湖南琼脂培养基 培养基制备器

培养基的物理灭菌方法：（一）加热灭菌法：加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。（二）紫外线灭菌法：是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm，灭菌力较强的波长是253.7nm。紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。为了避免杂菌污染，获得微生物纯培养物，培养基必须及时严格灭菌。湖南琼脂培养基 培养基制备器

培养基的使用：1.琼脂培养基的融化：将培养基放到沸水浴中或采用其他有相同效果的方法(如高压锅中的蒸汽)融化。经过高压灭菌的培养基尽量减少重新加热的时间,避免过度加热。培养基融化后立即移开,室温静置片刻(约2min），以免玻璃容器发生破裂。融化后的培养基放入47℃~50℃恒温水浴锅中保温，冷却到47℃~50℃所需的时间取决于培养基的类型、体积和在水锅里的分装量。融化后内培养基应尽快使用，放置时间一般不超过4h。剩余的培养基固后不得再次融化使用。特别是灵敏性培养基，应根据相关标准，缩短融化后放置的时间。自动搅拌培养基制备器供应商固体培养基根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。

培养基的分装：大批量配制时使用的自动分配器须经校准和确认。每次使用前后，均要对分配器的管道系统进行冲洗，在分装无菌培养基前，则要采用无菌硅胶管。固体培养基一般分装在250ml、500ml锥形瓶中，高压灭菌后根据需要分装平皿或试管。平皿：倾注平皿，应在无菌室中放置3—4h，如用塑料平皿须在35℃培养箱中倒置30—60min。让水蒸汽自然蒸发。斜面：制备低层斜面分装于试管，约占容积1/5，灭菌后趁热斜放在细玻璃棒和木杆上，使成斜度，分装使注意管口和瓶塞上勿沾有培养基，如沾有培养基应用布抹去，以避免污染。

马铃薯培养基的分装：1.根据需要将培养基分装于不同容量的三角烧瓶、试管中。分装的量不宜超过容器的2/3以免灭菌时外溢。2.琼脂斜面分装量为试管容量的1/5，灭菌后须趁热放置成斜面，斜面长约为试管长的2/3。3.半固体培养基分装量约为试管长的1/3，灭菌后直立凝固待用。4.高层琼脂分装量约为试管的1/3，灭菌后趁热直立，待冷后凝固待用。5.液体培养基分装于试管中，约是试管长度的1/3。6.琼脂平板：将灭菌(或加热融化)后的培养基冷至50℃左右，以无菌手续倾人灭菌平皿内，内径225px的平皿倾注培养基约13～15ml，轻摇平皿底，使培养基平铺于平皿底部，待凝固后即成，倾注培养基时，切勿将皿盖全部启开，以免空气中尘埃及细菌落入新制成的平板培养基(简称平板)，表面水分较多，不利于细菌的分离，通常应将平皿倒扣搁置于37℃培养箱内约30分钟待平板平面干燥后使用。培养自养微生物的培养基应由简单的无机物组成。

培养基防止污染应该注意以下事项：确认工作细胞库是否被污染，确认毒种工作种子批是否被污染，确认所用培养基及其添加成分(如小牛血清、NaHCO3等)是否被污染，均可用细菌、病菌及支原体无菌试验来确认并排除。同时要对无菌试验培养基的灵敏度进行验证。实际生产中，可以从配制好的培养液中取少量加入营养琼脂于恒温培养箱内培养，48小时即可观察有无污染。其它：高压灭菌设备、过滤除菌设备均应进行验证，确保灭菌和除菌效果;前者应在投产前及其后的每6个月进行验证，后者应在每次除菌前、后进行验证工作(至少应在除菌后进行一次)。另外，应将有毒区与无毒区严格分开，并有各自自立的空气净化系统及孵室，有毒区对无毒区应保持相对负压，防止病毒对培养细胞(尤其是细胞库)的污染。固体培养基，一类配制成的固体状态的基质。自动搅拌培养基制备器供应商

控制培养基的条件，控制培养基的pH 配制培养基必须根据微生物的特点调节pH。湖南琼脂培养基 培养基制备器

—种培养基制备分装一体机，其包括培养基制备器和自动分装系统，以及分别与该培养基制备器和自动分装系统连接的控制系统，其中所述培养基制备器包括外装壳体，该外装壳体设有容腔，所述容腔内设有搅拌罐，所述搅拌罐与所述容腔内壁呈间隔设置，其内设有夹腔，所述搅拌罐的底部与所述容腔内壁之间设有磁力搅拌器，所述磁力搅拌器的搅拌子向上延伸穿过所述搅拌罐的底部伸入至搅拌罐中；所述容腔的顶部设有外装箱盖，所述外装箱盖上设有箱盖保险锁;所述外装箱盖上分别设有分装连接孔和传感器安装孔，所述分装连接孔上设有带流量栗的出料管，所述出料管一端向外延伸穿过所述外装箱盖与所述自动分装系统连接，其另一端向内延伸伸入至培养基底部，所述传感器安装孔上连接有温度传感器，所述温度传感器也向下延伸伸入至培养基内；所述外装壳体上端设有多个进水管，所述进水管向内延伸穿过所述夹腔与所述搅拌罐内壁触接，所述外装壳体底部设有至少一个出水管，所述容腔底部设有加热元件;所述流量栗、磁力搅拌器、温度传感器、进水管和出水管、加热元件均与所述控制系统连接。湖南琼脂培养基 培养基制备器

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