重庆重组胰酶哪个好
乙二胺四乙酸:(EDTA)是一种有机化合物,常温常压下为白色粉末。它是一种能与Mg2+、Ca2+、Mn2+、Fe2+等二价金属离子结合的螯合剂。动物细胞在粘附的时候,需要有Ca或Mg离子的参与,EDTA与他们结合后,导致动物细胞粘附能力降低,再加上胰蛋白酶的消化作用,使得细胞与瓶壁快速脱离。两者起到了协同消化的作用。难消化的细胞,胰酶中可填加EDTA。EDTA对细胞贴壁性有影响,因此使用时要甚重。如果影响贴壁,但消化时必须要用,那么在用完全培养基终止消化后,可离心弃上清,再加完全培养基培养,可去除EDTA。如果对贴壁没影响,那么可不离心。胰酶细胞消化液(Trypsin-EDTA Solution)含0.25%胰酶和0.02%EDTA。重庆重组胰酶哪个好
冰冻保存,但不得反复冻融。供试品溶液的制备取本品适量,精密称定,加。测定法取底物溶液、(pH)1ml,混匀,作为空白。取供试品溶液(预热至25℃±℃),立即计时并摇匀,使比色池内的温度保持在25℃±℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),在237nm的波长处,每隔30秒读取吸光度,共5分钟,每30秒钟吸光度的变化率应恒定,且恒定时间不得少于3分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图,取在3分钟内成直线部分的吸光度,按下式计算。式中P为每2500胰蛋白酶单位中含糜蛋白酶的量,单位;A2为直线上开始的吸光度;A1为直线上终止的吸光度;T为A2至A1读数的时间,分;W为测定液中含供试品的量,mg;,吸光度每分钟改变,即相当于1个糜蛋白酶单位。每2500单位胰蛋白酶中不得多于50单位的糜蛋白酶。干燥失重取本品适量,以五氧化二磷为干燥剂,在60℃减压干燥4小时,减失重量不得过(2010年版*典二部附录ⅧL)。胰蛋白酶效价测定底物溶液的制备取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐,加水溶解使成100ml,作为底物原液;取10ml,用磷酸盐缓冲液(取,pH值为)稀释成100ml,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),恒温于℃±℃,以水作空白。山西胰酶是什么胰酶细胞消化液含 0.25%胰酶和 0.02%EDTA。
胰蛋白酶用法用量1.每次~5mg,用蒸馏水5~10ml溶解。2.一般应用:1次5000单位,每日1次肌注,用量酌情而定。为防止疼痛,可加适量普鲁卡因。局部用*视情而定,可配成溶液制剂(~,微碱性时活性**强)、喷雾剂、粉剂、油膏等,用作体腔内注射、患部注射、喷雾、湿敷、涂搽等。3.治蛇毒:取注射用结晶胰蛋白酶2000单位1~3支,加~(或注射用水)4~20ml稀释,以牙痕为中心,在伤口周围作浸润注射,或在肿胀部位上方作环状封闭1~2次。如病情需要可重复使用。若伤肢肿胀明显,可于注射本品30分钟后,切开伤口排毒减压(严重出血者例外),也可在肿胀部位针刺排毒。如伤口已坏死、溃烂,可用其***胰蛋白酶注意事项1.不可作静注。用前需作划痕试验,应注意可能产生过敏反应。2.吸取注射液后应另换针头,以免注射时疼痛。3.外用时,可采用注射用制剂以缓冲液溶解,但必须在3小时内用毕。胰蛋白酶不良反应:1.注射局部疼痛、硬结。2.本品可引起组胺释放,产生全身反应,有寒战、发热、***、头晕、胸痛、***、皮疹、血管神经性水肿、呼吸困难、眼压升高、白细胞减少等。症状轻时不影响继续***,给予抗组胺*和对症*物即可控制,严重时应即停*。3.本品偶可致过敏性休克。
胰蛋白酶试剂同酶速率法测定。胰蛋白酶操作方法同酶速率法测定。胰蛋白酶正常值(1)RIA法:阴性。(2)酶速率法(37℃):十二指肠液:150~600μg/ml胰蛋白酶化验结果临床意义(1)升高:急性胰腺、慢性胰腺(复发期)、胰腺*、肾功能不全等。(2)降低:胰腺外分泌功能不全(慢性胰腺后期)。胰蛋白酶附注急性胰腺时血清胰蛋白酶可上升至正常人的2~400倍,一般在10~15天**正常。胰蛋白酶相关疾病急性胰腺、慢性胰腺、胰腺*[4]胰蛋白酶生物*品说明胰蛋白酶*理作用胰蛋白酶为肽链内切酶,对精氨酸和赖氨酸肽链具有选择性水解作用,可使天然蛋白、变性蛋白、纤维蛋白和黏蛋白等水解为多肽或氨基酸。由于血清中含有非特异性抑肽酶,故胰蛋白酶不会消化正常**,而能分解黏痰、脓性痰等黏性分泌物,能促进***、化疗*物向病灶渗透。胰蛋白酶适应证1.用于脓胸、血胸、外科症、溃疡、创伤性损伤、娄管等所产生的局部水肿、血肿、脓肿。2.用于呼吸道疾患溶解黏痰和脓性痰。3.用于***毒蛇咬伤,曾试用于竹叶青、银环蛇、眼镜蛇、蝮蛇等毒蛇咬伤的各型病人800余例,均获***。胰蛋白酶禁忌证1.肝肾出血、出血倾向及结核性脓肿患者禁用。2.不可用于急性症及出血空腔中。胰蛋白酶溶液作为细胞分离试剂广泛应用于贴壁细胞的连续培养。
胰蛋白酶**初在牛的胰腺中被发现,现在已经扩展到多种来源,包括哺乳动物(人、牛、猪和狗)、无脊椎动物和微生物等。胰蛋白酶的商业化生产主要依赖哺乳动物的胰腺组织提取或者重组表达提取。直接从哺乳动物胰腺组织中提取的缺点是生产成本高,易造成其他结构相近的蛋白污染。重组表达提取胰蛋白酶可以缩短提取时间、降低生产成本,提取的蛋白纯度高,通过优化重组表达体系可以提高蛋白的表达量,这些优势为其在医疗、食品等行业中的应用提供了更多的可能性。[1]折叠胰酶浓度:常用0.25%胰酶+0.02%EDTA作为消化液。江苏重组胰酶哪家好
胰酶细胞消化液(不含EDTA)消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。重庆重组胰酶哪个好
在253nm的波长处测定吸光度,必要时可用上述底物原液或磷酸盐缓冲液调节,使吸光度在~,作为底物溶液。制成后应在2小时内使用。供试品溶液的制备精密称取本品适量,加~60胰蛋白酶单位的溶液。测定法取底物溶液,加μl,混匀,作为空白。另取供试品溶液200μl,加底物溶液(恒温于℃±℃),立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25℃±℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版*典二部附录ⅣA),在253nm的波长处,每隔30秒钟读取吸光度,共5分钟。以吸光度为纵坐标,时间为横坐标,作图;每30秒钟吸光度的改变应恒定在~,呈线性关系的时间不得少于3分钟。若不符合上述要求,应调整供试品溶液的浓度,再作测定。在上述吸光度对时间的关系图中,取成直线部分的吸光度,按下式计算:式中P为每1mg供试品中含胰蛋白酶的量,单位;A1为直线上终止的吸光度;A2为直线上开始的吸光度;T为A1至A2读数的时间,分;W为测定液中含供试品的量,mg;,吸光度每分钟改变,即相当于1个胰蛋白酶单位。胰蛋白酶制剂注射用胰蛋白酶[3]胰蛋白酶胰蛋白酶的医学检查胰蛋白酶检查名称胰蛋白酶胰蛋白酶分类血液生化检查>酶类测定胰蛋白酶胰蛋白酶的测定原理同酶速率法测定。重庆重组胰酶哪个好
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