北京10K超滤离心管使用方法

质量和重心都应该平衡。注意速度和加速度不要太快，否则会直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心预冷至4度〉。膜和旋转轴的方向根据说明进行调整（对于角向离心机，膜垂直于轴〉。在实际应用中，一般的速度开度比手动低，可以延长离心管的使用寿命。4。当浓缩到剩余的1毫升时，取中国产的504.1l布拉德福德溶液，加104 l流过，看是否变蓝，以判断ur管是否漏蛋白。如果管道泄漏，重新倒入上层，然后流过新管道开始超滤。为了准确确定管道是否泄漏，用5 mg/ml BSA离心10分钟，然后将其穿过，大致运行胶水或Bradf ord，继续添加剩余的蛋白质溶液以浓缩（在冰上操作以防止蛋白质加热〉，直到所有浓缩物都添加完毕。离心过程中应注意是否有蛋白质沉淀，导致堵塞。如果发生沉淀，有必要确定沉淀的具体原因是蛋白质浓度过高还是缓冲液不当。使用超滤离心管时应注意遵循正确的操作流程和实验室规范，并定期进行质量控制和评估。北京10K超滤离心管使用方法

选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。广东再生纤维素离心管生产厂商超滤离心管可以用于检测样品中的蛋白质、碳水化合物等有机分子。

超滤离心管使用注意事项：当浓缩到剩下1ml时，取50ul缓冲溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mgml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的缓冲溶液，直到蛋白不发生沉淀为止。

超滤离心管使用注意事项：（1）选择合适的超滤管。通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。2）新买来的超滤是干燥的，使用前加入超纯水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。（3）平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。不同离心机的转速 rpm换算成g之后，有所不同。离心机的加速度调至较低档，减小对膜的压力。注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开离心机，否则离心机出问题时，无法一时间处理。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。超滤离心管可以用于分离和纯化各种大分子化合物，如蛋白质、核酸、多糖等。

蛋白质浓缩和替代缓冲液常用的超滤管，微孔(mwco10kd)常用的micon-ultra-15超滤管。根据靶蛋白的分子量、浓缩前的体积和浓缩的靶体积，还可提供不同尺寸和尺寸的其他类型的mwco超滤管。它可以重复使用。1。选择合适的超滤管主要考虑分子量和浓度。通常靶蛋白的分子量不应大于靶蛋白分子量的1/3。例如，当靶蛋白的分子量为35kDa时，可以选择靶蛋白分子量为10kDa的超滤管。如果靶蛋白的分子量约为10kd，则可使用分子量为3kd的超滤管。2。新购买的超滤是干燥的。使用前加入Milliq水。水的体积完全覆盖在膜上，冰浴或冰箱被预先冷却几分钟。倒出水后，可以加入蛋白质溶液。蛋白质添加量不超过管顶白线。超滤管在加入蛋白质溶液前需要在冰上预先冷却。三。平衡。使用前应先对超滤膜进行湿润化处理，以免损坏其结构并保证较佳效果。北京10K超滤离心管使用方法

超滤离心管通常具有标准化设计，使其易于与其他实验室设备集成使用。北京10K超滤离心管使用方法

脱盐、更换缓冲液或渗滤是从含有生物分子的溶液中去除盐分或溶剂的重要方法。盐分去除或缓冲液更换可通过超滤管来完成，具体过程是浓缩样本，弃去滤出液,然后向浓缩液中加入任何所需的溶剂,恢复到样本原先的体积。"洗出"的过程可反复进行，直到杂质的浓度被充分降低。关于超滤管的常见问题与解答：Q:超滤管的膜材质是什么?A:超滤管的膜材质为默克密理博特有的Ultracel再生纤维素膜，生产工艺严格,截留分子量明确而准， 蛋白吸附损失小。Q:如果要用超滤的方法分离两种蛋白，那么这两个蛋白的大小需要相差多少?A:按照经验,建议两个蛋白的分子量要相差 一个数量级(10倍)。北京10K超滤离心管使用方法