浙江肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

乙酰辅酶A的提取1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL试剂一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。2、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。测定步骤1、分光光度计预热30min，用蒸馏水于340nm处调零。2、取920μL工作液和100μL样本至1mL石英比色皿，混匀，立即记录340nm处20s的吸光值A1和80s时的吸光值A2，计算ΔA=A2-A1上海普誉科贸有限公司是一家专业提供 左旋肉碱测定用的公司，价格实惠，欢迎您的来电！浙江肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

英文名称：AcetylcoenzymeAsodiumsalt；AcetylCoA其他名称：乙酰辅酶A三锂盐 级别：性状(以下信息*供参考)：白色粉末。溶于水。在pH值为3.5～5.0的溶液中，在100℃加热15min也不分解用途：本品*供科研，不得用于其它用途。(以下用途*供参考)用于检测CAT活性。辅酶A的乙酰化衍生物，可以认为是活化的乙酸，在许多代谢反应(如三羧酸循环、脂肪酸氧化等)中起关键性作用。它是脂质生物合成的关键前体物质，是所有脂肪酸的来源，正向调控**酸羧化酶。保存：2-8℃江西左旋肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，让您满意，期待您的光临！

采用分光光度法测定婴幼儿奶粉中左旋肉碱的含量.通过对婴幼儿奶粉中左旋肉碱的测定进行不确定度的评估,表达出了合成标准不确定度和扩展不确定度,为评价左旋肉碱测定结果的准确和可靠性提供技术依据.

依据CNAS-CL07:2011《测量不确定度的要求》,JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》和GB29989-2013《食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》,建立婴幼儿配方食品中左旋肉碱的测量不确定度的测量模型.根据模型分析并计算不确定度各个分量,结果的不确定度以及扩展不确定度.计算得到在婴幼儿奶粉中左旋肉碱含量为11.2mg/100g时,扩展不确定度为1.21mg/100g,包含因子k为2.

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

分析步骤5.1试样处理准确称取5g（精确0.0001g）混合均匀的试样于烧杯中，用30mL40℃温水溶解，转入100mL容量瓶中。加入10mL13%高氯酸溶液，混合均匀后静止20min。用蒸馏水定容至刻度，混匀，用定量滤纸过滤。取滤液20mL，用4mol/L氢氧化钾溶液调pH为12.5～13.0后，置于40˚C水浴60min。冷却后用13%高氯酸调pH为7.0～7.5。将样液转入50mL容量瓶中，用蒸馏水定容。混匀后置于4℃冰箱中过夜。将试样处理液从冰箱中取出放置至室温，取上清液用0.45µm滤膜过滤后备用。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，让您满意，欢迎您的来电哦！

GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

酶技术法酶技术法是目前测定左旋肉碱较为常用的方法,主要包括酶技术的分光光度法、放射酶法、自动分析仪法、荧光光度法、酶循环法等。1.1(1)酶显色法。酶显色法也被称为2-基甲酸(DTNB)法，是目前测定左旋肉碱较为常用的方法。该方法**开始是由Marquis和Fritz于1964年建立,检测了小鼠组织中的游离肉碱后经进一步完善成为现在的方法。该方法的机理为:左旋肉碱与乙酷辅酶A(乙酷COA)在乙肉碱转移酶(CAT)的催化下反应生成乙酷肉碱和游离辅酶A(COASH。COASH和2-硝基苯甲酸(DTNB)反应生成黄色物质其颜色深浅与COASH的含量成正比。因COASH与左旋肉碱是等摩尔反应关系,通过分光光度法测定COASH生成量即可间接测定左旋肉碱的含量。该方法操作经济、快捷，且该方法中催化全CAT酶对于左旋肉碱和乙酷辅酶A之间的反应具有专一性,从而可以排除右旋肉碱的干扰,故灵√下高检出限为0.6mg/100g重复性和回收率较收率在96.2%~104.7%之间口。而且与化学法(通过比色法测定肉碱和澳酚蓝反应生成的有色物质来测定肉碱)相比,此法不受样品中所含季胺类物质的影响。国家标准《GB29989婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定》中使用的便是此方法。 左旋肉碱测定用，就选上海普誉科贸有限公司，欢迎新老客户来电！陕西乳品用左旋肉碱测定用试剂乙酰辅酶A

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GB 29989 婴幼儿食品和乳品中左旋肉碱的测定

荧光光度法

MitsuoMaehara等14(1988)采用一种简单的荧光法对血清中游离肉碱进行测定,测定原理与分光光度法基本类似。肉碱与乙酷CoA在CAT的催化下反应生成乙酷肉碱和COASH，COASH与BIPM耦合生产强荧光物质COA-BIPM光强度与肉碱的含量成正比。通过测定荧光强度,可以得知血清中的肉碱含量。该方法的批内和批间变异系数(C分别为5.2%和2.6%,肉碱回收率在98%~113%之间与显色法的测定结果相比具有良好的相关性(相关系数r>0.90)。该方法灵敏度较高,比较低检测限为10pmol/L。KojiroMatsumoto等[15](1990)开发了光流动注射法对丙戊酸***的患者血清中的肉碱进行测定。该方法使用了肉碱脱氢酶(CDH)和硫辛酷胺脱氢酶(DS)两种固定化酶催化两步反应***是肉碱和氧化型辅酶I(NAD+)在CDH的催化下反应生成还原型辅酶I(NADH)第二步是NADH和刃天青(C12H7NO4)在DS的催化下反应生成物质试灵(C12H7NO3)试卤灵的荧光强度与肉碱的含量成正比。用该方法检测肉碱时,肉碱的标准曲线在0.1~1.0nmol范围内线性测的激发光波长和发光波长分别为560nm和580nm。 浙江肉碱测定用左旋肉碱测定用试剂乙酰肉碱转移酶

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