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由于光学相干断层扫描采用了波长很短的光波作为探测手段,在体光纤成像记录它可以达到很高的分辨率。首先将一束光波照在组织上,一小部分光被样品表面反射,然后被收集起来。大部分的光线被样品散射掉了,这些散射光失去了远视的方向信息,因此无法形成图像,只能形成耀斑。散射光形成的耀斑会引起光学散射物质(如生物组织、蜡、特定种类的塑料等等)看起来不透明或者透明,尽管他们并不是强烈吸收光的材料。采用光学相干断层扫描技术,散射光可以被滤除,因此可以消除耀斑的影响。即使单单有非常微小的反射光,也可以被采用显微镜的光学相干断层扫描设备检测到并形成图像。在体光纤成像记录几乎不会对组织造成伤害。东莞神经元神经元活动记录技术网站
在体光纤成像记录是基于多模光纤的微弱荧光信号检测和记录系统,该系统能够长时间稳定的激发荧光,并检测荧光信号的微弱变化。用于在体记录动物群体神经元活动钙信号的动态变化,在脑功能研究中具有较多的用途,其具体特点和应用如下:1、仪器高度集成化,只需一台仪器,配合光纤记录系统电脑端软件则可以进行实时的记录及数据分析,实验简单便捷,实验前无需调试设备;2、仪器稳定性及可移动性强,较高有4通道版本,可同时记录4只动物或一只动物4个位点。较高采样率达20000 HZ,信噪比高。3、所有传输光路通过光纤耦合,具有很强的抗干扰能力,同时不受外界光纤干扰。东莞神经元神经元活动记录技术网站在体光纤成像记录的工作原理是将光源入射的光束经由光纤送入调制器。
小动物在体光纤成像记录图像处理软件除了提供含有光子强度标尺的成像图片外,还能计算分析发光面积、总光子数、光子强度的相关参数供实验者参考。原则上,如预实验时拍摄出图片非特异性杂点多,需降低曝光时间;反之,如信号过弱可适当延长曝光时间。但曝光时间的延长,不单增加了目的信号,对于背景噪音也存在一个放大效应。同一批实验应保持一致的曝光时间,同时还应保持标本相对位置和形态的一致,从而减少实验误差。进行荧光成像时,实验者可选择背景荧光低不容易反光的黑纸放在动物标本身下,减少金属载物台的反射干扰。
在体光纤成像记录和传统的体外成像或细胞培养相比有着明显优点。首先,在体光纤成像记录能够反映细胞或基因表达的空间和时间分布,从而了解活的物体动物体内的相关生物学过程、特异性基因功能和相互作用。由于可以对同一个研究个体进行长时间反复查看成像,既可以进步数据的可比性,避免个体差异对试验结果的可影响,又不需要杀死模式动物,节省了大笔科研用度。第三,尤其在药物开发方面,在体光纤成像记录更是具有划时代的意义。根据统计结果,由于进进临床研究的药物中大部分由于安全题目而终止,导致了在临床研究中大量的资金浪费。在体光纤成像记录需要许多数据点。
在体光纤成像记录的目的是实时检测细胞的活性变化。基于钙离子浓度变化的荧光成像技术被较多用来记录神经元活性。在体光纤记录方法与传统的在体电生理记录方法有着不同的特点,光纤记录因其稳定、方便、易上手而应用较多。首先,将荧光蛋白表达在特定类型的神经元中,光纤记录可以实现细胞类型特异性的活性检测,而用电生理记录的方法记录特定类型的神经元的活性比较困难。其次,电生理记录容易受到环境中的电信号以及动物的行为动作影响,而光纤记录相对来说有着较强的抗干扰性能。然后,光纤记录相对稳定,可以很容易实现长时程的活性检测,例如动物的整个学习过程,而利用电生理记录实现起来则相对困难。较后,光纤记录用神经元群体的荧光强度变化来表征神经元整体的活性变化,不能反映单个神经元的活性,而电生理记录则能够检测到单个神经元的活性,具有更高的空间分辨率。在体光纤成像记录为一项新兴的分子、 基因表达的分析 检测技术。东莞神经元神经元活动记录技术网站
在体光纤成像记录高功率的激光放大器和那些依赖于融合多个相同性质。东莞神经元神经元活动记录技术网站
在体光纤成像记录相干断层扫描的局限性是单能扫描生物组织表面下1-2毫米的深度。这是由于深度越大,光线无散射的射出表面的比例就越小,以至于无法检测到。但是在检测过程中不需要样品制备过程,成像过程也不需要接触被成像的组织。更重要的是,设备产生的激光是对人眼安全的近红外线,因此几乎不会对组织造成伤害。使用光学反向散射或后向反射的测量成像组织的内部横截面微结构,像在体外在人的视网膜上,并在一个其他的病因斑块在透明,弱散射介质和不透明的。东莞神经元神经元活动记录技术网站
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