云南靠谱的HE染色
HE染色多聚甲醛保存组织的注意事项:多聚甲醛放置过久其中的醛基可能会被氧化为酸,使溶液pH降低,从而影响染色。不同细胞或组织样品所需的固定时间有所不同,应当根据细胞或组织的种类以及组织块的大小来调整固定时间。多聚甲醛虽然作用温和,但能硬化组织,固定时间过久会导致组织变脆,切片时易碎。因此固定时间通常不宜超过24小时。多聚甲醛可长期存在于固定过的细胞或组织样品中,固定完成后用适当的洗涤液或水冲洗数小时仍会有残留,因此后续实验结果如果受醛基影响,须尽量洗去残留的多聚甲醛。醛基与抗原蛋白的氨基交联形成羧甲基,使抗原决定簇的三维构象出现空间障碍。分子间交联形成的网格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇,使之不能充分暴露,可造成假阴性的染色,影响免疫组化结果。因此,4%多聚甲醛固定的细胞或组织样品在进行免疫组化检测时,有时需要对抗原先进行修复,然后才能进行免疫染色等后续操作。冰冻组织切片的HE染色。云南靠谱的HE染色
HE染色法,。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色。而线粒体用HE染色不可见,活细胞通常要求活细胞近似无色线粒体需要用健那绿来染色,再在高倍镜下观察。从人或动物新鲜尸体上取下块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使、细胞的蛋白质变凝固,以防止细胞后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。一般用由低浓度到高浓度酒精作脱水剂,逐渐脱去块中的水份。再将块置于既溶于酒精,又溶于石蜡的透明剂二甲苯中透明,以二甲苯替换出块的中酒精,才能浸蜡包埋。上海推荐的HE染色检测HE染色,一站式实验外包服务平台。
HE染色就是用苏木精和伊红对细胞内的核糖体和细胞质染色的方法。H:Hematoxylin,苏木精E:Eosin,伊红苏木精(Hematoxylin,H)是一种碱染料,可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色,被碱染料染色的结构具有嗜碱。伊红(,E)是一种酸染料,能将细胞质染成红色或淡红色,被酸染料染色的结构具有嗜酸。染色前,须用二甲苯脱去切片中的石蜡,再经由高浓度到低浓度酒精,***入蒸馏水,就可染色。 很多细胞在新生时期胞浆对伊红着色较淡或轻度嗜碱,当其衰老时或发生退行变则呈现嗜伊红浓染。 胶原纤维在老化和出现透明变时,伊红着色由浅变深。
HE染色切片中出现类似色素样的点状结晶和黑色光滑的细胞核原因:切片封片前放置在空气中时间太长,以至于二甲苯挥发切片干燥所致。对策:移去组织切片上的盖玻片和封固剂,重新处理。将切片水洗数分钟,然后重新脱水、透明、封固。封片过程中要保持组织切片的轻度湿润,尽量不要让其干燥。细胞核呈红、棕色改变原因:苏木精染色液过度氧化和切片在苏木精染液染色后返蓝不足。对策:首先,每次染色之前检查苏木精染色液的染色能力,发现氧化过度应及时更换。其次,可用流水、温水或弱碱性溶液如稀氨水、0.2%碳酸氢钠等,在苏木精染色后,给切片以足够的蓝化时间。HE染色,即是苏木精-伊红染色法,是形态学比较常用的染色方法。
HE染色碱染料染主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着色。学上常用的一种染色方法为苏木精 伊红染色法。苏木精 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸颗粒呈强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白液体呈粉红色。HE染色切片知识以及如何做出漂亮的切片。广东质量好的HE染色服务
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HE染色原理1、细胞核染色的原理:苏木精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。2、细胞浆染色的原理:伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色与染液的pH在胞浆蛋白质等电点(4.7—5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,与胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。云南靠谱的HE染色
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