江苏通用细胞冻存液性能指标

细胞冻存简介生物医学科研实验1、培养室实验准备工作大致同细胞传代培养的前6个步骤。简言之：用紫外消毒等消毒超净工作台面；清洗消毒手部；观察细胞；预热培养用液；点燃酒精灯；取出巴斯德吸管、刻度吸管等插在无菌试管内。冻存液的配置方法：按如下比例配置：10%甘油+90%培养基，或者10%DMSO+90%培养基。用于配制冻存液的培养基中小牛血清浓度适量提高至20%或更高。所用的甘油需事先高压灭菌，如使用DMSO，则不需要任何灭菌措施。细胞冻存液除去蛋白酶，添加适量配置好的冻存细胞培养液.江苏通用细胞冻存液性能指标

冻存（Cryo-preservation）是一个将细胞器，细胞，组织，细胞外基质，***或者任何其他的在没有经调控的化学动力学因素影响下容易受损的生物组成物，将他们通过迅速降低到非常低的温度来进行保存（通常是使用固态二氧化碳的营造-80°C条件或者是使用液氮的营造的-196°C条件）。在很低的温度下，任何的酶和可能会对生物材料造成伤害的化学活跃因素都因为温的环境从而有效地解决。。就冻存这样的方法而言，人们努力寻找一个合适的低温，这样的温度不会造成在结冰过程中的由于冰晶的形成从而导致细胞的附加伤害，这是冻存中的头等大事。江苏通用细胞冻存液性能指标无血清快速细胞冻存液，是一种新型开发的快速冻存细胞的保护液.

冻存的温度将细胞存储在一个非常低的温度下，按理论上推断是能让细胞获得极长（接近无限）的寿命，然而实际上细胞这样的冻存有效寿命很难去证实，研究者们利用干制的种子进行相关的实验发现当样品被放置在不同的温度下的时候（甚至是温的时候），这些样品会发生明显的变化性的恶化。当温度低于多元醇水溶液的玻璃转化点（Tg）的时候，大约在-136°C左右，这被认为是能够**降低生物活性的温度范围；而当温度达到了-196°C（液氮的沸点

细胞冻存是细胞培养、引种、保种和保证实验顺利进行的重要技术手段。在细胞建株和建系中，及时冻存原始细胞是十分重要的。在杂交瘤单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞、每次克隆化得到的亚克隆细胞的冻存保种常常是必不可少的实验操作。因为在没有建立一个稳定的细胞系或稳定分泌抗体的细胞系的时候，细胞的培养过程中随时可能因细胞的污染、分泌抗体能力的丧失或遗传变异等等导致实验失败，如果没有原始细胞的冻存，则因为上述的意外而前功尽弃无血清快速细胞冻存液收集悬浮细胞或贴壁细胞，离心去除上清液;

细胞冷存液若长期保存，次日转移到液氮中即可。本产品是一款适用于贴壁细胞，悬浮细胞，干细胞的通用型细胞冻存液。产品优势：1.化学成分明确，无任何外源蛋白和血清，适用于各类动物细胞株冻存。2.无需程序降温，细胞复苏率90%以上。3.冻存细胞可直接存放于-80℃冰箱，稳定保存数年。4.即用型产品，4℃可稳定保存。细胞冻存：1.收集融合率>90%的对数期的贴壁细胞或者悬浮细胞于离心管中。2.1000rmp离心5分钟，去除离心管中的上清液，收集细胞沉淀。3.加入适量细胞冻存液于离心管中，使细胞浓度为1x106～1x107cells/mL。细胞冻存液取对数成长期的体细胞，除去旧细胞培养液，用PBS清理.江苏通用细胞冻存液性能指标

细胞冻存液避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。江苏通用细胞冻存液性能指标

一、细胞冷冻保存1.材料：生长良好之培养细胞、新鲜培养基、DMSO(SigmaD-2650)、无菌塑料冷冻保存管(Nalgene5000-0020)、0.4％（w/v）trypanblue(GibcoBRL15250-061)、血球计数盘与盖玻片、等速降温机(KRYO10SeriesII)2、冷冻保存方法：（1）传统方法:冷存管置于4℃10分钟--->-20℃30分钟--->-80℃16～18小时(或隔夜)--->液氮槽vaporphase长期储存。-20℃不可超过1小时，以防止胞内冰晶过大，造成细胞大量死亡，亦可跳过此步骤直接放入-80℃冰箱中，惟存活率稍微降低一些。（2）程序降温：利用已设定程序的等速降温机以-1～-3℃/分钟之速度由室温降至（-80℃以下）-120℃，再放在液氮槽vaporphase长期储存。适用于悬浮型细胞与hybridoma之保存。江苏通用细胞冻存液性能指标