如何检测外泌体

外泌体能携带多种生物活性分子循环于血液／体液中并介导长距离的细胞间通讯，中流来源外泌体富含的蛋白质、核苷酸、脂质等分子能够反映其来源细胞的生理及病理状态，外泌体特殊的脂质双分子层结构能保护其内RNA等分子免于降解，因此，检测中流外泌体成为液体活检一个明显优势。临床试验研究表明，外泌体在多种疾病的早期诊断、疗效和预后监测等方面都具备较好的应用价值，正逐渐成为临床诊疗中新的、理想的生物标志物和可能的靶向药物载体。随着技术的进步，组学时代的到来，大规模蛋白质组学已经被联合应用于筛选和揭示多种ai症细胞外囊泡的标志物。外泌体被包裹在坚硬的双层膜中，双层膜保护外泌体的内容物，使外泌体能够在组织中长距离移动。如何检测外泌体

外泌体研究可以指导诊治肝损伤、酒精或非酒精性脂肪肝等其他肝脏疾病。药物诱导肝损伤（DILI）大鼠模型中，尿外泌体中的蛋白含量减少，包括CD26、CD81和其他潜在的标志物蛋白。而另一项研究则发现DILI大鼠血清中分离到的外泌体含有更高水平的蛋白，如HSP70、HSP90等。MSCs来源的外泌体可以诱导肝细胞增殖相关基因表达，减弱CCL4诱导的肝损伤。而酒精刺激会促进外泌体的分泌，miRNAs水平也会升高，并促进细胞因子的分泌，唤醒单核细胞的分化。尽管已取得上述成果，我们对外泌体的研究尚不够深入，外泌体在肝脏生理和病理中的重要作用及其临床应用仍有待继续探索。成都血液外泌体外泌体的复杂性，为疾病检测和监测提供了一个多指标的诊断窗口。

外泌体（Exosome）开始被认为是毫无作用的“垃圾”，但随着研究的不断深入，人们发现事实并非如此，外泌体（Exosome）是具有功能活性并可进行细胞间信息传递的微囊泡。外泌体（Exosome）介导瘤细胞的免疫耐受。瘤细胞来源的外泌体（Exosome）本身可作为瘤抗原，因此，瘤来源的外泌体（Exosome）既是一种抗原呈递系统，同时也是瘤排斥抗原的来源。瘤来源的外泌体（Exosome）能够通过传递某些抑制信号，在机体免疫应答过程中起负性调节作用，诱导瘤细胞形成免疫耐受，从而逃避免疫细胞的杀伤。

外泌体作为疾病诊断的标志物具有其独特优势:(1)与正常细胞相比，病变细胞产生的外泌体在分泌量和内容物方面存在明显差异。病变的细胞和组织能够产生更多外泌体。(2)由于特殊的生成方式，外泌体的组成不同于来源细胞。其内包含的一些特异性蛋白质能够揭示外泌体的起源、结构和运输方式，有利于深入了解外泌体的产生机制。(3)病变细胞分泌的外泌体通过胞吐的过程进入血液、尿液等体液，囊泡状结构能够保护外泌体内部生物分子不受体液中蛋白酶、磷酸酶、核酸酶等干扰，有利于保持其结构完整和生物活性，通过对此类体液进行分析可以实现疾病的无创或微创检测。细胞分泌到细胞外环境中分别称为外泌体和微泡的细胞外膜泡。

虽然外泌体作为药物载体具有生物兼容性、稳定性和内在靶向性等潜在优势，但是外泌体在药物递送中的应用研究才刚刚起步，尚有许多问题需解决：选择何种细胞作为外泌体的供体：如DCs来源的外泌体可用于免疫治理，因其富含组织相容复合物（MHC）及T细胞共刺激分子，能在体内唤醒T淋巴细胞，进而抑制瘤细胞增殖；骨髓来源的间充质干细胞（MSCs）来源的外泌体对KRAS基因有抑制作用；γδT细胞、自然杀伤细胞（NK）、瘤细胞等均有研究报道可作为载药级别外泌体的细胞来源。人体内多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体，包括干细胞、免疫细胞、内皮细胞、及平滑肌细胞等。鼻腔灌洗液外泌体Dir

超速离心是从生物体液或细胞上清分离外泌体的金标准方法。如何检测外泌体

流式细胞技术针对外泌体的表面抗原标记物进行检测，能够实现外泌体的高通量、多通道分析。但是由于外泌体的粒径小、折射率低，所以采用常规的流式细胞仪进行检测时往往需要将外泌体与beads连接以增大表面积、增强反射，操作耗时又费力。Tian等搭建了一种高灵敏度的流式细胞仪(HSFCM)，将可检测的外泌体粒径降至40nm，能够在不连接beads的情况下实现每分钟10000个外泌体的检测，并且能够结合免疫荧光的方法进行外泌体标志蛋白质的定量检测，目前该仪器已商品化。如何检测外泌体