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培养实例2:兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养培养实例2与培养实例1不同的地方在于:步骤(1)所用种子为兰兹贝格(ler,landsbergerecta)型拟南芥种子,兰兹贝格拟南芥较哥伦比亚拟南芥具有更早的花期,在适宜条件下培养,可以获得处于各发育时期的拟南芥无菌***,包括根、胚轴、叶柄、子叶、莲座叶、茎、花、角果等,其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为:兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100%,培养28d的幼苗,表现为植株健壮、平均株高为,莲座叶发达、平均**大莲座叶长为,叶色浓绿,根系粗壮、平均主根长为,花序含有较多花朵,花粉形态和活力均正常、平均有活力的花粉为%。如图2所示。对比培养例2:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例2,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:兰兹贝格型拟南芥种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100%,培养28d的幼苗,表现为植株健壮、平均株高为,莲座叶发达、平均**大莲座叶长为,叶色浓绿,根系粗壮、平均主根长为,花序发育良好,花粉形态和活力均正常、平均有活力的花粉为%。如图2所示。无血清培养基为细胞培养提供了更清晰的背景。云南基础培养基供应商家
3)培养方法:将配制的1/2cs生长培养基分装于长、宽、高9cm的耐高温培养盒中,用移液枪吸取带有无菌水的无菌种子,吹打在无菌滤纸上,用无菌尖头镊子将种子均匀点播在培养基上;于温度22-24℃、湿度50-70%、光照强度1500-2000lux、光照和黑暗交替(光照时间16h、黑暗时间8h)条件下培养。(4)1/2cs生长培养基的培养结果为:哥伦比亚型拟南芥种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮,莲座叶均已伸展,叶色浓绿,根系发达、平均主根长为。如图1所示。对比培养例1:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例1,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:哥伦比亚型拟南芥种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100%,培养16d的幼苗,表现为植株健壮,莲座叶部分伸展,叶色浓绿,根系发达、平均主根长为。如图1所示。培养实例1和对比培养例1的培养结果比较:哥伦比亚型拟南芥在1/2cs生长培养基和1/2ms生长培养基上的萌发率均为100%;在相同条件下培养16d时,与1/2ms生长培养基相比,1/2cs生长培养基中的幼苗长势更佳,主要表现为莲座叶长势更好、根系更为发达。如图1所示。山东RPMI1640培养基常见问题F12培养基适用于基因编辑和转染实验。
c、结果为:在用未调ph液体培养基进行培养时,整体长势从优至弱分别为1/2cs未调ph液体培养基、cs未调ph液体培养基、1/2ms未调ph液体培养基、ms未调ph液体培养基;在用ph调至,整体长势从优至弱分别为1/、、1/、;不论是否调ph至,cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于ms液体培养基;不论是否调ph至,1/2cs液体培养基培养的马铃薯幼苗长势均优于1/2ms液体培养基。如图9和图10所示。说明,1/2cs液体培养基和cs液体培养基应用于植物水培时,不论是否调节ph至,均能获得很好的培养效果,克服了传统液体培养基必须调节ph后才适用于植物水培的缺点。**后说明的是,以上实施例*用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而其不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,则均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
7)溶液应在2℃-8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。2)配制可高压**细胞培养基(1)根据所需将培养基全部倒入一容器中,用少量注射用水(20℃~30℃)将袋内残留培养基洗下,并入容器。加注射用水至总体积的95%,轻微搅拌溶解。(2)在121℃、15psi下**15分钟。(3)待溶液冷却至室温,加入无菌mol/LL-谷氨酰胺溶液规定体积、无菌%(w/v)碳酸氢钠溶液规定体积,加注射用水(20℃~30℃)至规定体积,混匀。(4)如果必要,用1mol/L氢氧化钠溶液或1mol/L盐酸溶液调pH至所需值。(5)溶液应在2℃-8℃下避光保存。具体使用方法参照培养基包装袋上的说明书。注意事项1)细胞培养用水一般为三蒸水(经石英蒸馏器蒸馏)或超纯水,医*生产上一般为注射用水。2)建议尽量选择与所用量相匹配的包装一次使用,因为包装一旦打开,组分可能会变质或因受潮而结团。3)溶解干粉培养基时先加入终体积90%-95%的培养用水,添加剂加完后再补足。4)如需添加的组分较多时,某一组分完全溶解后,再添加另一组分。5)待培养基完全溶解后再加入碳酸氢钠,以免产生沉淀。6)所有成分完全溶解后,培养基应立即过滤或高压**,以免产生沉淀或有微生物污染。7)在过滤**时。无血清培养基确保了细胞的纯净生长环境。
本发明涉及植物**培养技术领域,特别涉及一种植物**培养基。背景技术:ms培养基于1962年由murashige和skoog设计,是目前植物**培养中应用**为***的培养基。据《危险化学品安全管理条例》(***令第591号)、《民用物品安全管理条例》及《易制爆危险化学品名录》(2017年版)可知,ms培养基的主要成分硝酸钾、硝酸铵均为易制爆管制试剂,随着**监管越发严格,所有易制爆试剂的购买、储存及使用变得越来越困难,尤其是兼有硝态氮和铵态氮的硝酸铵,其纯品被禁止市场流通,为植物**培养带来很大难度。b5培养基于1968年由gamborg等为培养大豆根细胞而设计,n6培养基于1974年由朱至清等为水稻等禾谷类作物花*培养而设计,两者均由ms培养基衍生而来,在有些植物**培养研究中***应用,虽然b5和n6培养基除了硝酸钾外不含其他易制爆成分,但两者中的钙离子和镁离子含量均大幅降低,且b5培养基中铵离子大幅减少、n6培养基中钾离子大幅增加,这些离子浓度的大幅波动对一些植物的**培养是不利的。cna草莓增殖培养基公开了一种无硝酸铵培养基,但其硝酸钾及**铵含量过高,*适用于草莓**培养;cna一种草莓**培养基及其配制方法公开了一种无硝酸铵培养基,在草莓**培养中取得很好的效果。无酚红培养基适用于对酚红敏感的实验设置。陕西Ham's F12培养基是什么
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生产上一般采用冷水喷淋冷却,冷却到40-50℃后,输送到预先已经**过的罐内。(四)、间歇**与连续**的比较1、歇**的***和缺点***是设备要求低,不需另外设置加热、冷却装置;操作要求低,适于手动操作,适合于小批量生产规模;适合于含有大量固体物质的培养基的**。缺点是培养基的营养物质损失较多,**后培养基的质量下降;需进行反复的加热和冷却,能耗较高;不适合于大规模生产过程的**;发酵罐的利用率较低。2、连续**的***和缺点***是**温度高,可减少培养基中营养物质的损失;操作条件恒定,**质量稳定;易于实现管道化和自控操作;避免了复的加热和冷却,提高了热的利用率;发酵设备利用率高。缺点是对设备的要求高,需另外设置加热、冷却装置;操作较麻烦;染菌的机会较多;不适合于含大量固体物料的**;对蒸汽的要求高。由此可见,无论在理论上或者在实践上,与间歇**过程相比,连续**的***十分明显。因此,连续**越来越多地被用培养基的**。云南基础培养基供应商家
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