斑马鱼分子生物学检测

时间:2023年07月23日 来源:

斑马鱼血管生成基因如血管内皮细胞生长因子(VEGF)、an-iopoietins、ephrions及相应受体与哺乳动物功能相似,而且斑马鱼血管系统及其对调节血管新生类药物的***反应与哺乳动物类似。另外斑马鱼胚胎在血液循环系统严重缺陷的情况下仍能存活,且胚胎透明,利用血管转基因荧光斑马鱼可以在24小时以内就定量评价药物的血管形成***作用。

与传统的鸡胚尿囊膜、小鼠角膜实验相比,斑马鱼更加便捷、快速、高效,而且结果定量分析的准确度更高。

目前多个出于临床试验阶段的抗血管生成靶向候选***药如SU5416、SU6668、TNP470、SU4312和AG1478等均对斑马鱼的血管形成有***的***效果。用斑马鱼筛选发现具有血管形成***活性的中***体化合物也有很多,如靛玉红、呋喃二烯等。 斑马鱼实验的优点有哪些?斑马鱼分子生物学检测

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斑马鱼在细胞谱系分析中的应用斑马鱼是研究新的疾病治疗方法的重要工具,因为疾病相关基因的发现能够鉴定基因特异***物靶标。通过突变斑马鱼胚胎中的特定基因,可以在发育过程中分析突变体并用于鉴定疾病相关基因。然后可以将所得的观察结果外推至人类基因组,以查看相同的突变基因是否是导致特定人类遗传疾病的原因。总的来说,斑马鱼作为动物模型特别有用,因为它们的成本低,繁殖时间短,并且与人类相对相似。所以研究中很受欢迎的动物模型之一是斑马鱼,一种原产于亚洲稻田的热带鱼。斑马鱼实验室安装成本杭州斑马鱼实验动物模型。

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报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。

Novelobjecttest:每条鱼别离转入透明实验池(25×20×15cm,长×宽×高);每个容器包含一个新目标(蓝色塑料立方体,3×3×1cm,长×宽×高),以确定其对新颖性的呼应(图3a)。温热水(25±1°C,pH7.2-7.6,硬度44.0-61.0mgCaCO3/L)置于测试槽中使水深到达10厘米。经过5分钟的习惯期后,将新目标放置在鱼缸的一角,让鱼自在探究8分钟。6分钟记载他们的行为轨道。为了便于剖析,实验池实际上分为两部分(新目标区和无目标区)(图3a)。咱们剖析了在虚拟切割的水槽两部分所走过的总距离(cm)和所花费的时刻(s)。 试验室揭秘|斑马鱼试验室!

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保持首先,斑马鱼非常强壮,易于维护。由于它们是在池塘中自然发现的,它们的理想条件可以很容易地复制。他们也很便宜;然而,它们确实需要比其他模型生物如苍蝇更多的空间。这种模式也是脊椎动物,这使它优于其他模式。生殖斑马鱼的繁殖力非常高,每周产数百个卵。他们也有很短的生成时间,这意味着科学家有一个永无止境的供应这种模式。这缩短了整个实验过程,并且在突变体生产中特别有用。另一个优点是斑马鱼卵是从外部发育的,科学家可以很容易地研究它们**初的发育过程。这是一个优于其他模型,如小鼠,发展内部,因此阻碍视觉调查。传统的免疫学模式生物相比便于开展大规模研究。斑马鱼模式生物应用

斑马鱼实验的优点是什么。斑马鱼分子生物学检测

【试验计划】咱们将受测试斑马鱼分成两组,分别是正常对照和服用/打针供试品组(供试品经过溶解到养鱼用水中或打针的方法摄入到斑马鱼体内)。服用/打针药物一段时间后,检测尾长、彗星长、尾矩和Olive尾矩。能够看到,服用/打针供试品组斑马鱼细胞核呈现拖尾。该供试品改变DNA链的负超螺旋结构、空间构象,使DNA链断裂、形成类核,终究导致细胞逝世(坏死、凋亡或自体吞噬)。【点评结论】1.经过每组30尾斑马鱼的比照试验,服用/打针供试品组的斑马鱼细胞核呈现显着拖尾,与正常对照组存在显着的差别。2.本试验证明了该供试品对斑马鱼有基因毒性。斑马鱼分子生物学检测

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