南昌正规外泌体提取试剂直销厂家
近年来,随着外泌体研究的不断深入,它的应用已经涉及一些病症治病领域、医学基础和免疫领域、寄生虫领域;临床研究上已涉及心血管系统、内分泌代谢系统等。外泌体来源及内含物。几乎所有类型的细胞都可以分泌外泌体,同时外泌体也普遍存在于体液中,包括血液、眼泪、尿液、唾液、乳汁、腹水等。目前研究发现外泌体中富含核酸(microRNA、lncRNA、circRNA、mRNA、tRNA等)、蛋白、胆固醇等。外泌体的表面marker主要有CD63、CD81、CD9、TSG101、HSP27等。外泌体鉴定。目前对于外泌体的鉴定主要有四种方法:透射电子显微镜(TEM)、Nanosight、WesternBlot、流式细胞术。超离法是常用的外泌体纯化手段,采用低速离心、高速离心交替进行,可分离到大小相近的囊泡颗粒。南昌正规外泌体提取试剂直销厂家
1983年,外泌体初次于绵羊网织红细胞中被发现,1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。所有培养的细胞类型均可分泌外泌体,且外泌体天然存在于体液中,包括血液、唾液、尿液、脑脊液和乳汁中。有关他们分泌和摄取及其组成、“运载物”和相应功能的精确分子机制刚刚开始研究。外泌体目前被视为特异性分泌的膜泡,参与细胞间通讯,对外泌体的研究兴趣日益增长,无论是研究其功能还是了解如何将其用于微创诊断的开发。如何高效地提取外泌体是实现这项新兴液体活检技术临床常规化应用的关键。武汉外泌体提取试剂厂家直销外泌体的特殊结构和功能,使得它具有潜在的应用价值,可以作为诊断多种疾病的生物指标。
2018版《指导要求》说明外泌体没有限定单一的分离手段,多种手段都可以进行细胞外囊泡的富集。《指导要求》编写者们认为“高回收率,低特异性”的富集手段是指那些富集囊泡的同时会有大量的非囊泡组分被富集,甚至细胞的整个分泌组都会被掺入其中,归入这一类的分离手段主要包括通过改变电荷或通过高聚物作用的沉淀试剂盒、低分子量截流的超滤分离、超长时间和超高离心力的超速离心等。Wako的MagCapture™ExosomeIsolationKitPS(产品编号299-77603(2tests),293-77601(10tests)),使用PS亲和法对外泌体进行提取,损失小且能获得高纯度的外泌体。
外泌体在肺病治病中的作用:有研究发现,使用外泌体运载紫杉醇(PTX)可显着提高病细胞对PTX的吸收,将PTX加载至外泌体中显着增加了药物细胞毒性,Exo-PTX能显着压制肺病的发展。Aqil等在进行裸鼠实验时发现,加载至外泌体中的雷公藤红素(Exo-CEL)比普通的CEL有更强的抗一些病症功效,且在小鼠中未发现明显全身性或系统性毒性,由此可以证明,外泌体制剂可以有效增强CEL功效并降低与剂量有关的毒性。到目前为止,外泌体在肺病治病方面的研究主要集中于免疫压制,有效的外泌体药物递送平台的搭建以及外泌体相关的潜在治病靶点的探索。已有的研究表明外泌体在肺病治病领域有着广阔的前景,期待外泌体在肺病治病领域早日得到突破,造福更多的患者。外泌体:形成了一种全新的细胞间信息传递系统,影响细胞的生理状态并与多种疾病的发生与进程密切相关。
外泌体的提取分离:1、超速离心法(差速离心)。超离法是常用的外泌体纯化手段,采用低速离心、高速离心交替进行(如图所示),可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单,获得的囊泡数量较多而广受欢迎,但过程比较费时,且回收率不稳定(可能与转子类型有关),纯度也受到质疑;此外,重复离心操作还有可能对囊泡造成损害,从而降低其质量。2、密度梯度离心。在超速离心力作用下,使蔗糖溶液形成从低到高连续分布的密度阶层,是一种区带分离法。通过密度梯度离心,样品中的外泌体将在1.13-1.19g/ml的密度范围富集。此法获得的外泌体纯度较高,但步骤繁琐,耗时。使用PBS对膜进行洗脱即得到外泌体浓缩液。南昌正规外泌体提取试剂厂家供应
这些试剂盒不需要特殊设备,随着产品不断更新换代,提取效率和纯化效果逐渐提高。南昌正规外泌体提取试剂直销厂家
外泌体的提取、分离方法:聚合物沉淀法。聚合物沉淀法用于分离病毒和其他的生物大分子已有50多年历史,近几年,将其作为一种新的方法来分离外泌体。目前,市场已经有应用聚乙二醇(polyethyleneglycol,PEG)溶液提取外泌体的试剂盒,较常见的是SystemBiosciences公司的ExoQuick®和ExoQuick-TC®kits,该试剂盒操作简单不需要特殊的仪器,但是价格昂贵。提取外泌体的试剂盒主要成分是PEG8000(30%~50%),将试剂盒与体液或细胞培养液4℃孵育过夜,之后再低速离心。南昌正规外泌体提取试剂直销厂家
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