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    无动物组分无血清细胞培养基的应用三、细胞培养基的质量标准和检测方法澄清度水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取，细胞才能生长增殖，因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查，判断细胞培养基的澄清度。按中华******典2005年版二部附录ⅨB进行。pH值哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度，pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品，用注射用水（水温20℃-30℃）溶解至1L，加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中，用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中华******典2005年版二部附录ⅥH进行；加入规定量的碳酸氢钠（见表4-12）到上述溶液中，按中华******典2005年版二部附录ⅥH进行。干燥减量的质量分数细胞培养基具有吸湿性，在空气中放置水分会很快升**燥减量的质量分数表示产品中含湿量。细胞培养基是有菌制剂，其丰富的营养成分有利于微生物生长，控制细胞培养基中的水分可以防止微生物的繁殖，保持细胞培养基的养分。MEM培养基是细胞生物学研究中的基础培养基之一。新疆MEM培养基进口

    促使植物材料快速生长、芽体健壮。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s4中，将s3中的无菌外植体接入增殖培养基中后的培养环境为在光照强度1500lux条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。通过采用上述技术方案，在该培养条件下能够有效避免增殖培养阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应增殖培养基，促使植物材料快速生长、芽体健壮。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s4中，每隔8～12周转接入新的增殖培养基。通过采用上述技术方案，经过8～12周后，增殖培养基的效果将会减弱，植物材料也会污染增殖培养基，需要及时更换。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s5中，将s4中的绣球组培苗接入生根培养基中后的培养环境为在光照强度1500lux条件下，温度25℃，光照时间16h；黑暗条件下，温度23℃，光照时间8h，培养8～12周。通过采用上述技术方案，在该培养条件下能够有效避免生根培养阶段植物材料出现应激反应，植物材料能够快速适应生根培养基，促使植物材料快速生长、芽体健壮。本发明在一较佳示例中可以进一步配置为：在s2中，外植体消毒的具体步骤为将树莓外植体叶片剪去，自来水冲洗干净。中国台湾MEM a培养基哪家便宜无血清培养基有助于细胞在无血清环境中的生长。

    从而使培养基的预热、加热**及冷却过程可在同一设备内完成。该流程的加热和冷却时间比喷射加热连续**流程要长些，但由于在培养基的预热过程同时也起到了**后培养基的冷却，因而节约了蒸汽和冷却水的用量。（2）蒸汽直接喷射型的连续**系统流程中采用了蒸汽喷射器，它使培养液与高温蒸汽直接接触，从而在短时间内可将培养液急速升温至预定的**温度然后在该温度下维持一段时间**，**后的培养基通过一膨胀阀进入真空冷却器急速冷却，从图中可以看出，由于该流程中培养基受热时间短，营养物质的损失也就不很严重，同时该流程保证了培养基物料**先出，避免了过热或**不彻底等现象。（3）由连消塔、维持罐和喷淋冷却组成的**系统连续**的基本设备一般包括：①配料预热罐，将配制好的料液预热到60-70℃，以避免连续**时由于料液与蒸汽温度过大而产生水汽撞击声；②连消塔，连消塔的作用主要是使高温蒸汽与料液迅速接触混和，并使料液的温度很快升高到**温度（126-132）℃；③维持罐，连消塔加热的时间很短，光靠这段时间的**是不够的，维持罐的作用是使料液在**温度下保持5-7min，以达到**的目的；④冷却管，从维持罐出来的料液要经过冷却排管进行冷却。

    以及无血清培养的基础细胞培养基。RPMI-1640细胞培养基专门针对淋巴细胞培养设计，含有BSS、21种氨基酸、维生素等，***适于多种正常细胞和肿*细胞的培养，也用做悬浮细胞培养。HamF12细胞培养基含微量元素，可在血清含量低时用，适用于克隆化培养。F12适用于CHO细胞，也是无血清细胞培养基中常用的基础细胞培养基。DMEM/F12细胞培养基将DMEM和F12按照1:1比例混合，混合后营养成份丰富，血清使用量也减少。常作为开发无血清细胞培养基时的基础细胞培养基。与天然培养基相比，有些天然的未知成分尚无法用已知的化学成分所替代，因此，细胞培养中使用合成培养基时必须加入一定量的天然培养基成分，以克服合成培养基的不足。**普遍的做法是添加5~10%的血清，这样才能维持细胞活力，促进细胞增殖。针对不同的动物细胞，现已开发了多种商业化、个性化的低血清细胞培养基配方，营养成份更加丰富，血清使用量可降低至1～3%，由此可减少了血清等动物来源成份对生物制品安全性的影响。（serumfreemedium，SFM）经历了天然培养基、合成培养基后，无血清培养基和无血清培养成为当今细胞培养领域的一大趋势。采用无血清培养可降低生产成本，简化分离纯化步骤，避免**污染造成的危害。F12培养基适用于神经细胞和其他敏感细胞系。

    维持15-20分钟，可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的**，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。（二）下向主要介绍高压蒸气**器**效果的验证方法高压蒸气**器使物品**后达到无菌要求，这是**实验中的基本保证。高压**器**效果是否合格足实验成败的**基础**关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解，不需高压**外，大部分培养基均需121℃高压**15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基**不彻底，直接关系到对**的无菌试验结果。因此必须认真对高压**器进行**效果的验证。为此我们提供了进行**效果验证的一个简易可行的方法。1．试验材料(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌，含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃压力蒸气**化学指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压**20分钟后备用。(4)O—150℃留点温度计。2．方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片（以下简称菌片）用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压**器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如**器为二层，则需放10处。使用减血清培养基能提高实验的可重复性。天津DMEM高糖培养基供应商

F12培养基在组织工程和再生医学中有广泛应用。新疆MEM培养基进口

    SLM）低血清培养基添加1％小牛血清在转瓶中培养CHO细胞生产EOP，可提高收液次数，每次收液表达量明显提高。概述无血清培养基是用来在无血清条件下生长特殊类型的细胞或进行专门应用的培养基。一般是由基础培养基和替代血清的补充因子组成。无血清培养基中没有添加血清，但含有个别蛋白或大量蛋白组分。无血清培养基与无蛋白培养基的区别在于培养基中没有添加蛋白，但含有一些动物或植物来源成分，如低分子量肽的水解物。还有一种化学限定培养基，培养基中不含有蛋白、水解产物或未知结构的组分，所有成分均有已知的化学结构。***：1）未知组分少；2）培养基中不存在血清中的抗体、补体等成分，对培养细胞影响小；3）杂蛋白含量少，生产的产品后期处理较容易，例如*苗生产由于人用*苗需要纯化减少杂蛋白，纯化过程中成本消耗很大，*苗的损失也很大；4）无血清培养既可以实现细胞的大规模悬浮培养，增加培养液的利用率，可以采用发酵罐培养减少了人力消耗。缺点：目前为止不是所有的细胞都能在无血清培养基中培养。无血清培养基的某些组分价格昂贵，导致无血清无法工业推广的主要原因。新疆MEM培养基进口