浙江如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势
羟基脲(Hydroxyurea)为DNA合成抑制剂,经过10mM羟基脲提0min处理的细胞,绿色荧光阳性的细胞几乎完全消失,因此常被用作EdU实验的阴性对照。配制好的Click-iTAdditiveSolution请根据每次用量适当分装后-20℃保存,避免反复冻融。Click-iTAdditiveSolution融化后有白色物质析出为正常现象,请上下颠倒几次,待全部溶解后使用。溶液一旦呈现棕色,则说明有效成分降解,不能再使用。皂苷促渗液可以用于全血及含红细胞的细胞悬液,以及其他含多种细胞类型的混合细胞悬液的通透。这种促渗液可以在裂解红细胞的同时,维持白细胞的光散射特性。本试剂盒做动物实验时可能需要更多的EdU,请根据实验需求用合适稀释液稀释后使用。EdU细胞增殖检测试剂盒怎样使用?上海东寰告诉您。浙江如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势
为了与其他荧光共同使用,东寰生物提供多种染料供选择,覆盖常用检测通道,方便您轻松选择适合的染料,比较大限度地扩展第三方染色的适用范围,比较大限度地满足您的检测仪器要求,完全解决您的实验难题。EdU细胞增殖检测方法不需要剧烈的DNA变性操作,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,更适合结合其他染料或蛋白标记(如P65抗体)等进行多重标记,从而在细胞水平获取更多的直观多维特征信息,更适合深入开展细胞功能方面的研究。上海如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒供应商EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势如何?
EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留。注:贴壁不牢的细胞可降低清洗强度。
本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等),这种变性可能会影响细胞形态,影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较参见图2。上海东寰告诉您EdU细胞增殖检测试剂盒的运用方式。
EdU细胞増殖检测试剂盒(红色荧光)使用说明产品简介细胞增殖是评价细胞活性、代谢、生理和病理状况的重要指标。EdU(5-Ethynyl-2,-deoxyuridine)是一种胸腺嘧啶核苷类似物,其连有的炔烃基团在天然化合物中很少见,能够在细胞增殖时期代替胸腺嘧啶(T)掺入正在复制的DNA分子中,通过基于EdU与荧光染料的特异性共轭反应,把荧光集团标记到新合成的含有EdU的DNA上面,这样就可以进行高效快速的检测出DNA复制活性,广泛应用于细胞增殖、细胞分化、生长与发育、DNA损伤修复等方面的研究。传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法需要DNA变性、抗原修复、抗原抗体过夜孵育等复杂繁琐的操作步骤。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。EdU与胸腺嘧啶(T)结构非常相似,而EdU染料大小只有BrdU抗体的1/500,在细胞内很容易扩散,无需DNA变性(酸解、热解、酶解等),可有效避免样品损伤,而且无需抗原抗体反应,能在细胞和组织水平更快速便捷地反映DNA复制活性。试剂盒组分产品编号试剂浓度试剂量保存条件EdU溶液1000X40ul室温运输,4℃长期储存,勿冻存。EdU细胞增殖检测试剂盒的结构如何组成?北京品牌EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
EdU细胞增殖检测试剂盒的发展前景如何呢?浙江如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势
蛋白抽提/WesternBlotting技术服务WesternBlotting技术服务(DH1004)一.服务内容1、蛋白提取:从人或动物细胞、组织,细胞等样品中提取蛋白样品。2、蛋白定量:对样品中蛋白进行半定量分析。3、WesternBlot检测(1)电泳:聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)分离蛋白样品。(2)湿法转印。(3)杂交:用抗体鉴定膜上的特定蛋白。(4)显色:ECL荧光显色,黑条带白背景照片4、提供蛋白内参检测(所有内参抗体均不收取费用)。5、预实验及正式实验服务。二.样品要求1、细胞>1×10^7;组织>30mg;细菌湿重>1mg等。2、样品蛋白浓度>1mg/ml,蛋白量>200ug/样品。3、建议提供目的蛋白阳性表达样品(纯蛋白、有阳性表达的细胞或组织、商品化的阳性对照产品等)作为阳性对照。注:若有特殊处理的样品,请尽可能出示相关材料(具有保密性的材料除外)。三.收费标准服务项目免疫学检测服务内容周期产物/报告价格(元)DH1004-01样品准备总蛋白提取、定量、质控3天总蛋白质控报告100元/样DH1004-02免疫印迹(WB)WB预实验,质控WB体系5-10天完整实验报告1000元/膜WB检测正式实验10-15天完整实验报告1000元/膜四、客户提供材料1、样品:新鲜或正确保存的样品以及与样品相关的必要资料。浙江如何使用EdU细胞增殖检测试剂盒优势
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