实验室斑马鱼系统
当各种内源性和外源性DNA损害因子诱发细胞DNA链断裂时,其超螺旋结构受到破坏,在细胞裂解液作用下,细胞膜、核膜等膜结构受到破坏,细胞内的蛋白质、RNA以及其他成分均扩散到细胞裂解液中,而核DNA因为分子量太大只能留在原位。在中性条件下,DNA可进入凝胶发生搬迁,而在碱性电解质的作用下,DNA发生解螺旋,损害的DNA断链及片段被释放出来。因为这些DNA的分子量小且碱变性为单链,所以在电泳过程中带负电荷的DNA会离开核DNA向正极搬迁构成“彗星”状图像,而未受损害的DNA部分保持球形。DNA受损越严重,发生的断链和断片越多,长度也越小,在相同的电泳条件下搬迁的DNA量就愈多,搬迁的距离就愈长。通过测定DNA搬迁部分的光密度或搬迁长度就可以测定单个细胞DNA损害程度,然后确认受试物的作用剂量与DNA损害效应的联系。彗星试验检测低浓度基因毒物具有高灵敏性,研究的细胞不需处于有丝分裂期。一起,这种技术只需要少数细胞。斑马鱼试验步骤有哪些?实验室斑马鱼系统
令人惊奇的是,这种生活在热带的鱼还可以“再造”被部分切除的组织,从而为从事修正受损脊髓的研讨人员打开了方便之门。现在,斑马鱼的使用正逐渐拓宽和深化到生命体的多种系统的发育、功用和疾病的研讨中,并用于遗传学、药物学、毒理学等诸多方面。在药品研发等方面,每年有很多新药进入临床或者临床前阶段,它们是否对人体有害需要进行科学的安全点评。“实验新星”斑马鱼再次担当重担,斑马鱼胚胎和幼鱼对有害物质十分敏感,同时用药简单,只需将药物放入养殖胚胎的水中或快速打针,用药量少、测验周期短。斑马鱼房设备斑马鱼有着较高的颜值,而且研讨价值也是十分的高。
报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。
而且通常斑马鱼产卵数量大,测试的样本数很多,这样一来,可以确保统计学意义上显赫性与数据的可靠性。同时,早期的安全评价还可以评估药物对多种组织的伤害程度。因此,可用于测试潜在药物对生物体的毒性评估。此外,科学家们还发现,斑马鱼也是检测水污染程度的优良物种,因为转基因斑马鱼可以根据污染物浓度的变化而发出可看到的荧光。随着研究的深入,斑马鱼在人类科学史上的地位已不可撼动,这位实验动物中的新星将和那些推动人类进步的科学家们一道永载史册。斑马鱼的遗传学研究实验。
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和其它动物模型相比较斑马鱼优势。实验室斑马鱼系统
斑马鱼作为模式生物的优势1、斑马鱼与哺乳动物生物结构与生理功能高度相似,实验结果可比性强。2、斑马鱼与人类基因同源性高达85%,信号传导通路基本近似。3、斑马鱼幼鱼通体透明,可直接观察多个组织和。4、实验周期短,通常实验1-5天能够完成。5、实验费用低,为鼠类实验费用的1/10到1/100。6、体积小,易观察,可实现高通量、高内涵及自动化分析。7、繁殖能力强,每对斑马鱼一次可产150-300枚,单组实验样本数量多。8、实验所需样品量小,毫克级样品即可完成实验。9、符合3R(替代、减少、优化)原则。10、获得欧美监管部门和跨国药食企业认可。实验室斑马鱼系统
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