如何使用糖原染色试剂盒厂家供应

GUS染色步骤：1.将准备好的材料浸泡在GUS染色液中，于25-37℃保温1小时至过夜。2.叶片等绿色材料转入70%乙醇中脱色2-3次，至阴性对照材料呈白色。3.肉眼或显微镜下观察，白色背景上的蓝色小点即为GUS表达位点。注：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和部位的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。在肝糖原染色中用10%甲醛液固定肝组织。如何使用糖原染色试剂盒厂家供应

糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，McManus在1946年较先使用高碘酸-雪夫技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色试剂盒不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质以及软骨、垂体、霉菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。过碘酸(又称高碘酸)是一种强氧化剂，它能氧化糖类及有关物质中的1，2-乙二醇基，使之变为二醛，醛不Schiff试剂能结合成一种品红化合物，产生紫红色。由于高碘酸还可氧化细胞内其他物质，使用时应注意选择好高碘酸浓度和氧化时间，使氧化控制在既能把乙二醇基氧化成醛基又不至于过氧化，这是很关键的步骤。PAS技术是很少可检测不同种类的黏液物质(如糖原、黏蛋白和糖蛋白)的方法，但PAS技术却不能区别黏蛋白和糖原。若要冸确鉴别黏液物质(如黏蛋白或糖原)，需加入糖原消化步骤。大多数情冴下可用α–淀粉酶或麦芽淀粉酶来催化糖原的糖苷键水解，形成水溶性的双糖-麦芽糖，在应用PAS技术之前将糖原从组织切片上除去。人类的唾液被认为是消化糖原的一种有效手段，但是出于安全以及缺乏标冸唾液的考虑，不主张应用唾液。北京哪家生产糖原染色试剂盒推荐厂家细胞核、染色体以及基因表达的研究。

PAS染色的临床意义①帮助鉴别不典型巨核细胞和霍奇金细胞或Reed-Sternberg细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性或阴性反应。②帮助鉴别戈谢细胞和尼曼-匹克细胞，前者呈强阳性反应，后者呈弱阳性反应，且空泡中心为阴性反应。③帮助鉴别白血病细胞和腺骨髓转移的腺细胞，后者呈强阳性反应，阳性反应物质为红色细颗粒状或粗颗粒状，有时呈红色块状。白细胞系统：急性淋巴细胞白血病时白血病性原始淋巴细胞的阳性反应物质为红色粗颗粒状或红色块状，底色不红；急性粒细胞白血病时，白血病性原始粒细胞的阳性反应物质呈均匀分布的红色细颗粒状或呈均匀红色；急性单核细胞白血病时，白血病性原始单核细胞的阳性反应物质呈红色细颗粒状，弥散分布，有时在胞浆的边缘处颗粒较粗大。

PAS染色的临床意义：1.红细胞系统：①红血病或红白血病时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比增高，阳性反应的程度也很强。有时红细胞也呈阳性反应。②缺铁性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血（又称地中海贫血）以及骨髓增生异常综合征时幼红细胞可呈阳性反应，有时阳性反应幼红细胞的百分比也较高。有时红细胞也可呈阳性反应。③巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、再生障碍性贫血和白血病等疾病时，幼红细胞为阴性反应，有时个别幼红细胞呈阳性反应主要用来显示糖原和其他多糖物质，因此也称作糖原染色。

糖原D-PAS染色液：使用方法：1、两张相同切片，二甲苯脱蜡，梯度乙醇入水。2、一张切片入37℃淀粉酶溶液处理1h。另一张不用淀粉酶溶液处理，入水中1h作为对照。3、流水冲洗两张切片各5～10min。4、入过碘酸溶液，室温放置5～8min，一般不宜超过10min。5、自来水冲洗1次，再用蒸馏水浸洗2次。6、入SchiffReagent，置于室温阴暗处浸染10～20min。7、自来水冲洗10min。8、入Mayer苏木素染色液，染细胞核1～2min。9、(可选)酸性乙醇分化液分化2～5s。10、自来水冲洗10～15min，更换蒸馏水清洗使其返蓝。11、二甲苯透明，中性树胶封固。植物材料在选择时须尽可能不损伤植物体或所需要的部分。福建口碑好的糖原染色试剂盒平均价格

操作简单方便，1h内即可完成反应。如何使用糖原染色试剂盒厂家供应

糖原染色在使用过程中需要注意以下几个方面：PAS染色时需于暗处加盖反应，染色时间10～20min（染色时间长短取决于试剂的质量和环境温度，SO浓度高，染色时间适当缩短；环境温度高，染色时间也应适当缩短，反之则需适当延长反应时间）。染色过程中不能接触伊红，以免造成颜色误差[4]。作糖原染色时，较好作消化对照，即取两张连续切片，其中一张脱蜡至水后，用1％淀粉酶于37℃消化30min，水洗后与不经消化处理的切片一起置0.5％高碘酸液氧化，如经消化处理的切片染色阴性，不经消化处理的切片染色阳性，即肯定为糖原[6]。偏重亚硫酸钠（钾）溶液配置后，不能保存，因此，必须现配现用，用过一次即应废弃。各种试剂必须是化学纯或者分析纯。器皿、染色缸必须洁净而干燥。如何使用糖原染色试剂盒厂家供应