吉林有酚红缓冲液答疑解惑

PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液，一般选择Na2HPO4和KH2PO4配制，因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液，称量不同质量的磷酸盐，也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。

配置方法播报编辑采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步骤进行：(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；(3) 将18.2%（体积分数）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合； 缓冲液是一种能在加入少量酸或碱时抵抗pH改变的溶液。吉林有酚红缓冲液答疑解惑

    1:50～l:800)后，按行进行包被、洗涤。按列分别加入用稀释液1:100稀释的强阳性、弱阳性、阴性参考血清及稀释液(作空白对照)，保温，洗涤。加工作浓度酶标抗体，洗涤，加底物显色，加酸终止反应后读取A值。选择强阳性参考血清A值；为0．8左右，阴性参考血清A值<0．1的包被抗原稀释度为工作浓度。?方阵(棋盘)法选择包被抗体和酶标抗体的工作浓度将抗体用包被液稀释为10mg／L、lmg／L、／L三个浓度按行包被，每一个浓度包被三行(每行3孔)，分别在每个浓度包被的***、二、三行中分别加入强阳性抗原，弱阳性抗原和阴性对照，将酶标抗抗体用稀释液稀释为1:l000、l:5000、l:10000三个浓度，分别加入每个浓度包被的***、二、三列中。加底物显色，加酸终止反应，分别读取A值。以强阳性抗原液A值在，阴性参考A值<**适条件。据此选择包被抗体和酶标抗体的**佳工作浓度。?二、ELISA**适工作浓度的选择及标准化操作1**适工作浓度的选择?1．1间接法测抗体?????酶标抗体工作浓度的选择：①用IgG进行包被，洗涤。②将酶标IgG用稀释液作一系列稀释后分别加入已包被的孔中，保温、洗涤。③加酸终止反应后，读取吸光度(A)。读取A值在1．0时的酶标抗体稀释度，作为酶标抗体的工作浓度。吉林有酚红缓冲液答疑解惑如果加入的酸或碱量过多，缓冲溶液的缓冲能力会降低，pH值会发生变化。

实验室使用缓冲液时的pH计或酸度计调校方法：1、在对缓冲液使用pH计进行校正时，需要调整仪器的斜率，并将电极上部的橡胶塞拨开，将小孔暴露在外。否则，在校正过程中会产生负压，导致溶液无法正常进行离子交换，从而使测量数据不准确。2、将电极从烧杯中取出，用滤纸将未干的水分吸干，然后将其放入装有混合磷酸盆的烧杯中，等待大约15分钟，然后进行仪器的调整，设定基准点。3、然后将电极放入装有KHC8H4O4或硼砂溶液的容器中，等待15分钟后，观察仪器显示的pH数值。4、校正完成后，将橡胶塞放回原位。如果暂时不使用pH计，一定要保护好它，将其放入保护套中，以延长其寿命。此外，需要注意的是pH计属于易碎品，需要轻拿轻放。

手持式缓冲液pH计的校准方法：在温度为25度的条件下，将测试电极插入pH值为6.86的混合磷酸盐标准缓冲液中，并缓慢转动电极。可以稍微调整校正电位器，直到显示器上的数值与标准缓冲溶液的pH值相同。如果将电极插入其他缓冲溶液中，如pH值为4.01的C8H5KO4或pH为9.18的硼砂标准缓冲溶液中，显示的数值与缓冲液的pH值允许有一定误差，但误差应在参考值范围内。

分析测试中，在络合滴定和分光光度法等许多反应里都要求溶液的pH值保持在一个范围内，以保证指示剂的变色和显色剂的显色等，这些条件都是通过加入一定量的缓冲溶液达到的，所以缓冲溶液是分析测试中经常需要的一种试剂。 采用电位滴定法测定外加酸或碱对不同配比同一种缓冲溶液的滴定曲线，不仅有助于理解缓溶液及缓冲容量的概念而且对分析测试中正确选缓冲溶液的配制方法及用量具有指导意义。 [3]采用电位滴定法测定缓冲溶液的滴定曲线，选择 了常见的氨水-氯化铵缓冲溶液，分别按照不同的配比得到4种缓冲溶液，实验测定了强酸、强碱对缓冲 溶液的滴定曲线，滴定结果直观清晰，对理解缓冲容 量的概念及实践中缓冲溶液的选择有积极的意义。 [3]什么是缓冲溶液?请简述其在生物体中的作用。

三、缓冲液使用中的注意事项在实际工作中有些分析人员由于不大了解缓冲溶液的作用机理，当所配制和使用的缓冲溶液与规定的数值不相符时，为使缓冲溶液达到要求，就用盐酸或氢氧化钠等强酸、强碱进行调节,以为这样做可以使缓冲溶液尽快达到所需要的pH值，然而，结果却适得其反，这样的溶液pH值虽然调对了，可是它的缓冲体系却被破坏了，作用也就失去了，缓冲溶液一般都是由弱酸及其弱酸盐或是弱碱及其弱碱盐组成的一对共轭体。使用缓冲溶液的注意事项：不少缓冲溶液都含有易挥发组分，如，氨-氯化铵中的氨酷酸-醋酸钠中的醋酸。现在，不少实验室引入了定量加液器，用定量加液器加试剂，具有简便准确误差恒定的特点，特别是在做成批样品时更显出它的优越性，不少同志也喜欢用它来加缓冲液，但是，应注意缓冲液不能长久存放在定量加液器中，因该器皿不密闭，易造成氨的挥发（醋酸-醋酸钠缓冲液中的醋酸也同理），从而，导致溶液失效，正确的做法是缓冲液应适量配制，使用后及时密闭并置于低温中保存。通过选择合适的缓冲液可以确保酶在条件下进行催化反应。福建EBSS缓冲液一般多少钱

缓冲液（Buffer solution）通常是由弱酸及其共轭碱或弱碱及其共轭酸缓冲对所组成的溶液。吉林有酚红缓冲液答疑解惑

缓冲溶液的pH通常由酸的电离平衡常数Ka及盐和酸的浓度以及所在的环境、温度等因素来决定；4.75~7.25属于正常ph范围内。缓冲溶液是由弱酸及其盐、弱碱及其盐组成的混合溶液，能在一定程度上抵消、减轻外加强酸或强碱对溶液酸碱度的影响，从而保持溶液的pH值相对稳定。缓冲溶液的pH值在一定的范围内不因稀释或外加少量的酸或碱而发生***的变化，缓冲溶液依据共轭酸碱对及其物质的量不同而具有不同的pH值和缓冲容量。1、酸和盐浓度等比例增减时，溶液的pH值不变。2、酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为比较高，比例相差越大，缓冲效率越低。吉林有酚红缓冲液答疑解惑