辽宁普誉公司左旋肉碱测定用试剂HEPES

时间:2023年06月21日 来源:

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

荧光光度法

MitsuoMaehara等14(1988)采用一种简单的荧光法对血清中游离肉碱进行测定,测定原理与分光光度法基本类似。肉碱与乙酷CoA在CAT的催化下反应生成乙酷肉碱和COASH,COASH与BIPM耦合生产强荧光物质COA-BIPM光强度与肉碱的含量成正比。通过测定荧光强度,可以得知血清中的肉碱含量。该方法的批内和批间变异系数(C分别为5.2%和2.6%,肉碱回收率在98%~113%之间与显色法的测定结果相比具有良好的相关性(相关系数r>0.90)。该方法灵敏度较高,比较低检测限为10pmol/L。KojiroMatsumoto等[15](1990)开发了光流动注射法对丙戊酸***的患者血清中的肉碱进行测定。该方法使用了肉碱脱氢酶(CDH)和硫辛酷胺脱氢酶(DS)两种固定化酶催化两步反应***是肉碱和氧化型辅酶I(NAD+)在CDH的催化下反应生成还原型辅酶I(NADH)第二步是NADH和刃天青(C12H7NO4)在DS的催化下反应生成物质试灵(C12H7NO3)试卤灵的荧光强度与肉碱的含量成正比。用该方法检测肉碱时,肉碱的标准曲线在0.1~1.0nmol范围内线性测的激发光波长和发光波长分别为560nm和580nm。 上海普誉科贸有限公司是一家专业提供 左旋肉碱测定用的公司,价格实惠,欢迎您的来电!辽宁普誉公司左旋肉碱测定用试剂HEPES

试剂的组成和配制试剂一:液体25mL×1瓶,4℃保存。试剂二:粉剂×1支,-20℃保存。临用前加入250μL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。试剂三:液体10μL×1支,4℃保存。临用前加入250μL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。试剂四:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加入22.5mL试剂五充分溶解备用;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。试剂五:液体30mL×1瓶,4℃保存。工作液的配制:临用前请根据拟用工作液体积(样本数×0.92mL),将试剂二、三和四按照1:1:90的比例混合,或者直接把试剂二和试剂三加入到试剂四中混匀(可以测定24样);加样前置37℃(哺乳动物)或25℃(其它物种)水浴锅中预热30min;现配现用;浙江婴幼儿食品用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A三锂盐上海普誉科贸有限公司 左旋肉碱测定用获得众多用户的认可。

1试验方法——《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》(GB29989—2013)1.1原理概述将样品中的蛋白质用高氯酸溶液沉淀,过滤后的滤液用氢氧化钾溶液皂化,使左旋肉碱游离。在乙酰肉碱转移酶的催化作用下,游离的左旋肉碱和乙酰辅酶A反应生成乙酰肉碱和游离的辅酶A。辅酶A和显色剂发生显色反应,可从工作曲线上查得相应的质量浓度,据此计算样品中左旋肉碱的含量。1.2试验用品1.2.1试剂和标准品13%的高氯酸溶液(HClO4);4mol/L的氢氧化钾溶液(KOH);10mol/L的氢氧化钠溶液(NaOH);2-硝基苯甲酸;N-2-羟乙基哌嗪-2-乙烷磺酸;乙二胺四乙酸二钠;乙酰辅酶A(CoA);乙酰肉碱转移酶(CAT)。其中,乙酰辅酶A(CoA)和乙酰肉碱转移酶(CAT)需要在2~8℃的环境中保存。试验用水均为三级水,所用试剂均为分析纯。左旋肉碱标准品(C7H15NO3):纯度≥98%。

乙酰辅酶A

肉碱乙酰转移酶乙酰肉碱转移酶

5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)69-78-3

N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9

HEPES

乙酰辅酶A三锂盐

左旋肉碱L-肉碱541-15-1

维生素BT541-15-1

乙酰辅酶A是能源物质代谢的重要中间代谢产物,在体内能源物质代谢中是一个枢纽性的物质。糖、脂肪、蛋白质三大营养物质通过乙酰辅酶A汇聚成一条共同的代谢通路——三羧酸循环和氧化磷酸化,经过这条通路彻底氧化生成二氧化碳和水,释放能量用以ATP的合成。乙酰辅酶A是合成脂肪酸、酮体等能源物质的前体物质,也是合成胆固醇及其衍生物等生理活性物质的前体物质。用于乳品肉碱的检测普誉公司为您提供各种规格乙酰辅酶A 上海普誉科贸有限公司为您提供 左旋肉碱测定用,期待为您!

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法,是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷,且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。 左旋肉碱测定用,就选上海普誉科贸有限公司,用户的信赖之选,欢迎您的来电哦!浙江普誉公司左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A三锂盐

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2500835,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)5,5′-Dithiobis(2-nitrobenzoicacid)69-78-399%5g/25g

250022N-2-羟乙基哌嗪-N-2-乙烷磺酸HEPES7365-45-9>99.0%25G/100g

280033乙酰辅酶AAcetylCoenzymeA(Acetyl-CoA)Tri-Li20mg,50mg200mg

Formula:C23H35N7O17P3SLi3Molecularweight:acetyl-CoA:Mr=809.6,acetyl-CoA-Li3:Mr=827.4QualityPurity:85%acetyl-CoA(enzymaticandabsorbance),2%Li

230057乙酰肉碱转移酶5mg/1mlSpecificactivity:approx.80U/mgat25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5 辽宁普誉公司左旋肉碱测定用试剂HEPES

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