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HEPESBuffer(1M,7.5pH)PreparationandRecipeHEPESbufferisoneoftheGood'szwitterionicbufferwithapHrangeof6.8-8.2.ItiscommonlyusedincellculturemediumasitspHiswellmaintainedwithchangesincarbondioxideconcentration.ToprepareLofHEPESBuffer(1M,7.5pH):ChangethevalueinthetextboxabovetoscaletherecipevolumeTable1.RequiredcomponentsComponentAmountConcentrationHEPES(mw:238.30g/mol)238.3g1MPrepare800mLofdH2Oinasuitablecontainer.Add238.3gofHEPEStothesolution.AdjustsolutiontodesiredpHby10NNaOH.AdddH2Ountilvolumeis1L.于4摄氏度保存。AVT长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐。河南登记号HEPES医院采购
1MHEPES缓冲液用注射级水配制,经过无菌过滤,其浓度为238.3g/L。HEPES是一种生物缓冲液,化学性质稳定,对温度和浓度变化不敏感。在pH7.2-7.6范围内,较碳酸氢钠缓冲液的缓冲能力更强。1.产品用途:常用的缓冲体系的一部分,可作为细胞培养基添加组分,维持pH恒定,推荐浓度为10-25nM。HEPES缓冲液在细胞培养过程中起什么作用?HEPES是一种弱酸,中文名字是羟乙基哌嗪乙硫磺酸,主要作用是防止培养基PH迅速变动。在开放式培养条件下,观察细胞时,由于培养基脱离了5%二氧化碳的环境,培养液中的二氧化碳迅速逸出,导致PH值迅速升高。若培养液加了HEPES,就可以维持在PH7.0左右。一般在进行克隆化培养时要添加HEPES.山东供注射用HEPES如何购买AVT稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、TRIS/TRIS-HCl、HEPES等生物保护剂与缓冲盐。
羟乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(HEPES)4-羟乙基哌嗪乙磺酸(简称HEPES),分子式为C8H18N2O4S。分子结构中既含有酸性的磺酸基(-SO3H),又含有两个碱性叔胺氮,所以呈现两性,可用来配制两性离子缓冲液。该缓冲溶液一般由一定量的HEPES溶于蒸馏水中,再用氢氧化钠调节pH至适当值。其pH缓冲范围一般为6.8~8.2。缓冲溶液的浓度以及外界温度对其pH值影响不大,因此能够较长时间维持稳定的pH值。因HEPES分子中的-SO3H呈现较强的酸性,易给出H+;两个叔胺氮各含有一个孤对电子,呈现碱性,可以接受H+生成季铵盐。所以磺酸基和叔胺在水溶液中互为缓冲对。而且,单个HEPES分子中的叔胺和磺酸基也可传递H+生成内盐,即两性离子。在水溶液中,HEPES分子、内盐以及磺酸基和叔胺各自产生的离子之间因H+或OH-的转移而能够相互转化建立平衡关系,凭借该平衡关系的移动来抵御外来酸碱的影响来调节溶液pH值稳定,所以具有缓冲作用,其平衡转化关系见下图。
缓冲溶液是许多生化反应、生产、实验过程中的重要溶液,对稳定溶液的酸碱度有重要的影响。本文以**常见的几种缓冲体系——磷酸盐缓冲溶液、硼酸盐缓冲溶液、三羟甲基氨基甲烷(简称Tris)-HCl缓冲溶液、羟乙基哌嗪乙磺酸(供注射用)(简称HEPES)缓冲溶液为例,介绍缓冲溶液的组成、缓冲原理及其在生物化学方面的应用。HEPES缓冲溶液具有对细胞无毒性、不易穿过生物膜、不参与细胞内生化过程等特点,所以在生化实验中具有***的应用,如可用于开放式细胞生长、细胞的长期观察、RNA或DNA提取试剂盒中。其次,相关研究表明以HEPES溶液做缓冲液有利于多肽在金纳米粒子表面的偶联反应。另外,HEPES缓冲溶液对镁生物降解影响的相关实验表明,HEPES能提高镁的生物降解性以及抑制镁不溶盐层的形成。国内艾伟拓注射用HEPES的cas号是什么?
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Tris-HCl缓冲液缺点:1、温度效应大,如4℃时pH=8.4,37℃时pH=7.42、pH值受溶液浓度影响较大,稀释十倍,pH值的变化大于0.1;3、对某些pH电极发生一定的干扰作用,所以要使用与Tris溶液具有兼容性的电极。4、易吸收空气中的CO2,所以配制的缓冲液要盖严密封。HEPES缓冲液HEPES是一种非离子两性缓冲液,其在pH7.2~7.4范围内具有较好的缓冲能力,常用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及PCR诊断试剂盒里。HEPES缓冲液优点:pKa值介于6.0和8.0之间;在水中具有高溶解度;具有膜不透性,不易穿透生物膜;对生化反应影响有限,可耐化学和酶解作用,且不与金属离子生成复合物或沉淀;有极低的可见光和紫外光吸收;离子浓度、溶液组成和温度对解离的影响小;HEPES缓冲液缺点:如果将HEPES水溶液暴露于环境光下三小时,会产生细胞毒性的H2O2;HEPES水溶液必须远离光线以免影响实验结果;而配置成溶剂后,要在4℃下保存,建议在短期内使用效果更佳;HEPES粉末放置的时候一般放于干燥的室内,不能直接长时间照射阳光。河南登记号HEPES医院采购
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