合肥鼠尾胶原产品介绍
以鼠尾胶原为支架的类似物的建立:探寻建立类似物的培养方法。方法:原代培养人皮肤成纤维细胞,制备鼠尾胶原,将鼠尾胶原溶液、浓缩培养基、NaOH溶液和以血清重悬的成纤维细胞溶液在适当的比例下混合后形成凝胶构建类似物。结果:形成的类似物中成纤维细胞生长状态良好,并且组织块具有一定弹性和抗拉伸能力。结论:①利用鼠尾胶原可以构建类似物,该模型是进行皮肤部位型培养和制作复合皮的关键与基础;②成纤维细胞胶原凝胶复合物有着良好的生物学特性,它是研究成纤维细胞与细胞外基质之间以及细胞之间相互作用的良好模型。手持尾巴,用止血钳夹住鼠尾的较高,折断尾骨后拉出尾腱。合肥鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M 的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。 4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。合肥鼠尾胶原产品介绍利用鼠尾胶原将小玻片固定于培养瓶内。
胶原的立体结构与一般的球状蛋白质完全不同,每一条亚基形成一股左手旋转的螺旋,其中每 3个氨基酸残基形成一圈螺旋。3 条左手螺旋再扭在一起形成一个右手大螺旋。这样的螺旋称为 3股螺旋。小的甘氨酸残基位于3股螺旋内部。3股螺旋式的棒状胶原分子的大小约是3000×15埃,这些棒状分子首尾相连,并侧向排列形成胶原微丝(其直径可从50埃至数千埃)。胶原分子在两端及沿轴向每隔 680埃的距离存在极性区,这些极性区能和重金属离子结合,使胶原纤维在电子显微镜下形成间距为680埃的明暗相间的特征性的横纹结构。
鼠尾胶原蛋白I型,用那一种胶原酶可以溶解:1.将胶原加入到0.1M 的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。5.从包被表面除去多余的液体。过夜干燥。如果胶原溶液不是无菌的,这时候可以在无菌细胞操作室中暴光在紫外线下过夜消毒。 在接种细胞前用无菌的水漂洗。涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便,成本低廉。
鼠尾胶原在心肌细胞氧化损伤中的保护作用:原蛋白具有抗氧化作用,但既往在实验室主要将鼠尾胶原用于促进细胞贴壁和支架构建,对于其抗氧化作用目前尚无相关研究。目的:探讨鼠尾胶原对过氧化氢导致离体心肌细胞氧化损伤的保护作用。方法:将原代培养的SD大鼠乳鼠心肌细胞随机接种到铺有鼠尾胶原的培养皿(实验组)和普通培养皿(对照组)中,并且均用0,10,100μmol/L H2O2诱导。24 h后,以电子显微镜观察各组乳鼠心肌细胞的形态,应用MTT比色法检测心肌细胞存活率,TUNEL法检测心肌细胞凋亡形态,流式细胞技术检测心肌细胞凋亡率,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶活力,硫代巴比妥比色法检测丙二醛水平,Western-Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达。使用溶解有一定比例胃蛋白酶的酸溶液对初步处理的鼠尾腱进行酶解。合肥鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原能促进毛细胞贴壁,涂布鼠尾胶原有利于膜片钳实验的长时程记录,并且制作简便。合肥鼠尾胶原产品介绍
鼠尾胶原,是一种天然培养基,它具有促进体外培养细胞(特别是上皮细胞)贴壁的作用,同时也是一种天然的黏附剂,当我们需要在培养瓶或培养皿内放置小玻片,制备细胞爬片时,可在瓶底涂一层胶原,再放上小玻片,自然干燥后小玻片就固定于培养瓶之中。有点学术了,听不懂···贴壁,有什么意义?分散的单一细胞培养能够比较理想地反映细胞的具体生物特性。选择合适的培养基,可以解决培养中细胞脱落和细胞重聚的现象。鼠尾胶原,是一种细胞支持物,它是细胞外基质的主要成份,可直接或间接参与细胞的附着。鼠尾I型胶原蛋白系采用方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。合肥鼠尾胶原产品介绍
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