上海肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂HEPES

时间:2023年07月08日 来源:

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法,是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷,且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。 左旋肉碱测定用,就选上海普誉科贸有限公司,让您满意,欢迎新老客户来电!上海肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂HEPES

CarnitineAcetyltransferasefrompigeonbreastmuscleProductDescriptionAcetyl-CoA:carnitineO-acetyltransferaseEC2.3.1.7Specificactivity:approx.80U/mgat25°CwithCoAandacetyl-D,L-carnitineasthesubstratesContentsSuspensionin2.9Mammoniumsulfatesolution,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pHapproximay7.5QualityContaminants:<0.01%acetyl-CoA-deacylase上海普誉科贸有限公司

介绍:酶活定义:在pH8.0,温度为25°C的条件下,一单位酶每分钟可将1.0μmole的乙酰-L-左旋肉碱和辅酶A转化为L-左旋肉碱和乙酰辅酶A。来源:鸽子胸肌储存条件:2-8℃ 实验室用左旋肉碱测定用试剂左旋肉碱测定用,就选上海普誉科贸有限公司。

乙酰辅酶A的提取1、细菌或培养细胞:先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照细菌或细胞数量(104个):试剂一体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一),超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率20%或200W,超声3s,间隔10s,重复30次);8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。2、组织:按照组织质量(g):试剂一体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL试剂一),进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min,取上清,置冰上待测。测定步骤1、分光光度计预热30min,用蒸馏水于340nm处调零。2、取920μL工作液和100μL样本至1mL石英比色皿,混匀,立即记录340nm处20s的吸光值A1和80s时的吸光值A2,计算ΔA=A2-A1

乙酰肉碱转移酶(硫酸铵悬浮液)英文名:CarnitineAcetyltransferaseCAS号:9029-90-7MDL:MFCD00130725介绍:来源于鸽子胸肌,缓冲体系为:2.9M硫酸铵溶液,50mMK-phosphate,1mMEDTA,pH大约为7.5。酶活浓度为≥70units/mgprotein,即总蛋白量1mg中乙酰肉碱转移酶的酶活至少为70units。(酶活定义:Oneunitwillconvert1.0μmoleofacetyl-L-carnitineandCoAtoL-carnitineandacetyl-CoAperminatpH8.0at25℃)用途:适用于《GB29989-2013婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》储存条件:2-8℃左旋肉碱测定用,就选上海普誉科贸有限公司,欢迎新老客户来电!

GB29989


乙酰肉碱转移酶(CAT)溶液:吸取100µL乙酰肉碱转移酶悬浮液,经1500r/min离心10min,弃去上层清液,沉淀用2mL水溶解。临用时配制。

标准品左旋肉碱标准品(C7H15NO3):纯度≥98%。

标准溶液配制

左旋肉碱标准储备液(80µg/mL):准确称取20mg(精确0.0001g)于102℃±2℃烘箱中烘2h的左旋肉碱,用水定容至250mL容量瓶中。此液置于4℃冰箱中可保存1个月。

左旋肉碱标准工作液:分别吸取左旋肉碱标准储备液0.5mL、1mL、2mL、3mL、5mL于25mL容量瓶中,用水定容至刻度,混匀。此溶液***于当天使用。

仪器和设备 分析天平:感量0.1mg。 pH计:精度0.01。 离心机:转速≥1500r/min。 恒温水浴锅:温度可控制在40℃±2℃。 分光光度计。 上海普誉科贸有限公司致力于提供 左旋肉碱测定用,有想法的可以来电咨询!维生素BT测定用左旋肉碱测定用试剂HEPES

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