山西样本细胞培养基批发厂
培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg~320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意:向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压,特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是,细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与CO2体系进行缓冲,因此,气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5%,培养液中NaHCO3的加入量为;如果CO2浓度维持在10%,培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧,以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH-范围内具有较好的缓冲能力,但是非常昂贵,在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠()共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下,细胞培养瓶的盖子应拧紧,以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂,酸性培养液呈橙黄色,碱性培养液呈深红色。TNM-FH昆虫培养基可用于各种鳞翅类昆虫细胞的培养。含有多类细胞培养所需的氨基酸、无机盐等多种成分。山西样本细胞培养基批发厂
细胞培养基的种类很多,按其来源分为合成培养基和天然培养基(目前使用的培养基绝大部分是合成培养基),按其物质状态分为干粉培养基和液体培养基两类。干粉培养基需由实验者自己配制并灭菌,液体培养基由专业商家提供,用户可直接使用,非常方便。1、合成培养基的主要成分有:氨基酸、碳水化合物、无机盐、维生素及其它辅助物质:氨基酸氨基酸是组成蛋白质的基本单位。不同种类的细胞对氨基酸的要求各异,但有几种氨基酸细胞自身不能合成,必须依靠培养液提供,这几种氨基酸称为必需氨基酸。其中谷氨酰胺是细胞合成核酸和蛋白质必需的氨基酸,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。因此,各种培养液中都有较大量的谷氨酰胺。但是,由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置于-20℃冰箱中保存,在使用前加入培养液内。已含谷氨酰胺的培养液在4℃冰箱中储存2周以上时,还应重新加入原来量的谷氨酰胺。碳水化合物碳水化合物是细胞生长主要能量来源,其中有的是合成蛋白质和核酸的成分。主要有葡萄糖、核糖、脱氧核糖和醋酸等。无机盐培养液中无机盐的主要功能是帮助细胞维持渗透压平衡。此外,通过提供钠,钾和钙离子,帮助细胞调节细胞膜功能。安徽实验细胞培养基批发Ham’s F-12营养混合物(Ham’s F-12 Nutrient Mixture)初用于CHO细胞的无血清培养。
无血清培养基中通常需要添加一些额外的组分,才能帮助细胞贴壁生长,包括以下几大类物质:1)促贴壁物质:一般为细胞外基质,如纤连蛋白、层粘连蛋白等。它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子,对许多细胞的繁殖和分化,起着重要作用。纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化,这些细胞包括成纤维细胞、肉瘤细胞、粒细胞、肾上皮细胞、肾上腺皮质细胞、CHO细胞、成肌细胞等。2)促生长因子:针对不同细胞添加不同的生长因子。也是刺激细胞生长、维持细胞功能的重要物质,有些是许多细胞必不可少的,如胰岛素。3)酶抑制剂:培养贴壁生长的细胞,需要用胰酶消化传代,在无血清培养基中需含酶抑制剂,以终止酶的消化作用,达到保护细胞的目的。常用的是大豆胰酶抑制剂。4)结合蛋白和转运蛋白:常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白。牛血清白蛋白的添加量比较大,可增加培养基的粘度,保护细胞免受机械损伤。许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白。5)微量元素:硒是常见的。
Leibovitz’sL-15培养基的缓冲系统由磷酸盐和游离碱基氨基酸组成,代替了传统的碳酸氢钠缓冲系统,同时,用半乳糖和**酸钠代替葡萄糖可以防止酸性代谢副产物的形成,有助于维持培养液PH的稳定,适合用于非CO2平衡环境的细胞培养。Leibovitz’sL-15培养基适用于猴肾细胞和HEP-2的培养、原代(如胚胎和成人组织)细胞分离、多种病毒的培养以及神经元的培养等。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,是体外培养中为预防微生物污染常用的***,其中,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。本产品含有多类细胞培养所需的氨基酸、维生素、无机盐等多种成分,但不含蛋白质、脂类或任何生长因子,故此产品需搭配血清或无血清添加物使用。 Dulbecco’s 改良培养基–DMEM(Dulbecco’s Modified Eagle Medium)现已广应用于各种细胞的培养。
Ham’sF-12K培养基是Ham’sF-12营养混合物的Kaighn’s改进型,在Ham’sF-12的基础上提高了氨基酸和**酸的浓度,降低了葡萄糖的用量,并修改了盐的成分和含量(Konigsbergs)。Ham’sF-12K培养基**初设计用于培养原代人肝细胞以及分化的大鼠和鸡的细胞。针对***的细胞培养应用,我们提供多种组分的Ham’sF-12K改良培养基。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂,用以持续监测培养液的酸碱度,在低PH值时酚红使培养液呈黄色,而较高的PH值时使培养液呈紫色,PH值~,**适合细胞培养。但酚红也有一些缺点,研究表明酚红可以模拟固醇类***(特别是雌***)的作用,因此在用到雌***敏感的细胞时(如乳腺组织),比较好使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外,一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”,是体外培养中为预防微生物污染**常用的***,其中,青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成,对革兰阳性菌特别有效;而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合,抑制细菌蛋白质的合成,对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效,但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。 针对细胞培养应用,我们提供多种组分的RPMI1640改良培养基。海南昆虫细胞培养基
Eagle培养基由Harry Eagle在Eagle基本培养基(BEM)的基础上发展而来的。山西样本细胞培养基批发厂
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