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鼠尾胶原醋酸溶解:1.将鼠尾胶原加入到0.1M的醋酸中,制备成浓度为0.1%的溶液。在室温中搅拌1-3小时直到完全溶解。2.建议将溶液转移到拧口的玻璃瓶中,并小心的在瓶底铺上一层氯仿。氯仿的量约为胶原溶液的10%。不要晃动或搅拌。在2-8度中放置过夜。在无菌条件下转移上层的胶原溶液。我们不建议用过滤的方法无菌化。已经发现该方法会导致丢失蛋白。3.稀释一定数量的胶原溶液。4.按照6-10ug/cm2的浓度包被培养瓶。在室温或37度结合数小时或者2-8度过夜。在操作过程中要尽量保持低温。保存条件4℃保存,切勿冻存,有效期一年。唐山正规鼠尾胶原直销价
胶原蛋白的提取方法:酸法提取:酸法提取主要采用低离子浓度酸性条件浸渍处理原料,从而破坏分子间的盐键和希夫碱,而引起纤维膨胀、溶解。作为溶剂使用的酸,主要有盐酸或亚硫酸、磷酸、硫酸、醋酸、柠檬酸和甲酸等。酸法是提取胶原蛋白比较常用和有效的方法,用酸法提取的胶原较大程度地保持了其三股螺旋结构。此法处理快速,所得产品的分子量是连续的,适用于医用生物材料及原料的制备,但产品得率低,设备腐蚀严重,污染重。赵苍碧等[2]采用0.3%的醋酸溶液在4℃下从牛腱中提取胶原蛋白,得到高纯度的胶原蛋白溶液。上海正规鼠尾胶原销售厂家鼠尾胶原醋酸溶解:不建议用过滤的方法无菌化。
鼠尾胶原简介:鼠尾I型胶原蛋白(Collagenfromrattail,TypeI)系采用Birkedal-Hansen方法在无菌下制备,纯度达到95%以上,可溶于0.006mol/L乙酸。本品可用于细胞培养皿的包被,特别适合普通细胞培养器皿不易贴壁细胞的培养;也可用于制备三维胶原凝胶,使细胞在模拟的三维环境中生长。质量标准:1、SDS-PAGE分析纯度大于95%。2、无菌检验结果为阴性。3、本品2μg/cm2包被细胞培养皿后培养PC-12细胞,贴壁及生长正常。4、本品浓度1mg/mL,pH7.0时形成具有一定强度的三维胶原凝胶,NIH-3T3细胞在三维凝胶内生长正常、PC-12细胞在三维凝胶表面生长正常。
服用胶原蛋白的注意事项:1、大分子胶原蛋白进入人体后需要降解为小分子肽、氨基酸才能被人体吸收,真正有效吸收的成分并不多。2、这些食物多半脂肪含量较高,不适合经常食用。高热量、高脂肪,尤其是油炸食物都容易产生自由基,加速老化。如果能少吃这一类食物,就等于减少了身体被自由基伤害的机会及皮肤出现黑斑、皱纹等的风险。3、孕妇是不能服用胶原蛋白产品,因胶原蛋白是19种氨基酸组成的,其中有几种是不能被胎儿吸收的,容易引起第二特征过早的发育和成熟,不利于出生后的婴儿成长和发育。利用鼠尾Ⅰ型胶原构建与人类自体骨组织化学成分和分子结构相近的仿生骨材料。
要准备的器具:组织剪2把,有齿镊1把,无齿镊1把,200ml烧杯1个,培养皿1个,带盖广口瓶1个,离心管、小瓶数个,滴管若干。以上物品须经严格高压消毒灭菌。需配制的液体0.1%醋酸溶液。经44.48N10min高压蒸汽灭菌(或是过滤除菌)后备用。此外还有用消毒双蒸水配制75%酒精溶液。取大鼠尾巴,洗净,置75%酒精浸泡消毒后,手持尾巴,用止血钳夹住尾巴较高,折断尾骨后拉出尾腱,将尾腱剪碎后置消毒的三角烧瓶中,称尾腱的重量,按每克尾腱50ml的比例加入0.1%醋酸溶液,摇晃,使尾腱分散于醋酸溶液中,4℃放置48小时,离心。吸取其上清,分装至小瓶,4℃保存。上述制备过程均在无菌条件下完成。鼠尾胶原,是一种细胞支持物,它是细胞外基质的主要成份。太原正规鼠尾胶原推荐厂家
注意事项:在室温下pH 中性时可迅速成胶,在操作过程中要 尽量保持低温。唐山正规鼠尾胶原直销价
鼠尾胶原的生物矿化和TEM观察:果冻样Ⅰ型胶原蛋白胶体初始浸泡在矿化液中时呈微白色;矿化2d后,胶体的颜色逐渐加深至乳白色;矿化6d后,随着羟基磷灰石晶体矿化长入胶原纤维内部,胶体颜色加深至纯白色,并在胶体表面沉积了一层薄薄的羟基磷灰石钙晶体,予镊子夹起,其表层羟基磷灰石钙晶体破碎散落。TEM表征显示:矿化2d后,Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔周期性条纹结构逐渐模糊,羟基磷灰石钙前体渗入胶原纤维内部,胶原纤维部分矿化,沿着胶原纤维生长,忖度变深;矿化6d后,Ⅰ型胶原纤维的明暗相隔D-Band结构完全消失,胶原纤维内部可以看到黑色羟基磷灰石晶体,嵌入胶原纤维纵向生长。当鼠尾Ⅰ型胶原纤维完全矿化时,由于整条胶原纤维都被羟基磷灰石钙晶体占据,胶原纤维呈现黑色,选区衍射斑图符合羟基磷灰石表征。唐山正规鼠尾胶原直销价
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