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染色的原理和临床意义:在同一张涂片上进行两种酯酶染色的方法称为酯酶双染色。多数采用一种特异性酯酶加一种非特异性酯酶染色,常用的有α-醋酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色、α-丁酸萘酚酯酶与氯乙酸AS-D萘酚酯酶双染色等。反应的原理基本上同各自的染色原理,同一张涂片上的细胞要分别在两种不同的基质液中作用一定时间,较后复染、显微镜观察。酯酶双染色可同时观察两种不同的白血病细胞,因此在鉴别白血病类型方面明显优于单项染色。急性粒-单核细胞白血病该染色法在急性粒-单核细胞白血病的同一张涂片上可分别出现α-NBE染色和NAS-DCE染色阳性反应的细胞,甚至少数病例在单个细胞内同时出现以上两种酯酶染色的双重阳性反应,因此酯酶双染色反应在急性粒-单核细胞白血病的诊断上具有独特价值。组织石蜡切片的染色检测。山东品质好的糖原染色试剂盒量大从优
特殊染色方法选择应遵循:染色结果对比鲜明、结果易保存、阳性突出的染色方法;突出的阳性结果在于所选择方法表达的色调及如何进行背景的复染。结果能够长时间保存、不褪色对于后续的调阅、科研、论文均较为有利。如显示淀粉样物质,甲基紫染色法虽然流程较为简单,但结果不易保存,阳性对比度相对不突出;刚果红染色法阳性结果明显,长时间保存不褪色,流程简便,更是实用的方法。如显示弹性纤维,地衣红染色染液虽配制较方便,但结果对比度相对欠佳,与其他几个染色法相比,多不选择使用。品牌糖原染色试剂盒进货价无水酒精渗透较慢,而且容易产生极化。
糖原D-PAS染色液注意事项:1、切片脱蜡应尽量干冷,否则影响染色效果。需使用一张阳性对照片验证酶的活性。2、过碘酸氧化时间不宜过久,氧化时温度以18~22℃较佳。3、试剂(A)、试剂(B)、试剂(C)、应置于4℃密闭保存,使用时避免接触过多的阳光和空气,使用前较好提前取出恢复到在室温后,避光暗处使用。4、酸性乙醇分化液应经常更换新液,其分化时间应该依据切片厚薄、组织的类别和酸性乙醇分化液的新旧而定,另外分化后自来水冲洗时间应该足够。5、在过碘酸溶液和SchiffReagent中作用时间非常重要,该依据切片厚薄、组织类别等决定。6、况冶切片染色时间尽量要短。
医院检验中心糖原染色操作规程:1.雪夫氏试剂:400m1蒸馏水煮沸除去C02,逐渐加碱性品红2.08溶解后,待冷却至60℃,加1mm01儿HCl40ml,再加偏重亚硫酸钠(NaHSO:)4g,次日加活性碳1.5g,放置半天后过滤。配好后液体为无色透明,保存于4℃冰箱中。2.过碘酸作用液:过碘酸1g溶于蒸馏水100ml中,或取过碘酸钾(1tI04)0。698加蒸馏水100ml,微加热使溶解,再加浓硝酸0.3m1,置冰箱中保存。3.固定液:95%乙醇90ml与甲醛10m1混匀。4.20g/l甲基绿:甲基绿2g溶于100m1蒸馏水。[操作]_x005f_x000c_(1)新鲜或陈旧血片、骨髓片于固定液内10分钟。(2)水洗数次后,对照片先用唾液消化30分钟,也可在同一片,在其中间用蜡笔划界,一半做对照,另一半做测定。(3)水洗后,滴加过碘酸数滴于涂片上,作用10分钟后,再水洗数次。待冷却至50℃过滤,加入当量盐酸至25℃时加入偏重亚硫酸钠。
糖原染色正常值:正常情况下,红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴细胞为阴性反应。自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。糖原染色临床意义:(1)急性淋巴细胞白血病、淋巴组织恶性增生性疾病、红白血病、戈谢病的原始细胞呈强阳性反应或阳性反应;缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍、骨髓增生异常综合征亦可呈阳性反应;急性粒细胞白血病、急性单核细胞白血病、良性淋巴细胞增多症、尼曼-皮克细胞呈阴性反应或弱阳性反应。巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血等,幼红细胞为阴性反应。偶有个别幼红细胞呈阳性反应。(2)帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞,巨核细胞呈强阳性反应;霍奇金细胞呈弱阳性或阴性反应。(3)帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞,腺细胞呈阳性反应。常需要分别选用相应的显示这些成分的染色方法进行特殊染色。品牌糖原染色试剂盒进货价
自早幼粒阶段以后的粒细胞和幼单核细胞可呈弱阳性反应。山东品质好的糖原染色试剂盒量大从优
糖元染色试剂盒细胞生物学研究有以下几个方面。细胞生物学的研究内容十分普遍,主要包括。①细胞核、染色体以及基因表达的研究。②生物膜与细胞器的研究。③细胞骨架体系的研究。④细胞增殖及其调控。⑤细胞分化及其调控。⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡)⑦细胞的起源与进化。⑧细胞工程。PAS染色,全称过碘酸雪夫染色(PeriodicAcid-SchiffStain),主要用来显示糖原和其他多糖物质,因此也称作糖原染色。另外,此染色方法还可以显示中性黏液性物质和某些酸性物质,以及软骨、垂体、色素、淀粉样物质、基底膜、霉菌等。PAS法的检测原理在于:过碘酸(也成为高碘酸)是一种强氧化剂。山东品质好的糖原染色试剂盒量大从优
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