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12000rpm离心1分钟；倒弃收集管中废液，加入500 ul漂洗液，12000rpm离心1分钟；倒弃收集管中废液，加入500 ul漂洗液，12000rpm离心1分钟；倒弃收集管中废液，12000rpm离心3分钟，将离心柱转移至新的离心管中，70℃加热3分钟；加入20 ul洗脱液，70℃加热3分钟；12000rpm离心1分钟，丢弃离心柱，离心管中液体即为DNA溶液。 2）PCR扩增及电泳 PCR扩增使用Identifiler Plus试剂盒，10 μl扩增体系中含4 μl master mix、2 μl primer set、4 μl模板，扩增程序为，95℃，11分钟；94℃，20 秒，59℃，3分钟，30个循环；60℃，10分钟；4℃保存；电泳在ABI 3500XL仪器中进行；电泳上样体系为，1 μl PCR产物，9 μl甲酰胺，其中已加Liz。 实施例4 以石英膜提取土壤尿液DNA 1）DNA提取 刮取含有尿液的表层土壤，烘干，普陀区土壤微生物DNA土壤DNA提取联系电话买土壤DNA提取哪家专业？

调节样本的含水量等因素来优化裂解条件·裂解不充分：增加物理破碎的时间和次数。·检查洗涤液中是否加入乙醇。·洗脱不充分：建议二次洗脱增加产量或提高洗脱体积。问题3：提取的DNA无法扩增怎么办？解决思路：· 检测DNA的浓度：过量的DNA模板也会抑制PCR反应。·样本DNA稀释之后可以扩增：样本中的腐殖酸等抑制物含量高。·确定PCR反应条件是否已优化：退火温度，时间，引物等等。·非特异条带：洗脱液中目的DNA的丰度可能比较低

实验的时候，有没有遇到过实验结果不符合预期的情况，提取DNA的纯度过低、浓度达不到预期或者是出现弥散现象。***给大家聊一聊一下其他同学遇到的问题，以及MP技术人员给出的解决方案，希望可以帮到大家，在以后的实验中顺顺利利~问题1：土壤样品含水量过高怎么办？解决思路：· 如果土壤样品过湿，可先将样本10，000 x g，离心30s，尽可能多的去除液体。问题2：DNA产量低怎么办？解决思路：· 样本微生物含量低：【1】增加样本量【2】土壤DNA提取助力药物研发。

入RAase消化。问题7：A260/A230比值低怎么办？解决思路：·A230是多肽、芳香基团、苯酚和一些碳氢化合物的吸光度，A230高表示样品中存在一些污染物。【1】蛋白去除不干净：增加蛋白沉淀离心的次数。【2】杂质去除不干净：洗脱之前，核酸吸附柱中尽可能不要残留液体，可增加空离心次数和时间。问题8：提取的DNA出现降解怎么办？解决思路：·优化裂解条件，避免过度裂解，降低物理破碎的力度·操作过程中是否有污染DAase，造成DNA降解上海益启生物公司的土壤DNA提取附带使用说明书吗？徐汇区土壤DNA提取土壤DNA提取销售

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NA Kit for Soil或FastDNA Spin Kit for Soil，按照土壤试剂盒提取protocol进行。有效裂解：采用介质E，介质E中研磨珠与菌体大小，可以有效裂解各种菌体细胞。去杂提纯：试剂根据微生物DNA提取而优化设计，裂解液、杂质去除剂及漂洗液能够针对菌体特性很好的去除影响DNA纯化及下游实验的抑制剂，能够提取更多的微生物DNA。省时简便：柱膜法提取操作简单省时。·很硬或韧性的样本，可以单独用介质A（1169**050）代替土壤试剂盒中的介质E来裂松江区FastDNA Spin Kit For Soil土壤DNA提取一级代理