天津iclean细胞培养基批发厂

时间:2023年01月11日 来源:

    无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分,才能帮助细胞贴壁生长,包括以下几大类物质:1)促贴壁物质:一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2)促生长因子:针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些是许多细胞必不可少的,如胰岛素。3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中需含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常见的。MEM α培养基是一种改良的MEM培养基,与MEM培养基相比MEM α培养基营养更为丰富。天津iclean细胞培养基批发厂

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    Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型,在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度,降低了葡萄糖的用量,并修改了盐的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对***的细胞培养应用,我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,是体外培养中为预防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。 海南医疗细胞培养基源头直供Ham’sF-10营养混合物(Ham’sF-10Nutrient Mixture)是由Ham针对CHO细胞无血清培养设计出的一种培养基。

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    细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。(balancedsaltsolution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下(表1-1)。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5%CO2的培养条件。表1-1几种常用的BSS配方。

    含丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。一般配制成(采用平衡盐溶液溶解)与合成培养基(如MEM细胞培养基)以1:1的比例混合使用。目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。此外,血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。补体、抗体等都会影响细胞生长,甚至造成细胞死亡。目前,血清多作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5~20%,常用是10%。由于水解乳蛋白和血清成份复杂,批间差异大及存在病毒等外源污染风险,对下游生物制品的分离纯化和安全性都存在较大的影响,在生物制药行业的使用也越来越少。因此,基于对血浆成份的分析,合成细胞培养基应运而生。合成培养基是根据天然培养基的成分,用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。开发的基础培养基(minimalessentialmedium,MEM)。William’s E培养基主要用于大鼠肝上皮细胞的长期培养,也可用于其他哺乳动物的肝细胞培养。

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    Dulbecco’s改良培养基–DMEM(Dulbecco’sModifiedEagleMedium)是在MEM培养基的基础上研制的,与MEM培养基相比,氨基酸的含量增加了2倍,维生素的含量增加了4倍,同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L(低糖型),后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L(高糖型),现已广泛应用于各种细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂,对细胞无毒性作用,添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围,可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。 McCoy’s5A培养基是改良的Basal Medium5A,McCoy’s 5A含有还原型谷胱甘肽、细菌蛋白胨以及高浓度的葡萄糖。海南医疗细胞培养基源头直供

本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。天津iclean细胞培养基批发厂

    Grace’s昆虫培养基是由Grace改良的Wyatt培养基,该培养基与昆虫血淋巴的化学成分更为相近,Grace使用这种培养基成功建立了***个昆虫连续细胞系。Grace’s昆虫培养基**初用于澳大利亚白星橙天蚕蛾(Anthereaeucalypti)细胞的培养,适当补充添加剂后,Grace’s昆虫培养基可用于培养各种昆虫细胞,包括多种鳞翅类以及一些双翅类昆虫的细胞。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。Grace’s补充昆虫细胞培养基**初设计用于澳大利亚白星橙天蚕蛾(Anthereaeucalypti)的细胞生长。Grace’s补充昆虫培养基目前***用于草地贪夜蛾细胞Sf9和Sf21的生长。Sf9和Sf21细胞常规使用于杆状病毒表达载体系统(BEVS)表达重组蛋白。本产品含有水解乳蛋白、酵母粉、L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。Grace’s补充昆虫培养基含有Grace’s昆虫细胞培养基(PM152011)中不常见的水解乳蛋白和酵母粉,此产品需搭配血清或无血清添加物使用。 天津iclean细胞培养基批发厂

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