口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
现在有一种新的检测方法能避免这种情况的发生——EdU检测。EdU(5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷)也是一种胸腺嘧啶核苷类似物,但其连有的炔羟基团在天然化合物中很少见,在细胞增殖时能够插入正在复制的DNA分子中,基于EdU与染料的共轭反应可以进行高效快速的细胞增殖检测分析,可以有效地检测处于S期的细胞百分数。与传统的免疫荧光染色(BrdU)检测方法相比,更简单,更快速,更准确。EdU只有BrdU抗体大小的1/500,在细胞内更容易扩散,不需要严格的样品变性(酸解、热解、酶解)处理,有效地避免了样品损伤,有助于在组织、的整体水平上观测细胞增殖的真实情况,具有更高的灵敏度和更快的检测速度上海东寰告诉您使用EdU细胞增殖检测试剂盒的便捷性。口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。建议染色完成后立即进行荧光显微镜拍照观察;如果条件限制,请于4°C条件下避光湿润保存3天之内完成拍照。若为细胞爬片或涂片,可使用抗荧光淬灭封片剂进行封片后于4°C条件下保存及拍照检测。而EdU检测方法不需要剧烈的DNA变性,只需温和的细胞固定化和透化处理,能够较好地保护细胞形态、DNA整体结构及细胞内抗原识别位点,操作步骤更加快速、灵敏和准确。江苏提供EdU细胞增殖检测试剂盒厂家使用EdU细胞增殖检测试剂盒能给人们带来便利吗?
EdU-488细胞增殖检测试剂盒(MeilunEdUCellProliferationKitwithAlexaFluor488),是一种利用核苷渗入法对细胞增殖情况进行快速、简单、高灵敏检测的试剂盒。其原理为:试剂盒中的EdU(5-ethynyl-2′-deoxyuridine)是一种胸苷(T)类似物,EdU可以在在细胞周期的S期中替代胸苷掺入到新合成的DNA中;另一方面,EdU上的乙炔基能与叠氮化物(如荧光探针AlexaFluor488Azide)通过Cu+的催化发生共价反应,形成稳定的三唑环,该反应非常迅速,被称作点击反应(Clickreaction)(图1)。通过点击反应,新合成的DNA会被绿色荧光标记,然后通过检测荧光信号实现细胞增殖的检测。
EdU标记(a)将细胞完全培养基中按照500:1的比例加入EdU溶液,制成2xEdU标记培养基;(b)提前将2xEdU标记培养基预热,然后等体积加入到细胞原有培养基中,获得lxEdU溶液,其中EdU的终浓度为10uM;注:1)我们不建议替换全部培养基,因为这样可能会影响细胞增殖的速度;2)配置好的培养基建议现用现配,用量以没过细胞为宜;(c)每孔加入300ul含EdU培养基孵育细胞2小时,弃培养基;注:1)培养时间取决于细胞的增殖速度和生长状态;2)大多数**细胞以及粘附细胞系均可采用2小时的孵育时间(d)以lxPBS清洗细胞两次,毎次5分钟,以除去未掺入DNA的EdU残留EdU细胞增殖检测试剂盒的结构如何组成?
本试剂盒使用便捷、兼容性好。本试剂盒只需常用的多聚甲醛固定和TritonX-100穿透,就可以使叠氮化物探针有效进入细胞并发生点击反应,不会影响细胞形态,不会影响基于抗体的免疫荧光和免疫组化检测,也不会影响DNA的荧光染色(如PI染色检测细胞周期、DAPI或Hoechst染料检测细胞核)。而BrdU法为了使大分子的BrdU抗体进入细胞并与DNA上的BrdU结合,需要对双链DNA进行变性处理(如酸变性、热变性或者DNase消化等),这种变性可能会影响细胞形态,影响后续的免疫荧光和免疫组化检测、DNA的荧光染色等。BrdU法和BeyoClick™EdU法检测原理的比较参见图2。上海EdU细胞增殖检测试剂盒的发展趋势。提供EdU细胞增殖检测试剂盒价格
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细胞的固定和通透(a)每孔加入150ul4%多聚甲醛细胞固定液,室温培养30分钟,弃固定液;(b)毎孔加入150ul2mg/ml甘氨酸,摇床孵育5分钟,以中和过量的多聚甲醛;(c)弃甘氨酸溶液,每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;(d)每孔加入300ul0.5%TritonX-100细胞通透液,室温通透10分钟,弃细胞通透溶液;(e)每孔加入300ulPBS洗液,室温清洗5分钟;该产品是采用成像检测方法对贴壁细胞进行检测,适用于荧光显微镜、共聚焦显微镜等仪器。非贴壁细胞可在孵育EdU后进行细胞涂片处理,固定后再采用贴壁细胞的染色流程进行检测。也可以应用于流式细胞仪检测。口碑好的EdU细胞增殖检测试剂盒哪家好
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