福建如何使用糖原染色试剂盒

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。如用无水酒精作糖原的固定剂，有它的弊病。福建如何使用糖原染色试剂盒

染色的原理和临床意义：在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色，常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS－D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理，同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间，较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞，因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒－单核细胞白血病该染色法在急性粒－单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞，甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应，因此酯酶双染色反应在急性粒－单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。福建如何使用糖原染色试剂盒切取的材料应小而薄，便于固定液迅速渗入内部。

糖原染色：方法固定液Carnoy固定液：纯酒精60ml冰醋酸10ml氯仿30ml,也可以选用75%酒精配制1)过碘酸酒清夜配法:过碘酸(HIO.2HO)0.4g95%酒精35mlM/5醋酸钠(2.72g+蒸馏水100ml)5ml蒸馏水10ml保存于冰箱内,用棕色瓶,可用两周.2)Schiff氏液:0.5克碱性品红加入100毫升蒸馏水中,时时摇动三角瓶5分钟,使之充分溶解.冷却至50℃后过滤加入10毫升1N盐酸.冷却至25℃,加入0.5-1克偏重硫酸钠,在室温中至少静置24小时,然后密封冰箱保存.3)Schiff氏酒**配置Schiff氏液11.5ml1NHCI0.5ml纯酒精23ml4)亚硫酸水1%偏重亚硫酸蒸馏水180ml的树胶溶解~

糖原染色试剂盒。含乙二醇基的多糖经过碘酸氧化，产生醛基，与雪夫（Schiff）试剂中无色品红结合，形成紫红色沉淀物定位于含糖原的胞浆中。该反应称为碘酸-雪夫（PAS）反应。（1）雪夫液配制：碱性品红1g溶于200ml沸水中，冷却60℃时过滤，加1mmol/L盐酸20ml，再冷却至25℃左右，加偏重亚硫酸钠（Na2S2O5）2g，混合后放棕色瓶中，置暗处24h，无色即可放冰箱中保存，呈微红色，则加活性炭1～2g，吸附过滤使成无色液体，放冰箱中保存。若溶液变红，即不能再用。（2）10g/L过碘酸水溶液：过碘酸（HIO4·2H2O）1g,加蒸馏水至10ml。溶解后盖紧放冰箱备用，一般可用3个月，变黄则失效。切取材料时刀要锐利，避免因挤压细胞使其受到损伤。

糖原及粘液染色法注意事项：1、糖原的固定要及时，而且标本要新鲜。2、如用无水酒精作糖原的固定剂，有它的弊病，因无水酒精渗透较慢，而且容易产生极化，（极化是糖原颗粒趋向于细胞的一端）。故用Gendre氏固定液效果较佳，其配法如下：苦味酸饱和于95%酒精85ml40%甲醛10ml冰醋酸5ml3、各种试剂必须化学纯，亚硫酸钠须有浓厚气味，器皿必须洁净而干燥，染色缸亦是。4、如果Schiff氏试剂，在经过活性碳吸附漂白后不显无色，首先应考虑试剂中的偏重亚硫酸钠是否失效。如果偏重亚硫酸钠气味不浓，使用时可考虑适当的增加用量。其次考虑碱性品红本身，常常虽属同一生产厂家，但不同批号，其效果就可能不同，应特别引起注意~操作简单方便，1h内即可完成反应。江苏品质好的糖原染色试剂盒报价

一般厚度不超过3mm，大小不超过5×5m㎡。福建如何使用糖原染色试剂盒

糖原染色用于鉴别淋巴系统细胞增生的性质鉴别红细胞系统增生的性质[英文缩写]PAS[参考值]正常人淋巴细胞PAS反应积分正常人幼红细胞PAS反应积分[临床意义]恶性淋巴瘤、急慢性淋巴细胞白血病时PAS积分升高巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再障贫血时幼红细胞PAS反应多为阴性红血病、红白血病、骨髓增生异常综合征时幼红细胞PAS反应积分可40甚至高达100--200以上用于不典型巨核细胞与李-斯细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性后者为阴性或弱阳性；用于高雪细胞和尼曼一匹克细胞的鉴别前者PAS反应为强阳性而后者反应为阴性或弱性福建如何使用糖原染色试剂盒

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