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简单制作培养基,需调整培养基成分,介质中使用的化学物质应该是化学纯品,铜锅或铁锅易导致铜、铁混入培养基,使细菌难以繁殖。用不锈钢锅加热溶解较为适宜。溶解于水的锅子,可用温水加热,随时搅拌,防止结焦。若发现结焦,则不能使用介质,需重新调配。在溶解大多数固体成分之后,用少量热将其全部溶解,直到沸腾。简单制作培养基,需调整培养基的pH值,由于加热消毒过程中培养基的pH值会发生变化,因此应在培养基组分完全溶解后,调整pH值。举例来说,牛肉汁的pH值下降了0.2左右,而肠浸出物的pH值则明显上升。所以,在这一步中,操作者要注重不断探索经验,掌握培养基的很终pH值,保证培养基的质量。在调整pH值后,要将其煮沸几分钟,以利于培养基沉淀。培养基由于配制的原料不同,使用要求不同,而贮存保管方面也稍有不同。四川培养基消毒 培养基制备器
微生物限度:细胞培养基不是无菌产品,其中的微生物在一定条件下会吸收细胞培养基中的营养物质滋生繁殖,导致细胞培养基变质失效。控制细胞培养基中细菌和霉菌,是延长细胞培养基有效期的方法之一。清大天一在参考《中华人民当地药典》2005版二部附录第100页的口服给药制剂的微生物限度标准,并严于该标准,规定细胞培养基产品的细菌数每1g不得超过200个,霉菌数每1g不得超过50个。称取样品1g,加入无菌纯化水10mL溶解,混匀即得试样。按中华人民当地药典2005年版二部附录ⅪJ微生物限度检查法进行,检查项目为细菌数、霉菌数。检查法采用平皿法。河北全自动培养基制备器培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。
培养基制备的基本方法和注意事项:1、培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外,一般均应尽量收集有关资料,加以比较核对,再依据自己的使用目的,加以选用,记录其来源。2、培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养基名称,配方及其来源,和各种成份的牌号,好终pH值、消毒的温度和时间制备的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。3、培养基成分的称取培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱,好好一次完成,不要中断。可将配方置于傍侧,每称完一种成分即在配方面军做出记号,并将所需称取的药品一次取齐,置于左侧,每种称取完毕后,即移放于右侧。完全称取完毕后,还应进行一次检查。
对LST(月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤)培养基进行灭菌时,有时发酵管内会有气泡。为防止发酵管内产生气泡,可以采取以下几项措施:(1)小倒管浸满培养基(不留气泡)后再加入到盛LST的试管中。(2)灭菌锅关闭放气阀前,将锅内气体排干净。(3)试管塞不要塞得太紧(使用硅胶塞的时候),勿使用橡皮塞。(4)不要过早打开灭菌锅,要等灭菌锅内气体和温度都降到与室温一致或相差不大时再打开灭菌锅。如果以上情况都做到还有气泡,可用水做培养基组的对照试验,若培养基组有气泡,而对照组没有气泡,可确定是培养基自身的原因。高压蒸汽灭菌一般使培养基pH降低,应在配制培养基时加以调节。
微生物检验培养基制备的要点:培养基溶化,将中海培养基纳入烧杯容器中,加小适量的水,缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂,则不需要对培养基加热;相反含有琼脂,就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。待培养基完全溶解后再加入适量的水搅拌均匀。如准备的北京中海培养基较多,在不锈钢锅中融化加热,可以用温水加热,需不停搅拌,防止焦化。如果不小心出现焦化现象,则制备好的培养基将无法使用,必须重新配制中海生物培养基。不要使用铜或铁容器溶解制备培养基,因为铜或铁容器可能会导致容器内培养基中铜、铁超标,影响实验结果,其中培养基中铜含量大于0.3毫克每升,细菌不适宜生长。铁含量超过0.14毫克每升,防止细菌产生有毒的。容易发生反应和沉淀的药物应单独溶解,然后加入培养基中,如磷酸氢二钾和硫酸镁。配制培养基的原则:根据培养目的需要选择适宜的营养物质。陕西培养基制备器供应商
组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。四川培养基消毒 培养基制备器
制备培养基的操作要点:用过的玻璃器皿:凡确无病原菌或未被带菌物污染的器皿,使用后可随时冲洗,吸取过化学试剂的吸管,可先浸泡于清水中,待到一定数量后再集中进行清洗。有可能被病原菌污染的器皿,必须经过适当消毒后,将污垢除去,用皂液洗刷,再用流水冲洗干净。若用皂液未能洗净的器皿,可用洗液浸泡适当时间后再用清水洗净。洗液的主要成份是重铬酸钾和浓流酸,其作用是将有机物氧化成可溶性物质,以便冲洗。洗液有很强的腐蚀作用,使用时应特别小心,避免溅到衣服、身体和其他物品上。四川培养基消毒 培养基制备器
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