自动培养基制备器安装调试

培养基的实验室制备：①概述：培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如，含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感，应在煮沸后快速冷却，避光保存。同样，一些试剂则不需要灭菌，直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明）。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL，要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注：大容量培养基（＞1000mL）灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却，防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基（如含亮绿的培养基）是非常重要的。培养基制备器注意不要过度干燥。商品化的平板琼脂培养基应按照厂商提供的说明使用。自动培养基制备器安装调试

在制备培养基时，通常要考虑以下因素：(1)pH值多数细胞系在pH=7.4下生长得很好。尽管各细胞株之间细胞生长*pH值变化很小，但一些正常的成纤维细胞系以pH=7.4～7.7，转化细胞以pH=7.0～7.4更合适。据报道，上皮细胞以pH=5.5合适。为确定*佳pH值，做一个简单的生长实验或特殊功能分析酚红常用作指示剂，pH=7.4呈红色，pH=7.0变橙色，pH=6.5变黄色，而pH=7.6呈红色中略带蓝色，pH=7.8呈紫色。由于对颜色的观察有很大的主观性，因而必须用无菌平衡盐溶液和同样浓度的酚红配一套标准样，放在与制备培养基相同的瓶子中。(2)缓冲能力碳算盐缓冲系统由于毒性小、成本低、对培养物有营养作用，因此比其他缓冲系统用得多。在pH值条件下的缓冲能力差。(3)渗透压多数培养细胞对渗透压有很宽的耐受范围，一般常用冰点降低或蒸汽压升高测定。如果自己配培养基，可通过测定渗透压防止称量和稀释等造成的误差。自动培养基制备器安装调试全自动培养基制备仪主要特点：灭菌-加热-搅拌-混合-冷却一体化控制。

培养基制备器：主要应用于液体培养基及微生物培养基的培养基制备器。高效的加热和冷却，良好的加热元件能确保快速加热。培养基容器外壁的水循环能保证快速冷却。通过热交换器不断地将热的去离子水冷却。总循环时间为60至120分钟，包括加热、灭菌和冷却，具体时间取决于容器的大小，培养基的量和冷却水的温度。无菌过滤的支持压力可以防止培养基发泡或溢沸。触摸屏技术，新使灭菌器操作起来有了更多的选择，增加了灵活性。加塞后，将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道线绳或橡皮筋扎好，用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。

培养基的制备：（1）称量：根据培养基的配方,称取适量药品于搪瓷杯中;（2）溶解：用量筒量取所需水量,置电炉上加热,一边搅拌,至完全溶解,加热至沸腾,拔掉电源,待冷却;（3）分装：根据不同需要,立即趁热分装入三角瓶或试管中,分装三角瓶以不超过三角瓶一半为宜,分装试管一般为管长的1/5（需根据试管的大小而定）.液体培养基如乳糖胆盐发酵培养基约分装10毫升左右.（4）塞硅胶塞：装好培养基的试管应塞上硅胶塞,松紧合适,紧贴管壁,不留缝隙,约1/2塞入内,这样即可过滤空气,避免杂菌侵入,又可减缓培养基水分的蒸发.（5）包装：三角瓶棉塞头部应用锡箔纸包扎,试管集中于试管篓.2、无菌水的制备：（1）用10ml移液管量取9.2ml蒸馏水（稀释水）装入试管中.（2）用100ml量筒量取95ml蒸馏水（稀释水）装入150ml的三角瓶中.可置少许玻璃珠于三角瓶内,防止暴沸.（3）量取240ml蒸馏水（稀释水）于250ml的三角瓶中,塞上瓶塞用牛皮纸包扎好,高压灭菌备用。培养基制备器通过分装口可以定量添加无菌添加剂。

加棉塞：分装完毕后，需要用棉塞堵住管口或瓶口。堵棉塞的主要目的是过滤空气，避免污染。棉塞应采用普通新鲜、干燥的棉花制作，不要用脱脂棉，以免因脱脂棉吸水使棉塞无法使用。制作棉塞时，要根据棉塞大小将棉花铺展成适当厚度，揪取手掌心大小一块，铺在左手拇指与食指圈成的圆孔中，用右手食指插入棉花中部，同时左手食指与姆指稍稍紧握，就会形成1个长棒形的棉塞。棉塞作成后，应迅速塞入管口或瓶口中，棉塞应紧贴内壁不留缝隙，以防空气中微生物沿皱折侵入。棉塞不要过紧过松，塞好后,，以手提棉塞、管、瓶不下落为合适。棉塞的2/3应在管内或瓶内，上端露出少许棉花便于拔取。塞好棉塞的试管和锥形瓶应盖上厚纸用绳捆札，准备灭菌。组合培养基是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。湖北培养基制备器安装调试

培养基制备器培养基分装机**系统，程度上方便用户的使用。自动培养基制备器安装调试

培养基配置原则：控制pH条件，当培养基中酸性物质积累导致H+浓度增加时，H+与弱碱性盐结合形成弱酸性化合物，培养基pH不会过度降低；如果培养基中OH-浓度增加，OH-则与弱酸性盐结合形成弱碱性化合物，培养基pH也不会过度升高。但KH2PO4和K2HPO4缓冲系统只能在一定的pH范围内（6.4-7.2）起调节作用。有些微生物，如乳酸菌能大量产酸，上述缓冲系统就难以起到缓冲作用，此时可在培养基中添加难溶的碳酸盐（如CaCO3）来进行调节，CaCO3难溶于水，不会使培养基pH过度升高，但它可以不断中和微生物产生的酸，同时释放出CO2，将培养基pH控制在一定范围内。在培养基中还存在一些天然的缓冲系统，如氨基酸、肽、蛋白质都属于两性电解质，也可起到缓冲剂的作用。自动培养基制备器安装调试

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