辽宁水稻C13同位素标记秸秆培养方法

本秸秆采用连续同位素标记技术生产。目前秸秆同位素标记技术主要有连续标记技术和脉冲标记技术。在连续标记技术发明前，一般都采用脉冲标记技术。目前世界上只有3家左右公司掌握连续标记技术。在国内智融联科技掌握连续标记技术前，国内用的材料大多进口，每克达数万元，严重影响国内科学研究。从2004年开始，国内开始连续同位素标记技术研发，直到2009年初步研发成功。到2018年开始生产。当国外公司国内代理告诉国外公司后，同位素标记秸秆价格大幅降低，促进了国内科研进展。脉冲标记的秸秆，由于在标记过程中是不连续的，植物体内同位素的分配是不均匀的，这样研究结果可能会出现偏差。连续标记秸秆是从幼苗开始就采用设定的丰度来标记秸秆，而且没有其他干扰，这样标记出来的秸秆，其体内各部分的分配是均匀的，做试验时产生偏差的几率几乎为零，确保试验取得预期结果。利用稳定同位素标记秸秆研究秸秆碳在团聚体中的分配。辽宁水稻C13同位素标记秸秆培养方法

高丰度的同位素标记秸秆可以用于研究秸秆降解的关键微生物。我们该选用多少丰度的标记秸秆呢？用稳定性同位素探针（stableisotopeprobing-SIP）技术研究物质转化的土壤动物和微生物时，重要的是标记生物的DNA和未标记的在超高速离心后发生分层，否则就失败了。DNA一般由腺嘌呤（A-adenine）、鸟嘌呤（G-guanine）、胞嘧啶（C-cytosine）和胸腺嘧啶（T-thymine）组成。DNA中一般含氮，含碳。在未标记情况下，DNA超高速离心后密度介于。如果超高速离心后分为15层，意味着层间DNA密度差为。如果分为32层，则为。常规DNA的分子量为。如果标记后DNA与未标记DNA发生分层，那么DNA密度至少要增加。高丰度的同位素标记秸秆可以用于研究秸秆降解的关键微生物。我们该选用多少丰度的标记秸秆呢？如果用15N标记，DNA中15N原子数必须大于N总原子数的15%~30%。如果用13C标记，DNA中13C原子数必须大于C总原子数的5-10%。要实现好的研究结果，分层2层以上为好。也就是说DNA中15N丰度要达到30%以上，而13C要达到10%以上。如果用标记秸秆加到土壤中，还要考虑土壤矿化速率和秸秆利用率。具体可请教有经验的老师、同事或经销商。安徽玉米C13同位素标记秸秆用途是什么13C标记的秸秆可以用于研究降解秸秆的微生物群落。

除了直接利用稳定同位素标记秸秆进行实验外，还可将标记的秸秆烧制成生物质炭。有学者利用13C稳定性同位素标记的小麦秸秆制作成生物炭，研究了生物炭在不同土壤中的矿化速率差异。研究结果表明：生物炭添加到四种类型的土壤中室内培养368天后，生物炭碳在不同土壤中的矿化量存在差异，寒区水稻土中为15.6mgC/kg土（0.25%），红壤性水稻土中为14.2mgC/kg土（0.23%），黄淮海中为10.4mgC/kg土（0.17%），低肥力红壤性水稻土中为9.92mgC/kg土（0.16%）。生物炭碳矿化量与土壤全钾（r=0.679）以及全碳（r=0.584）含量均有的正相关关系。

13C为稳定性同位素,存在于自然界且无辐射无污染无衰变。因此，13C技术在国内外已广泛应用于植物生理生态学、农田土壤结构、生物地球化学、气候变化、物质溯源以及掺假辨别等研究领域。目前同位素标记的方法主要有13C自然丰度法、连续标记和脉冲标记。13C自然丰度方法是基于C3植物和C4植物同位素分馈的现象；连续标记需要长时间注入标记物，一般适合于评价植物输入土壤和地下碳库总量的研究。脉冲标记是指一次注入一定量的标记物,可用来研究植物在特定生长时期光合碳的分配情况；一般在植物光合产物分配研究上均采用此种方法。本产品是利用13CO2连续标记生产，C13在植物体内的分布会更均匀，保障实验的顺利进行同位素标记秸秆的原理是什么？

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稳定同位素秸秆进行微生物示踪DNA-SIP时有哪些注意事项？辽宁水稻C13同位素标记秸秆培养方法

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