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病理实验外包,石蜡组织脱水注意事项1. 脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。2. 在更换高一级的脱水剂时,比较好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。3. 在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。4. 在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。5. 如需过夜,应停留在70%酒精中。6. 脱水必须彻底,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象。病理实验外包检测,一站式生物病理实验外包检测平台。重庆比较好的病理实验外包公司
病理实验外包常见染色介绍MASSON染色:masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合,胶原纤维呈蓝色,肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。Masson染色是显示胶原纤维分布的经典染色方法,利用染色的两种不同分子量的阴离子在组织渗透性的差异,根据不同的渗透性能差异,区分出不同的组织成分。经Masson染色后,胶原纤维呈现蓝色,肌纤维红色,细胞核蓝黑色。Masson染色可用作心梗模型、肺纤维化、肝纤维化以及肾纤维化模型的定性与胶原纤维沉积的半定量分析。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。重庆比较好的病理实验外包公司病理实验外包所需样本如何保存。
病理实验外包,南京英瀚斯可开展冰冻切片免疫荧光染色1. 冰冻切片室温晾干15 min,可用含10%正常山羊血清的PBS室温封闭切片1小时(此步可不洗)。2. 滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(抗体的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面,且保证整个过程中不会使组织干涸)。3. 将切片放在加了PBS的免疫组化湿盒,室温孵育2小时或4℃过夜。4. 第二天先将湿盒放到37℃回温1 h,然后吸取片上的一抗进行回收,将切片插入到小染缸PBS冲洗。5. 滴加用PBS稀释好的二抗(避光)置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗,切片置于染缸内,PBS洗5 min×3次。6. 滴加DAPI工作液染核,室温10~20 min(工作浓度0.1%染色15 min)。7. 回收DAPI,滴加5-10 μl 抗荧光衰减封片剂或中性树胶,用处理干净的盖玻片封片,即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下观察拍照。8. 做好的片放在切片盒内,置于4℃冰箱,可保存一周左右。
病理实验外包常见染色介绍Warthin-Starry银染:Warthin-Starry银染染色原理在于螺旋体表面的黏蛋白与银结合,呈黑色。染色结果:菌丝及颗粒呈黑色,背景呈黄色。银染一种是检测聚丙烯酰胺凝胶中蛋白质的方法,其原理是银离子在碱性pH环境下被还原成金属银,沉淀在蛋白质的表面上显色。银染的方法种类很多,有文献报道的就有100多种。但是其准确的染色机制还不是特别地清楚。由于银染的灵敏度很高,可染出胶上低于1ng的蛋白质点,故普遍地用在2D凝胶分析上,及极低蛋白含量测定的垂直凝胶中。主要是用于垂直凝胶电泳中低丰度蛋白的检测,如内源性GST-Pulldown、Co-IP等实验中相互作用蛋白的研究。南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。病理实验外包,组织检测,南京英瀚斯生物科技有限公司。
病理实验外包,病理染色结缔组织染色法1.Mallory三色染色法蓝色:胶原和网状纤维淡蓝色:软骨、粘液、淀粉样变物质红色:神经胶原纤维、肌纤维、酸性颗粒橘红色:髓鞘、红细胞2.Masson三色染色法绿色:胶原纤维红色:肌纤维橘红色:红细胞3.显示胶原、网状和弹性纤维的三联染色法红色:胶原纤维黑色:网状纤维绿色:弹性纤维淡黄色:肌肉、红细胞南京英瀚斯,专业的病理染色实验服务平台。英瀚斯生物专业实验外包细胞实验及后续检测一站式完成。病理实验外包,病理染色服务,HE染色。重庆比较好的病理实验外包公司
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病理实验外包,病理染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。重庆比较好的病理实验外包公司
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