湖北培养基价目表
拟南芥根愈伤**诱导时,培养6-9d在切口处开始出现少量颗粒状愈伤**,培养20-22d获得淡黄色松脆型愈伤**,在愈伤**周围观察到大量致密分布的白毛,颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100%。如图5所示。培养实例5和对比培养例5的诱导结果比较:用上述方法进行哥伦比亚拟南芥叶片和根愈伤**诱导时,cs诱导培养基与ms诱导培养基的颗粒状愈伤**诱导率及愈伤**总诱导率均为100%,但cs诱导培养基的愈伤**出愈时间比ms诱导培养基提前至少1d;在相同培养条件下,与ms诱导培养基相比,经cs诱导培养基诱导的叶片团块状愈伤**更大、诱导的根愈伤**更多。如图5所示。培养实例6:本氏***叶片及根愈伤**诱导培养实例6与培养实例5不同的地方在于,步骤(1)将;步骤(2)将2,;步骤(3)所取叶片为本氏***无菌苗叶片,用手术剪刀将无菌叶片剪成,用镊子将其平铺于诱导培养基;步骤(4)所取根为本氏***无菌苗的根,cs诱导培养基的诱导结果为:本氏***叶片愈伤**诱导时,培养15-18d的叶片明显增大增厚,叶片四周产生大量的淡绿色致密的愈伤**,愈伤**诱导率为100%,且在愈伤**团块上已开始产生多个嫩绿色的不定芽;本氏***根愈伤**诱导时,培养9-11d在切口处产生大量淡黄色致密的愈伤**。RPMI1640培养基含有多种关键营养成分,支持细胞生长。湖北培养基价目表
培养实例2:兰兹贝格型拟南芥无菌植株培养培养实例2与培养实例1不同的地方在于:步骤(1)所用种子为兰兹贝格(ler,landsbergerecta)型拟南芥种子,兰兹贝格拟南芥较哥伦比亚拟南芥具有更早的花期,在适宜条件下培养,可以获得处于各发育时期的拟南芥无菌***,包括根、胚轴、叶柄、子叶、莲座叶、茎、花、角果等,其余完全同培养实例1。1/2cs生长培养基的培养结果为:兰兹贝格型拟南芥种子在1/2cs生长培养基上的萌发率为100%,培养28d的幼苗,表现为植株健壮、平均株高为,莲座叶发达、平均**大莲座叶长为,叶色浓绿,根系粗壮、平均主根长为,花序含有较多花朵,花粉形态和活力均正常、平均有活力的花粉为%。如图2所示。对比培养例2:将1/2cs基本培养基替换为1/2ms基本培养基,其余完全同培养实例2,1/2ms基本培养基的成分及用量如表1所示。1/2ms生长培养基的培养结果为:兰兹贝格型拟南芥种子在1/2ms生长培养基上的萌发率为100%,培养28d的幼苗,表现为植株健壮、平均株高为,莲座叶发达、平均**大莲座叶长为,叶色浓绿,根系粗壮、平均主根长为,花序发育良好,花粉形态和活力均正常、平均有活力的花粉为%。如图2所示。福建减血清培养基常用知识F12培养基含有丰富的营养物质,支持细胞的生长。
实验组和对照组3选用发酵中期添加琥珀酸,此时,菌体增殖放缓,以产酸为主,琥珀酸对三羧酸循环有正向促进作用,而对乙醛酸循环途径起**作用,从而导致谷氨酸产量的增加;梯度试验发现,琥珀酸添加量过**于10g/l),并不会对谷氨酸产量带来进一步的提升,综合成本考虑,选择低于10g/l的添加量较为合适。对照组2和实验组在发酵中后期添加壳聚糖,能够改变细胞壁的通透性,促进谷氨酸分泌到胞外,从而提升谷氨酸产量和糖酸转化率;但是壳聚糖添加量(超过100mg/l)过大会导致抑菌现象发生,进而造成菌株死亡。虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,或在实施案例之外的树种实施本方法,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改,改进或范围的扩大,均属于本发明要求保护的范围。
文献2“混合硝酸稀土对谷氨酸产生菌的影响,氨基酸杂志”发现,在发酵培养基中添加一定量的稀土元素,能够提高谷氨酸的产量。申请人之前的**技术“一种谷氨酸发酵培养基制备方法”,在常规培养基的基础上进行了改进,通过添加菌体蛋白浸膏来替代酵母膏氮源,不但节约了成本,还能提高氨基酸发酵产率,一举两得。技术实现要素:在已有发酵培养基的基础上,申请人针对微生物发酵的特点,继续进行了改进,以提高发酵效率,据此,提出了一种优化的谷氨酸发酵培养基。本发明是通过如下技术方案来实现的:一种优化的谷氨酸发酵培养基,其包括发酵培养基a和发酵培养基b;所述发酵培养基a首先添加,然后间隔12h以上添加发酵培养基b。进一步地,所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羟基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;将各原料搅拌均匀后,调节ph,**,制得发酵培养基a。进一步地,所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸,尿素,壳聚糖;将各原料搅拌均匀后,调节ph,**,制得发酵培养基b。推荐地,所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。无酚红培养基在实验中减少了潜在毒性。
无芽孢:E=209—250*103J/mol。显然,(5)式的比值〉1,说明提高温度对于第二个平行反应,即菌体死亡的反应是有利的。提高温度,虽然两个平行性反应的反应速度常数都提高了,但是,达到同样的**效果,所需要的时间却缩短了,由于***个反应也就是营养成分破坏的反应速度常速增加的少,因此,有利于减少培养基在**过程中营养成分的破坏。换言之,高温短时**对于培养基营养成分是有利的。通常所说的高温短时**可以提高生产效益,其理论根据就在于此。结论1:当**温度上升时,微生物杀死速率的提高要超过培养基成分的破坏速率的增加。要减少营养成分的破坏,可升高温度**。结论2:在**时选择较高的温度、较短的时间,这样便既可达到需要的**程度,同时又可减少营养物质的损失。(二)、影响**效果的因素(1)微生物种类:不同的微生物k值不同。(2)初始菌量:在保持N值不变的前提下,t与初始菌量N0的对数成正比。(3)培养基成份:油脂、蛋白质增加微生物的耐热性。(4)传热与混合状况:影响受热均匀度。(5)培养基中固体颗粒的存在影响热穿透。(6)蒸汽中空气的存在降低蒸汽分压和**温度。(7)pH:酸性pH下可加快微生物热死速率三、培养基的工业**。无血清培养基适用于需要无血清环境的细胞。山西无血清培养基大概价格多少
减血清培养基提高了实验的可重复性。湖北培养基价目表
维持15-20分钟,可杀灭所有的繁殖体和芽胞。本法适用于耐高温、耐湿物品的**,如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。(二)下向主要介绍高压蒸气**器**效果的验证方法高压蒸气**器使物品**后达到无菌要求,这是**实验中的基本保证。高压**器**效果是否合格足实验成败的**基础**关键的首要步骤。除少数培养基只需加热溶解,不需高压**外,大部分培养基均需121℃高压**15-30分钟。尤其是对无菌试验培养基**不彻底,直接关系到对**的无菌试验结果。因此必须认真对高压**器进行**效果的验证。为此我们提供了进行**效果验证的一个简易可行的方法。1.试验材料(1)嗜热脂肪芽胞杆菌纸片。嗜热脂肪芽胞杆菌(Bacillusstearothermophilus)ATCC7053是本法常用的生物指示菌,含芽胞量5-lO5CFU/片。(2)121℃压力蒸气**化学指示卡。(3)溴甲酚紫胨水培养基116℃高压**20分钟后备用。(4)O—150℃留点温度计。2.方法与结果将嗜热脂肪芽胞杆菌纸片(以下简称菌片)用无菌镊子放人密封试管中。化学指示卡和留点温度计放入敞口试管中。以上两种试管各准备5-10份。分别放置在高压**器蒸气口处、底部排气口处及底部出水口处或上下左右中间5处。如**器为二层,则需放10处。湖北培养基价目表
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