昆明无血清细胞冻存液产品介绍
细胞冷冻的原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以比较大限度的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜(DMSO),可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。采用"慢冻快融"的方法能较好地保证细胞存活。在冰袋附近操作时,低温避免保护剂对细胞造成损伤。昆明无血清细胞冻存液产品介绍
细胞冻存液的配制可选用10%的DMSO加上90%的小牛血清,可以现用现配。除了这个方式,还可选择20%的DMSO机上80%的小牛血清,配成两倍的储存液,在使用时细胞悬液和冻存液按照1:1的比例混匀使用,特别的方便。冻存液可直接置于-20摄氏度的环境中保存。使用细胞冻存液需要注意以下几点:1、在使用冻存液前,需要确保细胞冻存液已经完全融化,并要轻轻的混匀。对融化后的细胞冻存液要置于4℃的环境中保存。2、使用冻存液之前应该确保冻存前的细胞生长情况比较良好,比如说细胞需要处于对数生长期,并且冻存的时候存活率大于90%。3、在使用细胞冻存液期间,为了保证可以发挥较佳的效果,建议将细胞冻存在液氮之中,这样可以长时间的进行保存。如果说将细胞置于-80℃的环境下保存,那么保存的时间大约为1年。金华贵阳无血清细胞冻存液无血清细胞冻存液:冻存细胞复苏率在90%以上。
无血清细胞冻存液的优点有哪些呢:很多所使用的传统的细胞冻存液的成份主要是:新鲜的培养基,其中含有10%的胎牛血清和5-10%的DMSO。冻存的方法:将冷冻管置于4℃条件喜爱10分钟,接着在-20℃的条件下30分钟,-80℃的条件下保存16-18个小时(或隔夜保存也可以),较后再液氮的环境中进行长期的储存。需要注意在-20℃的环境下保存不可超过1个小时,主要用以防止冰晶产生过大,造成细胞大量的死亡。对于无血清的细胞冻存液来说,其所含有的成分是:不含血清,含DMSO、pH调节剂、葡萄糖等各种细胞营养成分等。其中不含有动物来源性的蛋白,所以能够减少各类的细菌、霉菌、支原体等带来的污染,而且可以确保冻存细胞的安全。比较通用于各种动物的细胞株。
细胞冻存是将细胞放在低温环境,减少细胞代谢,以便长期储存的一种技术。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,起到了细胞保种的作用。细胞冻存是细胞保存的主要方法之一,利用冻存技术可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。目前现有技术中,细胞冻存液中的主要成分有10%二甲基亚砜(DMSO)、20%~90%胎牛血清(FBS)、剩余组分为完全培养基。培养基以及FBS可为细胞提供必要的营养物质。DMSO是一种渗透性保护剂,能够降低细胞冰点,减少冰晶的形成,从而达到降低细胞损伤的保护效果。但FBS属于动物源性物质,成分比较复杂,在临床应用上存在潜在的风险,也增加了污染的几率,并且由于冻存液中含有动物血清,会导致冻存液的成分存在不稳定的因素。无血清细胞冻存液存储条件:3个月以上没有使用冻存液计划时,尽可能-20℃冷冻保存。
细胞冻存注意事项:1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致炸列。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,但二甲基亚砜(DMSO)对细胞不是完全无毒副作用,在常温下,二甲基亚砜对细胞的毒副作较大,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二甲基亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二甲基亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。无血清细胞冻存液的优势:无血清细胞冻存液是不含血清和动物源成分。昆明无血清细胞冻存液产品介绍
存细胞时需现配冻存液(如购买市面上通用的含血清细胞冻存液。昆明无血清细胞冻存液产品介绍
细胞冻存液是如何保护细胞的:当温度进一步下降,细胞内外都结冰,产生冰晶损伤。但是如果在溶液中加入冷冻保护剂,则可保护细胞免受溶质损伤和冰晶损伤。因为冷冻保护剂容易同溶液中的水分子结合,从而降低冰点,减少冰晶的形成,并且通过其摩尔浓度降低未结冰溶液中电解质的浓度,使细胞免受溶质损伤,细胞得以在较低温条件下保存。在复苏时,一般以很快的速度升温,1-2分钟内即恢复到常温,细胞内外不会重新形成较大的冰晶,也不会暴露在高浓度的电解质溶液中过长的时间,从而无冰晶损伤和溶质损伤产生,冻存的细胞经复苏后仍保持其正常的结构和功能。冷冻保护剂对细胞的冷冻保护效果还与冷冻速率、冷冻温度和复温速率有关。而且不同的冷冻保护剂其冷冻保护效果也不一样。昆明无血清细胞冻存液产品介绍
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