养基中**和霉菌，是延长细胞培养基有效期的方法之一。清大天一在参考《中华******典》2005版二部附录第100页的口服给*制剂的微生物限度标准，并严于该标准，规定细胞培养基产品的**数每1g不得超过200个，霉菌数每1g不得超过50个。称取样品1g，加入无菌纯化水10mL溶解，混匀即得试样。按中华******典2005年版二部附录ⅪJ微生物限度检查法进行，检查项目为**数、霉菌数。检查法采用平皿法。细胞生长试验这是一个性能特性表述的要求。细胞培养基的功能就是培养哺乳类动物细胞，因此经过细胞培养效果的检验是产品***劣的直观表述，这也是很多生物制*用户要求的一项指标。目前国内尚无细胞培养和计数的法定方法，可参考《体外培养的原理与技术》中细胞计数法论述的内容给出。按产品说明书配制培养液进行细胞培养，前四天用含10％小牛血清的培养液培养，观察细胞形态并计数，检查细胞培养基是否有促生长的能力。后三天用不含小牛血清的培养液维持培养，观察细胞形态并计数，检查细胞培养基中是否有不利细胞生长的***。本试验用细胞为VERO细胞。四、细胞培养基的使用方法细胞培养基的种类繁多，细胞培养方式也较多。广东MEM a培养基价目表减血清培养基提高了实验的可重复性。

    按中华******典2005年版二部附录ⅧL干燥失重测定法进行。渗透压溶剂通过半透膜由低浓度向高浓度溶液扩散的现象称为渗透，阻止渗透所需施加的压力，称为渗透压。细胞必须生活在等渗环境中，动物细胞借助K＋、Na＋维持渗透平衡。大多数细胞对渗透压有一定的耐受性。但是培养液渗透压过高容易使细胞脱水萎缩，培养液渗透压过低容易使细胞膨胀破裂，因此要控制培养基的渗透压范围。按中华******典2005年版二部附录ⅨG渗透压摩尔浓度测定法进行。**内*****内***是许多病原性**所产生的***。它的特殊性在于不是**或**的代谢产物，而是**死亡或解体后才释放出来的一种具有生物活性的物质。培养基**内***过高，对生物制品*苗（如狂犬、乙肝*苗）、基因工程*品等注射用的*品都需要检查**内***。因此本项目的检验符合生物制品质量控制要求。常规细胞培养基的**内***标准定为＜10EU/ml。称取本品规定量（见表4-12）的1/100，加入**内***检查用水10mL溶解，吸取该溶液mL加**内***检查用水mL，混匀即得试样。按中华******典2005年版二部附录ⅪE**内***检查法中的凝胶法进行。微生物限度细胞培养基不是无菌产品，其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖。

    1)、初代培养：绣球外植体，将叶片剪去，自来水冲洗干净。在超净工作台上把已经冲洗干净的外植体浸入75％酒精中消毒30s，用无菌水冲洗3～4次。使用白猫漂白水和无菌水按1：4的体积比配制消毒液，将外植体放入消毒液浸泡40min，其中白猫漂白水为上海白猫(集团)有限公司生产的“白猫”牌家用漂白水。消毒完成，将外植体接种到诱导培养基中培养，建立无菌再生系统，诱导培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养6～8周。其中诱导培养基为ms+～～，诱导培养基的ph值为。(2)、继代培养：以建立的无菌再生系统为对象，将无菌外植体转接到增殖培养基，其中增殖培养基为ms+～～，培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。每隔8～12周转接入新的增殖培养基，增殖培养基的ph值为。(3)、生根培养：经过继代培养的绣球组培苗，取2～3cm的顶芽，放入生根培养基，其中生根培养基为1/2ms+～～，生根培养基的ph值为。诱导培养环境为光照强度1500lx条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。。无酚红培养基在细胞实验中减少了不必要的干扰。

    4、本发明植物**培养基，其不含碘化钾，在绝大多数植物中，碘元素不是必需元素，实验发现去除碘化钾对植物**培养没有影响，并且植物在脱离培养基进行后期培养时仍可以从土壤等基质中富集碘元素，去掉碘化钾成分，也简化了培养基配制过程。5、本发明植物**培养基，其用nafeedta取代na2·edta和feso4·7h2o，该替换减少的**根离子通过适当增加**铵成分来补充，该替换主要基于两个特征，一方面，nafeedta是可溶性螯合铁，更容易被植物吸收，有利于植物叶绿体发育，另一方面，发明人发现，na2·edta和feso4·7h2o水溶液ph偏酸是ms、b5和n6等众多植物**培养基原始ph偏低及ph波动大的主要原因，本发明培养基中使用nafeedta之后，经ph为，而植物**适宜生长的ph一般为，因此，使用nafeedta既促进了植物对铁离子的吸收，又有利于培养基ph的稳定。6、本发明植物**培养基，其配方降低了mnso4·h2o、znso4·7h2o、h3bo3、cocl2·6h2o、na2moo4·2h2o的用量，增加了cuso4·5h2o、烟酸、盐酸硫胺素、盐酸吡哆醇的用量，该改变特征在于，有效减少愈伤**玻璃化发生，减少酚类物质产生，提高愈伤**的出愈率，实验发现，优化后的培养基出愈时间提前，对多种植物的愈伤**诱导是有益的。F12培养基在生物医学研究中表现出优越的性能。福建F12培养基采购

F12培养基提供了丰富的营养成分，支持细胞的快速增殖。宁夏Ham's F12培养基产品介绍

    3)拟南芥叶片愈伤**的诱导方法：用手术剪刀剪开长势良好的无菌叶片，用镊子将其取出摆放在步骤(1)的诱导培养基中，使伤口接触培养基；于温度23-25℃、湿度50-70％、光照强度1500-2500lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)拟南芥根愈伤**的诱导方法：用镊子取出无菌苗的根，用手术剪刀剪开后平铺于步骤(2)的诱导培养基中，培养条件同步骤(3)。(5)cs诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养6-8d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％；拟南芥根愈伤**诱导时，培养5-7d在切口处开始出现少量颗粒状愈伤**，培养20-22d获得较大体积的淡黄色松脆型愈伤**，且在愈伤**周围观察到大量致密分布的白毛，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。如图5所示。对比培养例5：将cs基本培养基替换为ms基本培养基，其余完全同培养实例5，ms基本培养基的成分及用量如表1所示。ms诱导培养基的诱导结果为：拟南芥叶片愈伤**诱导时，培养7-10d在切口处出现颗粒状愈伤**，培养24-26d获得嫩绿色致密的团块状愈伤**，颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100％。宁夏Ham's F12培养基产品介绍