合肥北京RNA提取试剂

如果把一个细胞比作一个城市，那么DNA就像是一个管理人员，它坐在细胞核内，监视着“细胞城”的一举一动，像哪里细胞膜破了需要修补，什么时候需要合成蛋白质，显而易见，光靠我们DNA管理人员一个人自然忙不过来啦，于是我们的DNA管理人员决定给自己找一些“打工仔”，它们就是RNA，但是近年来越来越多的研究发现，这些RNA似乎远远不止一个普通默默无闻的“公务员”那样简单，它们在基因表达中发挥着不亚于DNA的巨大的作用，如2006年诺贝尔奖生理/医学奖就颁发给了RNA干扰的两位发现者。RNA干扰现象的发现为遗传研究提供了一种强大的研究手段，这也说明这些对RNA的研究有着巨大的前景.而作为南大较好科研接班人的我们自然也不能甘于人后，于是我们决定从酵母RNA的提取开始做起。总RNA提取试剂：自备新开封或专门氯仿，异丙醇，75%乙醇，DEPC处理水。合肥北京RNA提取试剂

总RNA提取试剂是广谱型总RNA提取试剂。实验操作快速方便，颜色鲜明，便于分层。本试剂适用范围普遍，可以从动物组织、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。该方法对少量的组织(50-100mg)和细胞(5×106)以及大量的组织(≥1g)和细胞(>107)均有较好的分离效果。样品在总RNA提取试剂中被充分裂解的同时能够较大限度地保证RNA的完整性。在加入氯仿离心后，溶液会分成三层：上层无色水相、中间层和下层红色有机相，RNA分布在上清层中。收集上清层后，经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。提取的总RNA完整性好，无蛋白和DNA污染，可用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Real-timeRT-PCR、Northernblot、DotBlot、体外翻译等。无锡正规RNA提取试剂单价试剂盒中的吸附柱采用特殊的硅基质膜材料。

RNA提取：主要试剂Trizol是一种新型总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速破碎细胞，压制细胞释放出的核酸酶。1.Trizol试剂含有苯酚，具有毒性和刺激性，注重操作。2.RNase污染的主要来源是操作过程中手和空气中的浮沉，注重配带手套，样品尽可能盖严。3.细胞裂解必需充分且操作迅速。裂解不完全会降低较后得率，因为一部分RNA会残留在未裂解的细胞中。细胞裂解之后要看不见颗粒状物质（结缔组织和骨除外）。在清洗和裂解细胞时较好在低温下操作，防止在操作过程中释放的内源RNase降解了RNA。4.酵母和一些细菌由于细胞壁的特别结构，可以加入Trizol试剂同时加入无RNase的玻璃珠并剧烈振荡，使细胞裂解充分。2-8℃避光保存一年。

rRNA是细胞内的一种基本RNA，与r蛋白一起构成蛋白质合成的场所—核糖体。随着rRNA基因序列越来越了解，其在生物研究中也的得到了更普遍的应用，主要表现在生物进化研究和分子流行病研究。（1）rRNA在生物进化上的研究。rRNA具有高度保守性，且普遍存在于各种生物中，rRNA提供了足够的序列信息。现在还可用于在细菌分类、细菌鉴定等方面。（2）rRNA在分子流行病上的研究。目前，人们已经把rRNA在进化上的普遍差异应用到了流行病学研究方面，通过对不同细菌进行鉴定分类，从而明确病因，追踪传染源，进一步控制及预防疾病。RNA提取试剂注意事项：有机相用异丙醇沉淀可回收蛋白。

RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提试剂，内含异硫氰酸胍等物质，能迅速裂解细胞，压制细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取组织或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中，Trizol试剂可保持RNA的完整性，同时能破坏细胞及溶解细胞成分。加入氯仿离心后，裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后，RNA通过异丙醇沉淀回收。移去水相后，用乙醇可从中间相沉淀得到DNA，加入异丙醇沉淀可从有机相得到蛋白质。RNA提取试剂：能够作RNA印迹分析、斑点杂交、poly(A)+选择。金华RNA提取试剂直销价

植物RNA提取试剂产品特点：针对植物材料独特配置，操作更简单、流程更优化。合肥北京RNA提取试剂

细胞RNA提取的方法：异丙醇主要用于沉淀RNA。取出EP管后可以见到侧壁沉淀，轻轻吸弃上清。向EP管中加入75%酒精洗涤沉淀，帮助分离剩余的有机试剂（剩余有机试剂过多会影响OD值和PCR反应），轻弹沉淀，使其浮在酒精，静置1-2min，让酒精充分接触沉淀，充分溶解有机试剂，然后4度离心5min。轻轻吸弃上清。将EP管再次放于离心机中瞬时离心，弃掉管壁残余液体。然后将EP管置于超净台中干燥5-10min.。注意RNA样品不要过于干燥，否则很难溶解。加入50ulDEPC处理水，震荡充分溶解沉淀。测量RNA浓度。将RNA保存于-80度。合肥北京RNA提取试剂