甘肃EBSS缓冲液

缓冲液的作用和使用注意事项

一、缓冲液的概念缓冲液（Buffersolution）通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液，能够在加入一定量其他物质时减缓pH的改变。以生物实验中**常用的一种缓冲液PBS为例，是由Na2HPO4、KH2PO4组成的缓冲对，在PH5.8-8.0范围内有较强的缓冲能力。二、缓冲液的作用缓冲溶液的作用是在有限的范围内调整溶液的pH值，使待测溶液的酸度符合分析方法所规定的范围。例如，苯酚在碱性介质及铁**钾存在下，可与4-氨基安替比林反应生成橙红色的安替比林染料，为了防止芳香胺类的干扰以pH在10士0.2时**为适宜。为此，就需要在待测溶液中加入氨一氯化钱缓冲溶液调整和控制待测溶液的pH为10.0士0.2。 生化实验室常常用的缓冲系主要有磷酸、柠檬酸、碳酸、醋酸、巴比妥酸、Tiris（三羟甲基氨基甲烷）等系统。甘肃EBSS缓冲液

生物缓冲液pH计校正及使用方法

生物缓冲液在实验分析中经常被用到，它的作用是稳定溶液的pH值。然而，很多人在实验中会遇到无法调节缓冲液pH值的情况，这是为什么呢？如何解决这个问题呢？下面我将详细介绍。首先，从目前使用的pH计来看，国产的pH计或酸度计，校正缓冲液时需要注意以下两种情况：

1、购买市场上配置好的标准溶液，在聚乙烯瓶中密封储存。如果在室温条件下保存1-2个月后，若出现浑浊、沉淀或发霉等情况，就不能继续使用了。已经使用过的校正缓冲液也不能再倒回去使用。2、购买缓冲剂并自己配置。大部分厂家生产的缓冲剂都是干燥型的pH缓冲剂，使用时需要将其溶解在之前煮沸15-30分钟的去离子水中，然后倒入250ml容量瓶中，稀释至刻度，充分摇匀即可。 福建DPBS缓冲液价格缓冲溶液是无机化学及分析化学中的重要概念。

制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单，以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法：13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠（NaCl）和0.2g的磷酸二氢钾（KH2PO4）加入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升，继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯，将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注：若需要使用1×PBS缓冲液，只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。

制备PBS缓冲液的方法制备PBS缓冲液非常简单，以下是制备1升10×PBS缓冲液的方法：13.将800ml的去离子水加入大容量烧杯中。14.将8g的氯化钠（NaCl）和0.2g的磷酸二氢钾（KH2PO4）加入烧杯中，用玻璃棒搅拌均匀。15.用去离子水将溶液补足至1升，继续搅拌至完全溶解。16.用盖子或保鲜膜覆盖烧杯，将烧杯放入冰箱中冷藏保存。注：若需要使用1×PBS缓冲液，只需取10×PBS缓冲液适量稀释即可。

    1MTris-HCl(,,)组份浓度：1MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.称量gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。4.将溶液定容至1L。5.高温高压**后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低。10&timeTEBuffer(,,)组份浓度：100mMTris-HCl,10mMEDTA配制量：1L配制方法：1.量取下列溶液，置于1L烧杯中。2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，均匀混合。3.将溶液定容至1L后，高温高压**。4.室温保存。MTris-HCl()组份浓度：MTris-HCl配制量：1L配制方法：1.称量gTris置于1L烧杯中。2.加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.用浓盐酸调节pH值至。4.将溶液定容至1L。5.高温高压**后，室温保存。注意：应使溶液冷却至室温后再调定pH值，因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大，温度每升高1℃，溶液的pH值大约降低。3M醋酸钠()组份浓度：3M醋酸钠配制量：100ml配制方法：1.称量NaAc·3H2O置于100-200ml烧杯中，加入月40ml的去离子水搅拌溶解2.加入冰醋酸调节pH值至3.加去离子水将溶液定容至100ml4高温高压**后，室温保存。缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化.

    1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg／L、lmg／L、／L三个浓度按行包被，每一个浓度包被三行(每行3孔)，分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原，弱阳性抗原和阴性对照，将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度，分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色，加酸终止反应，分别读取A值。以强阳性抗原液A值在，阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1．1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择：①用IgG进行包被，洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。③加酸终止反应后，读取吸光度(A)。读取A值在1．0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。此外,PBS缓冲液也可能会对皮肤产生一定的刺激性,长期使用可能会导致皮肤老化和干燥。甘肃EBSS缓冲液

一种溶液是否是缓冲溶液，可以通过在溶液中加入少量的酸或碱，观察pH值的变化来判断。甘肃EBSS缓冲液

    该酶标IsC的工作浓度应为1／1?600。?????棋盘滴定法选择包被抗原工作浓度：①用包被液将抗原由1：50开始作比倍稀释后进行包被，洗涤。②将强阳性参考血清、弱阳性参考血清和阴性参考血清用稀释液作1：100稀释，加样，保温、洗涤。③加按工作浓度稀释的酶标IsC抗体，保温、洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后读取A值。⑤选择强阳性参考血清的A值为0．8左右、阴性参考血清的A值小于0．1的包被抗的稀释度作为工作浓度，从中选取**适工作浓度。?1．2夹心法测抗原?????在夹心ELISA法中，可用棋盘滴定法同时选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度。①抗体免*球蛋白用包被缓冲液稀释至蛋白浓度为10．0、1．0和0．1微克／毫升，分别在ELISA板上进行包被，每一浓度包括3个纵行，洗涤。②在1个横行各包被孔中加入强阳性抗原液，另1横行加入弱阳性抗原液，第3横行加入阴性对照液，保温、洗涤。③将酶标抗体用稀释液稀释成3个浓度，例如1：1?000、1：5?000和1：25000。分别加入每个包被浓度的1个纵行中，保温、洗涤。④加底物显色。加酸终止反应后，读取A值。⑤以强阳性抗原的A值在0．8左右、阴性参考的A值小于0．1的条件作**适条件，据此选择包被抗体和酶抗体的工作浓度。甘肃EBSS缓冲液