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血清是血液凝固后的液体部分,不含血细胞、纤维蛋白及凝集因子等,含有多种对细胞生长必需的营养因子及大分子物质。血清白蛋白是胎牛血清的主要成分。此外,重要的是,胎牛血清中含有大量对细胞生长必需的生长因子 [1, 2] 。 胎牛血清也含有一些小分子物质,如氨基酸、糖类、脂类及类物质。胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很较广。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。相对于新生动物血清或成体动物血清来说,胚胎期动物血清有什么优点?与其它类型血清相比,胚胎期动物血清含有更多的生长因子,及较少的gamma球蛋白含量。血清与血浆的区别:血清是由血液凝固后的上清液制备的;而血浆中含有抗凝剂,所以血浆中含有血液凝固相关的蛋白。血清提供促接触和伸展因子使细胞贴壁免受机械损伤。徐州OriCell血清报价
胎牛血清的主要成分:蛋白质类包括白蛋白、球蛋白、α-巨球蛋白(抑制胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;多肽类,主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,较为主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;类,对细胞的作用是多方面的。包括:胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:促生长:促进细胞增殖的效应;氢化可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清中 的氢化可的松,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。台州细胞培养用血清哪里有使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。
热灭活:一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清,因为此加热步骤,可以使补体去活化,而补体所参与的反应有:溶细胞活性,平滑肌的收缩,肥大细胞和血小板组胺的释放,增强吞噬作用,淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒立显微镜下观察,像是 "小黑点",常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。购买的时候注意询问厂家是否是已灭清。
血清为何要热灭活,有必要对所有血清都灭活吗?如何正确的进行灭活?加热可以灭活补体系统。启动的补体系统参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究中,培养ES细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭清。实验显示,热灭清对大多数的细胞而言是不需要的,对于非必须的细胞来说血清灭活对于细胞生长只有微小甚至无任何作用,还可能造成生长速率降低,沉淀物还会明显增多,不利于细胞观察。因此,若非必须,不需要对血清进行灭活处理。将需要进行处理的血清置于56℃水浴30min,建议加放空白对照(同体积水)使用温度计测温,以测得温度为56℃时为计时起始点,加热中可不时轻度旋转混匀血清。胎牛血清的牛腹泻病毒:阴性;大肠杆菌噬菌体:阴性。
血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗凝剂,则凝血反应被,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆较为大的区别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时间逐渐减少以至消失。这些也都是与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以血清为样品。新牛血清取自出生24小时之内的新生牛。台州细胞培养用血清哪里有
将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。徐州OriCell血清报价
非正规胎牛血清的产品会存在很多的问题:疫区来源,无合格质检使胎牛血清存在生物学污染:支原体、噬菌体、病毒、原虫等,会直接影响实验的结果和稳定。工艺不规范,导致采集的原血放置时间过长或操作不当导致溶血,血液中血细胞裂解,血清颜色呈红色或暗红色,这样的血清含有许多胞内产物,里面很多物质都会对细胞有刺激作用,影响实验的稳定性和数据的真实性。血清批次不稳定,添加来补?很多不法商贩拿到低廉的疫区原料血清进行加工生产,为了保障血清的培养效果会对血清进行处理,较为常见的是添加、转铁蛋白、BSA、生长因子等,还有的会和新生牛血清、培养基等勾兑,更有甚者用的根本就不是牛血清,此类操作对所有生物学实验都有巨大的影响。徐州OriCell血清报价
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