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2015年，随着精细医学概念的提出，越来越多的人开始关注如何能做到疾病的精确诊断和治病。外泌体作为一个新型的研究热点，由于它在体内存在的普遍性和获取的便捷性，已经成为了疾病诊断治病的潜在有效方式，在精细医学发展上有着光明的前景。多泡内体的腔内囊泡，要么分选进溶酶体将物质降解，要么作为外泌体分泌到胞外环境中。将膜分选到不同的腔内囊泡群中的机制尚不清楚。该研究发现物质被分选到内体膜上的不同子域中，并且外泌体相关结构域向内体腔的转移不取决于ESCRT（运输所需的内体分选复合体）的功能，但是需要鞘脂神经酰胺。纯化的外体富含神经酰胺，并且在神经鞘磷脂酶被压制后外泌体释放减少。这些结果确定了内体内膜运输和外泌体形成的途径。外泌体提取：重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。上海外泌体提取试剂推荐厂家

外泌体：已经有研究报道了各种Hh的胞外转运机制，但实际用于体内Hh分泌和转运的途径尚不清楚。该研究显示Hh在果蝇翅膀成虫盘的分泌依赖于运输所需的内体分选复合物（ESCRT）。在体内，产生Hh的细胞中ESCRT活性的降低导致外部细胞表面保留Hh。此外，产生Hh的细胞中的ESCRT活性对于长距离信号传导是必需的。证据表明Hh和ESCRT蛋白质的库在体内一起分泌到细胞外空间中，并且随后可以在受体细胞的表面一起被检测到。这些发现揭示了ESCRT蛋白质在控制形态发生活性中的新功能，揭示了一种新的机制，通过细胞外囊泡在组织中转运分泌的Hh，这是长距离靶向诱导所必需的。广州外泌体提取试剂服务电话外泌体提取：高速离心沉淀外泌体。

外泌体与免疫系统：不同的细胞来源的外泌体，包括免疫细胞(B细胞和树突状细胞)、病细胞、上皮细胞和间充质细胞，释放出带有载体的外泌体，可影响先天免疫系统和适应性免疫系统中受体细胞的增殖和各自的活性。CD4+和CD8+T细胞可直接或间接地受到外泌体的影响，刺激或压制其增殖和功能。外泌体与代谢性和心血管疾病：外泌体可以通过携带miRNA或代谢物分子在代谢性疾病和心血管疾病的发生的发展过程中起作用。体外培养心血管疾病的细胞收集的外泌体与疾病相关的代谢适应有关；体外培养的间充质干细胞和胚胎干细胞的外泌体具有保护心血管的作用。这些发现表明不同来源的外泌体可以通过传递miRNA，蛋白等物质改变受体细胞的代谢状态。外泌体检测作为一种新型的液体活检热点技术已被许多临床科研机构普遍地应用于一些病症和疾病的无创诊断。

外泌体的提取方法：1、磁珠免疫法。外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以普遍普及。2、多聚物沉淀法。聚乙二醇（PEG）为常用的多聚物，可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀，早先应用于从血清等样本中收集病毒，现在也被用来沉淀外泌体，其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。利用PEG沉淀外泌体存在不少问题：比如纯度和回收率低，杂蛋白较多（假阳性），颗粒大小不均一，产生难以去除的聚合物，机械力或者吐温-20等化学添加物将会破坏外泌体等色谱法。这种方法分离到的外泌体在电镜下大小均一，但是需要特殊的设备，应用不普遍。

外泌体(Exosome)是由细胞分泌而来的微小囊泡，直径约为30-200nm，密度在1.13-1.21g/ml，具有杯状形态、双层膜结构，天然存在于血液、尿液、唾液、母乳和细胞培养基等生物体液中。包括瘤细胞在内几乎所有类型的细胞（免疫细胞、神经细胞、干细胞)，都可以产生并释放exosome。Exosome内含有与细胞来源相关的蛋白质rRNA和microRNA，Exosome可通过细胞膜受体直接受体细胞，也可运输蛋白质、mRNA、miRNA、lncRNA、circRNA，甚至细胞器进入受体细胞，参与细胞间通讯。Exosome在免疫应答、炎症反应、血管生成、凋亡、凝血和废物处理等生理过程发挥关键作用，不同细胞来源的exosome所含有的RNA和蛋白成分不尽相同，可作为多种疾病的早期诊断标记物，也能作为靶向药物的载体进行疾病。miRNA是一类22nt左右大小的非编码分子，它可以通过外泌体从一个地方转运到另外一个地方行使基因沉默功能。通过检测外泌体中miRNA表达变化，可以发现外泌体中miRNA特异性功能。首先在无菌条件下提取人体体液，并用PBS缓冲液进行稀释。郑州外泌体提取试剂

外泌体提取：回收率不稳定（可能与转子类型有关），纯度也受到质疑。上海外泌体提取试剂推荐厂家

外泌体的提取方法：1.超速离心法（差速离心）。超离法是较常用的外泌体纯化手段，采用低速离心、高速离心交替进行，可分离到大小相近的囊泡颗粒。超离法因操作简单，获得的囊泡数量较多而广受欢迎，但过程比较费时，且回收率不稳定（可能与转子类型有关），纯度也受到质疑；此外，重复离心操作还有可能对囊泡造成损害，从而降低其质量。2.密度梯度离心。在超速离心力作用下，使蔗糖溶液形成从低到高连续分布的密度阶层，是一种区带分离法。通过密度梯度离心，样品中的外泌体将在1.13-1.19g/ml的密度范围富集。此法获得的外泌体纯度较高，但步骤繁琐，耗时，对离心时间极为敏感。上海外泌体提取试剂推荐厂家