河北胰酶供应商
胰蛋白酶用法用量1.每次~5mg,用蒸馏水5~10ml溶解。2.一般应用:1次5000单位,每日1次肌注,用量酌情而定。为防止疼痛,可加适量普鲁卡因。局部用*视情而定,可配成溶液制剂(~,微碱性时活性**强)、喷雾剂、粉剂、油膏等,用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。3.治蛇毒:取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1~3支,加~(或注射用水)4~20ml稀释,以牙痕为中心,在伤口周围作浸润注射,或在肿胀部位上方作环状封闭1~2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显,可于注射本品30分钟后,切开伤口排毒减压(严重出血者例外),也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂,可用其***胰蛋白酶注意事项1.不可作静注。用前需作划痕试验,应注意可能产生过敏反应。2.吸取注射液后应另换针头,以免注射时疼痛。3.外用时,可采用注射用制剂以缓冲液溶解,但必须在3小时内用毕。胰蛋白酶不良反应:1.注射局部疼痛、硬结。2.本品可引起组胺释放,产生全身反应,有寒战、发热、***、头晕、胸痛、***、皮疹、血管神经性水肿、呼吸困难、眼压升高、白细胞减少等。症状轻时不影响继续***,给予抗组胺*和对症*物即可控制,严重时应即停*。3.本品偶可致过敏性休克。胰蛋白酶溶液用于组织和单层细胞的解离。河北胰酶供应商
胰蛋白酶**点评胰蛋白酶能使痰、血凝块溶化变稀,易于引流排痰,加速创面愈合净化,促进肉芽**增生,而不损伤正常**,临床上有消消肿功能。[4]胰蛋白酶其他胰蛋白酶细胞培养胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的**或者细胞对胰酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关,在pH为、温度为37℃时,胰酶溶液的作用能力**强。使用胰酶时,应把握好浓度、温度和时间,以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、Mg2+和血清、蛋白质可降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks液。终止消化时,可用含有血清培养液或者胰酶**剂终止胰酶对细胞的作用。1.称取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液浓度为%,用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水(若用双蒸水需要调PH到左右)或PBS(D-hanks)液中。搅拌混匀,置于4℃内过夜。2.用注射滤器抽滤消毒:配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器(微米微孔滤膜)抽滤**。3.分装成小瓶于-20℃保存以备使用可!词条图册更多图册参考资料1.胰蛋白酶.化学品数据库[引用日期2017-05-26].***典**会,***典2010版[M],北京:**医*科技出版社。黑龙江进口胰酶哪家便宜胰蛋白酶可以用于原代细胞的传代过程中分散组织。
胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽进而分解为氨基酸,其**适温度约为 37°℃。Trypsin solution(2.5%)由 2.5%胰酶组成,不含 EDTA,经过滤除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下 1min 左右就可以消化下大多数贴壁细胞。该溶液浓度较高,可以稀释到相应浓度后使用。
0.25%胰酶是细胞生物学中常用的一种生物试剂,下面汇总一下胰酶使用过程中常见的一些问题。胰酶的使用浓度是多少?胰酶浓度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。为什么收到的胰酶会有颜色差异?商品化胰酶溶液需要用干冰运输,在运输过程中,胰酶溶液中的二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换,导致溶液PH的漂移。有些胰酶溶液里含有酚红作为PH值指示剂,因此胰酶PH的变化是肉眼可观察到的。由干冰运输过程中导致的PH值的变化很小,PH值会从7.2-8.0变化到了6.8左右,在PH值7.2-8.0的时候,溶液呈淡红色;PH值6.8左右时呈淡黄色。因此胰酶颜色的变化是由PH值的变化引起,归因于使用干冰运输。这种颜色的变化是行业普遍现象,在不同供应商的胰酶产品都会出现。胰酶在细胞培养中的作用和在消化酶中的作用?
冰冻保存,但不得反复冻融。供试品溶液的制备取本品适量,精密称定,加。测定法取底物溶液、(pH)1ml,混匀,作为空白。取供试品溶液(预热至25℃±℃),立即计时并摇匀,使比色池内的温度保持在25℃±℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),在237nm的波长处,每隔30秒读取吸光度,共5分钟,每30秒钟吸光度的变化率应恒定,且恒定时间不得少于3分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图,取在3分钟内成直线部分的吸光度,按下式计算。式中P为每2500胰蛋白酶单位中含糜蛋白酶的量,单位;A2为直线上开始的吸光度;A1为直线上终止的吸光度;T为A2至A1读数的时间,分;W为测定液中含供试品的量,mg;,吸光度每分钟改变,即相当于1个糜蛋白酶单位。每2500单位胰蛋白酶中不得多于50单位的糜蛋白酶。干燥失重取本品适量,以五氧化二磷为干燥剂,在60℃减压干燥4小时,减失重量不得过(2010年版*典二部附录ⅧL)。胰蛋白酶效价测定底物溶液的制备取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐,加水溶解使成100ml,作为底物原液;取10ml,用磷酸盐缓冲液(取,pH值为)稀释成100ml,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),恒温于℃±℃,以水作空白。胰酶颜色的变化是由PH值的变化引起,归因于使用干冰运输。上海进口胰酶大概价格多少
胰酶溶液中的二氧化碳与干冰挥发的二氧化碳可能会极少部分的气体交换。河北胰酶供应商
使**或细胞片分散成单个细胞,制成细胞悬液用于进一步的实验。影响消化速度的因素较多,主要有胰酶溶液的活性(配制条件、冻存或4℃保存时间长短、是否反复冻融、化冻后存放时间及温度等)、消化时的温度(气温、细胞培养瓶及胰酶溶液的温度)以及所加胰酶溶液的多少等。加入胰蛋白酶-EDTA溶液,视细胞瓶的大小加入体积为2ml或更多(依培养器皿的大小而定),以使充分浸润;一般消化时间约为1至3分钟,肉眼观察瓶底由半透明(细胞单层连接成片)转为透明、点状(出现细小空隙)时,弃去细胞消化液,或看见培养瓶壁呈白茫状即可。并加入适量的完全培养液终止消化,吹打分散;如见大量细胞片状脱落,已消化过头,则不能顷倒消化液而直接进行下一步操作。(消化过头,可造成大量细胞从瓶壁上脱下,甚至造成细胞破碎。由于血清含有非特异性胰蛋白酶抑制剂,所以加入完全培养基可以终止反应。胰酶配置方法:1、培养液配制,方便好用,对细胞影响小,并且培养液的ph值正好适合胰蛋白酶的溶解2、生理盐水配制,要先调ph值(①胰酶(1:250)克②EDTA-Na③NaCl④KCl⑤Glucose⑥PhenolRed⑦Water1000mL磁力搅拌2-3小时,调pH,过滤**。)3、pbs(:称取胰酶粉末。河北胰酶供应商
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