无锡提供疾病动物模型建模
l型棒10的第二端12露在椎间孔外,有利于调整插入位置。***端11的长度大于等于第二端12的长度。在本实施例中l型棒的材料选择的是h62黄铜。在另外的实施例中其材料可以是聚乳酸等其他材料,甚至可以用1个u型棒来代替2根l型棒插入腰4椎间孔和腰5椎间孔。u型棒的两臂均为4mm长。手术成功标志为:当l型棒或u型棒正确插入,压迫到背根神经节时,手术侧的后肢肌肉呈现轻微的暂时性抽搐,且不引起鼠尾摆动。需要根据大鼠体重选择l型棒或u型棒的直径大小:当大鼠体重在200g到不足220g范围时,采用直径为;当大鼠体重在220g到不足250g范围时,采用直径为;当大鼠体重在250g到不足300g范围时,采用直径为;当大鼠体重在300g到350g范围时,采用直径为。实施例2、模型的效果检测本发明已通过实验验证了该模型的效果。通过28天的观察,确定了实施例1获得的模型稳定且准确的模拟了腰椎间盘突出压迫神经根后的跛行以及疼痛症状。图3显示了术后大鼠出现手术侧(左侧)后爪(见a部所示)没有同其他三只爪一起抓握网架,而是蜷缩着,呈现不敢承重的表现。表1大鼠术后不同天数缩足阈值(单位:g)表1显示了术后28天内11只大鼠双下肢缩足阈值的具体的均值和标准误。上海东寰提供动物模型构建过程中的原始实验记录及数据图片。无锡提供疾病动物模型建模
1、动物模型名称:角膜环钻致角膜损伤兔模型2、实验动物种属:新西兰兔3、实验动物性别:雌雄不限4、实验动物年龄:2~3月龄5、实验动物体重:1.8~2.5kg6、实验动物环境:SPF级。1、实验方法:角膜环钻致兔角膜机械性损伤。耳缘静脉注射戊巴比妥钠联合肌肉注射速眠新Ⅱ进行兔麻醉。环钻前先用2%硼酸溶液冲洗双眼,再滴0.25%氯霉素眼药水2滴消毒,以保持结膜清洁。开睑,滴2%利多卡因滴眼液2滴行角膜表面麻醉,用已灭菌的6mm角膜环钻分别在兔眼角膜上作环切,并滴入2滴氯霉素眼药水润洗,用显微眼镊、角膜上皮铲和精细眼剪小心去掉角膜损伤区域上皮,术毕,滴氯霉素眼药水2滴。2、检测标准:肉眼或裂隙灯下观察到角膜有损伤。面瘫疾病动物模型建模供应商利用动物疾病模型来研究人类疾病可以克服平时一些不易见到不便于在病人身上进行实验的人类疾病的研究。
pirb-cki)pirb基因敲入的小鼠,pirb基因敲入到特异性组织或细胞中。其中pirb-cwt小鼠表达cre,但不含有loxp-pirb等位基因,pirb-chetandpirb-cki小鼠表达cre并分别含有一个或者两个loxp-pirb等位基因。其中f3代杂交小鼠纯合子/杂合子鉴定所用的pcr引物如下:f3:5’-cacttgctctcccaaagtcgctc-3’r3:5’-atactccgaggcggatcacaa-3’f5:5’-gcatctgacttctggctaataaag-3’homozygotes:644bpheterozygotes:644bp/453bpwildtypeallele:453bp组织特异性的基因敲入也可以通过加入另一对引物,用pcr来验证:pcrforconstitutivekiallele:f6:5’-ggcaacgtgctggttattgtg-3’r6:5’-ggctgtactctgaggataggcttag-3’f7:5’-agatctgcaagctaattcctgc-3’withcki:1180bp/215bpconstitutivekiallele:303bp注意:如果dna的样本不够纯,或者pcr的延伸时间不够长,可能扩增不出来1180bp的产物。cre阳性pcr鉴定所需的引物如下:forward:5’-gaacgcactgatttcgacca-3’reverse:5’-gctaaccagcgttttcgttc-3’creamplicon:204bp。序列表西安医学院pirb基因敲入的小鼠动物模型及其构建方法(artificialsequence)1ggcaggcttaaaggctaacctgg23223dna人工序列。
1、动物模型名称:FSH联合HCG致超排怀孕小鼠模型2、实验动物种属:KM小鼠或NIH小鼠3、实验动物性别:雌性4、实验动物年龄:3~4周龄5、实验动物体重:16~18g6、实验动物环境:SPF级1、实验方法:注射用重组人促卵泡***(FSH)联合注射绒促性素(HCG)诱导。对雌鼠于按5IU/只腹腔注射50IU/mL的FSH溶液,注射46~48h后按5IU/只再腹腔注射50IU/mL的HCG溶液,并于注射HCG当天下午约16:00~17:00按雌雄鼠1:1合笼。次日早上检查雌鼠阴栓情况。2、检测标准:合笼后次日雌鼠检查出现阴栓,表明成功构建了超排怀孕小鼠模型。广泛应用于药效评价、转化医学等医学前沿领域。
r3):5’-atactccgaggcggatcacaa-3’步骤4、鉴定为pirb基因敲入的f0代雄性小鼠7周龄、雌性小鼠6周龄分别与野生型异性小鼠交配获得f1代杂合子小鼠,图2为本发明f1代杂合子小鼠pirb基因敲除小鼠的流程图,小鼠出生后20天进行pcr鉴定,若有阳性小鼠出生,则表示转基因已经整合到生殖细胞。(1)通过pcr方法对获得的f1代小鼠进行基因型的鉴定:(a)dna的提取:方法1:采用takaraminibestuniversalgenomicdnaextractionkit()来获得高纯度的基因组dna。步骤a.每只小鼠剪下一段尾巴(2~5mm),放入离心管中,加入180μlbuffergl,20μl蛋白激酶k和10μlrnasea。步骤b.将步骤a离心管内于56℃孵育过夜。步骤c.过夜后12000rpm离心2min去除杂质。步骤d.加入200μlbuffergb和200μl无水乙醇,充分混匀。步骤e.将吸附柱放在收集管上,将步骤d得到的样品加到吸附柱里,12000rpm离心2min,弃掉收集管中液体。步骤f.弃去液体后在吸附柱中加入500μlbufferwa,12000rpm离心1min,弃掉收集管中液体。步骤g.在收集管中加入700μlbufferwb,12000rpm离心1min。弃掉收集管中液体。注意:bufferwb需要与100%乙醇预混,沿管壁加入bufferwb冲走残余的盐。步骤h.重复步骤g一次。动物模型作为人类疾病的缩影。宿迁C57小鼠疾病动物模型建模
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得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,l型棒的直径为,***端长3-5mm,第二端长1-3mm。具体地,根据大鼠体重选择l型棒的直径大小:当大鼠体重在200g到不足220g范围时,采用直径为;当大鼠体重在220g到不足250g范围时,采用直径为;当大鼠体重在250g到不足300g范围时,采用直径为;当大鼠体重在300g到350g范围时,采用直径为。在另一个具体实施方式中,压迫元件为u型棒;步骤三具体为:将u型棒的***端和第二端分别插入到左侧或右侧腰4椎间孔及腰5椎间孔中,得到大鼠慢性背根神经压迫模型。进一步地,压迫元件采用不受磁场干扰、置入体内不会对神经造成化学刺激以及具有一定可塑性的材料制备而成。在一个具体实施方式中,压迫元件采用黄铜和锌的混合物制备而成。具体地,混合物为h62黄铜,即含铜量为%~%,余量为锌含量的黄铜。而铜、锌皆属于非铁磁性物质。在另一个具体实施方式中,压迫元件采用聚乳酸(polylactic,pla)制备而成。pla是一种无毒无刺激的合成高分子材料,其原料是乳酸,不含任何金属。h62黄铜棒或pla棒在体内,即不会受磁疗、电疗引起的磁场、电场干扰,也不会对磁疗、电疗仪器及磁共振仪器产生不良影响。无锡提供疾病动物模型建模
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