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截留 截留有时也称为排阻。水合程度、离子和空间位置效应会导致分子量相近 的分子表现非常不同的截留状态。许多生物大分子在不同的 pH 或离子强 度改变的情况下倾向于聚集或改变构象，因此其有效大小可能比 “天然” 分子大恨多，从而导致排阻增加。比如，有些蛋白质在某些缓冲液条件下 会发生多聚化，而另一些则发生解聚（如血红素蛋白）成亚基。这使选择 合适截留分子量的膜变得复杂。以默克密理博的经验，我们通常推荐选择 为目的分子大小一半的膜作为尝试的优先，再根据实际情况加以调整。益启生物公司的超滤浓缩管种类繁多。杨浦区Merck离心浓缩管代理价

Amicon® Pro纯化超滤管简明操作指南 亲和纯化 用于纯化GST•Tag，His•Tag等重组表达蛋白及抗体，适合～0.5 mL裂解液操作 6次低速离心，总耗时~100分钟（含65分钟孵育时间） 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 外泌体用于细胞学或动物实验前的无菌处理 已经经过上述方法制备的外泌体在进行细胞或动物实验之前还需进行一步除菌过滤，这个时候考虑到得率，应该采用离心法处理，以减少过滤时的外泌体样品损失。 超滤方法纯化具体操作步骤举例 Amicon® Ultra-15 超滤管 (10 kDa MWCO) 用Steriflip®真空抽滤对样品进行澄清[目录号SCGP00525; 0.22 μm Millipore Express PLUS (PES)膜]长宁区默克0.5ml超滤浓缩管咨询问价对于不同的需求我们选择不同的超滤浓缩管系列。

操作模式 常规与切向流 : 常规溶液过滤（NFF）中液体在压力或真空驱动下直接流 过膜。大的颗粒物被膜截留并堆积在膜上，小分子则通过膜流出。NFF 常 用于无菌过滤、澄清预过滤及*** / 蛋白样品制备等。切向流过滤（TFF） 液体流过时与膜表面呈一定角度，被膜阻挡的大颗粒物不会累积在膜表 面，而且还会被切向流从膜表面扫除，因此 TFF 成为按分子大小不同分离 的主流方法。TFF 在大体积样品处理中是主要的操作方法，而现在，TFF 技术被用于 Amicon® Ultra 离心式超滤管的设计中，使小体积样品的浓缩 和分离操作也变得更加方便。

高浓度样品浓缩 Centriprep®超滤管 Centriprep®超滤管是一次性使用的离心管，可以用于2-15mL生物样品的纯化、浓缩、脱盐等过滤应用。这种离心超滤管流速很快，设计紧凑，螺旋盖使用起来非常方便，过滤收集管内置低吸附的Ultracel®再生纤维素膜，装有气密盖。 优点与应用 特有的反向流操作模式，较大的死体积 采用Ultracel®膜，用于浓缩和纯化富含颗粒物 的高浓度样品，样品回收率>90% 配合标准的50mL离心管吊篮式转子使用 从发酵培养基、细胞培养基、细胞裂解液中分 离低分子量溶质益启生物公司专业从事超滤浓缩管代理销售。

脱盐/缓冲液置换并浓缩 5次低速离心，总耗时~35分钟 1. 在上样池中加入0.5 mL TBS-T预湿Amicon® Pro。1,000×g离心1 min。 2. 优化选做：加入1.5 mL用于置换的缓冲液，1,000×g离心1 min。 3. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（有5种截留分子量规格可选）。 4. 加入1.5 mL样品，4,000×g离心15 min进行浓缩。 5. 加入1.5 mL需要置换的缓冲液，4,000×g离心15 min，换液的同时进行浓缩。 6. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收处理好的蛋白。 * 进行较大体积操作时，可以适当延长离心时间，也可参考Amicon® Pro完整操作说明书 查看详细信息。那么超滤浓缩管施工的优势都有哪些呢？徐汇区默克2ml超滤浓缩管

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7次低速离心，总耗时~100分钟（含60分钟孵育时间） 1. 在Amicon® Pro上样池中加入200μL亲和纯化树脂（50%悬浊液）和1.5 mL漂洗缓冲液。 1,000×g离心1 min。 2. 加入0.5 mL样品并与树脂吸打混匀。孵育1 h，其间可温和搅动促进结合。 3. 1,000×g离心1 min 以去除未结合杂质。 4. 加入1.5 mL漂洗缓冲液，1,000×g离心1 min。 5. 上样池下端接上Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管（可选用50k MWCO型号）。 6. 加入1 mL洗脱缓冲液与树脂混匀。4,000×g离心5 min。 7. 加入200μL 中和缓冲液。4,000×g离心15 min。 8. 加上**终需要的缓冲液1.5 mL。4,000×g离心15 min，置换缓冲液的同时进行浓缩。 9. 倒转Amicon® Ultra 0.5 mL超滤管，1,000×g离心回收纯化和浓缩好的蛋白。杨浦区Merck离心浓缩管代理价