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病理实验外包，病理染色HE染色常见问题：Q3：细胞核染色过浅，颜色暗淡答：切片在苏木素染液中停留过短，或苏木素过度氧化失效，或分化时间太长。对策：重新染色。将组织切片放入0.01%氢氧化钠、0.5%氨水、饱和的碳酸氢钠溶液、乙醇溶液，每个3-5min即可，接着重新染色。可以适当地组织的嗜碱性以增强核染色，如Zenker液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中3h，自来水冲洗5-10min染色，或Bouin液固定的切片可放入5%碳酸氢钠溶液中1h，自来水冲洗10min染色。Q4：细胞核染色过深，胞浆着蓝色答：切片在苏木素染液中停留过长；或切片太厚；或分化时间太短。这种情况首先镜下看看切片厚度(比较好厚度1-2层细胞核)，要么重新染色，要么重新制片。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。电镜检测，病理实验外包选南京英瀚斯。安徽专门做病理实验外包

病理实验外包，病理染色常见染色介绍VonKossa染色：简介：钙结节的形成为成骨细胞特有，Vonkossa染色法是染色矿化结节的经典方法，利用硝酸银与钙盐的复分解反应形成可被还原的银盐，在强光或紫外光下或者强还原剂作用下使其还原为黑色的金属银。简要流程：石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→硝酸银滴染→苏木素染核→伊红染色→脱水、透明、封片（中性树胶）→Vonkossa染**（钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，细胞核呈蓝色，背景呈红色；或者钙盐沉积区域呈黑色或棕黑色，背景呈红色）。VonKossa染色利用金属离子置换反应检测组织中钙盐沉积，由硝酸银溶液中的银离子置换组织中沉积的钙离子。该染色可用于血管钙化的检测安徽专门做病理实验外包病理实验外包检测|组织检测|科研课题外包|实验外包服务。

病理实验外包，病理染色常见染色介绍番红-固绿（骨）染色：番红O-固绿染色可直观反映关节软骨、软骨下的骨组织结构，软骨呈红色，成骨呈绿色，对比鲜明，区分清晰，在关节软骨及软骨下骨的形态学研究中备受青睐。嗜碱性的软骨组织与碱性染料番红O结合呈现红色，嗜酸性的骨组织和酸性染料固绿结合而呈绿色或蓝色。本质上，番红O与蛋白聚糖中的多聚阴离子物质（硫酸软骨素和硫酸角质素）成正向比例结合（离子浓度），不与胶原结合，可间接反应基质中蛋白聚糖的含量与分布。正常的软骨基质分布均匀一致，当软骨受到损伤时，创伤刺激可使软骨基质中糖蛋白立即释放活化，使基质成分发生变化，导致番红O淡染，甚至失染。固绿可与结构疏松的胶原纤维牢固结合，不宜褪色。简要流程：石蜡切片/细胞爬片/冷冻切片→脱蜡至水→固绿染色→番红O染色→脱水、透明、封片（中性树胶）→番红O-固绿染**（成骨呈绿色，软骨呈红色）。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。

病理实验外包，南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1.  冰冻切片室温晾干15 min，可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时（此步可不洗）。2.  滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液（抗体的量视组织大小而定，原则是可以均匀覆盖组织面，且保证整个过程中不会使组织干涸）。3.  将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒，室温孵育2小时或4℃过夜。4.  第二天先将湿盒放到37℃回温1 h，然后吸取片上的一抗进行回收，将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.  滴加用PBS稀释好的二抗（避光）置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗，切片置于染缸内，PBS洗5 min×3次。6.  滴加DAPI工作液染核，室温10~20 min（工作浓度0.1%染色15 min）。7.  回收DAPI，滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶，用处理干净的盖玻片封片，即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8.  做好的片放在切片盒内，置于4℃冰箱，可保存一周左右。病理实验外包检测平台 - LCMS检测_病理实验外包检测_南京英瀚斯。

病理实验外包，病理染色冰冻切片介绍;冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，明显缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等步骤，因而较适合于脂肪、神经组织和一些组织化学的制片，并作为快速切片的方法应用在临床诊断。一、取材应尽可能快地采取新鲜的材料，防止组织发生死后变化。二、速冻1.将组织块平放于软塑瓶盖或特制小盒内（直径约2cm）。2.如组织块小可适量加OCT包埋剂浸没组织，然后将特制小盒缓缓平放入盛有液氮的小杯内。3.当盒底部接触液氮时即开始气化沸腾，此时小盒保持原位切勿浸入液氮中，大约10~20s组织即迅速冰结成块。4在制成冻块后，即可置入恒冷箱切片机冰冻切片。5.若需要保存，应快速以铝箔或塑料薄膜封包，立即置入-80℃冰箱贮存备用。南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包检测,医学实验,动物模型构建。天津整体病理实验外包实验室

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病理实验外包，病理染色组织的取材和要求：知识点1：对送检组织标本的要求送检组织标本在手术切除或活检后应当立即放入4%中性缓冲甲醛溶液中固定。尸检标本应当尽量在死亡后尽早取材固定。送检组织需要全部取材的，应当在送检单上注明，有特殊要求（如细菌培养、解释道化学分析等）应当事先联系，并且在标本未固定前进行处理。知识点2：组织取材要求在对送检组织标本进行详细检查的基础上，根据诊断的需要，确定取材的部位和块数。切取的组织应当按照不同的部位分别给予不同的编号或标记，以便镜检时核对。另外，尽可能在取材前对有意义的标本的表面及剖面镜下摄影，并编号存档南京英瀚斯，专业的病理染色实验服务平台。安徽专门做病理实验外包

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