高效率PEI转染试剂试用装可高效转染多种类型细胞

材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI（聚乙烯亚胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI储存液（100μM）：称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS（pH7.4）：将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水，加入20ml1M的HEPES，调pH值到7.4，定容至1L，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。更多关于PEI转染试剂相关产品技术问题，欢迎咨询上海曼博生物。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！想购买24765-1在哪里可以买？高效率PEI转染试剂试用装可高效转染多种类型细胞

瞬时转染方法1.接种细胞：转染前，用胶原酶消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，总体积如表1所示，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用2-5μL线性PEI转染试剂。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如Falcon5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染3h后，添加?体积的包含30%血清的生长培养基。4.孵育细胞和分析结果：在CO2培养箱中37℃下孵育细胞至可以分析检测。转染后快7h即可检测到转入基因的表达。请自行确定检测时间。更多关于Polysciences PEI相关内容欢迎咨询上海曼博生物！PEI MAXPEI转染试剂试用装提供了一个低成本的初体验选择PEI转染试剂和其他转染试剂相比有什么优势？

PEIMAX粉末配置方法：1)将1gPEIMAX40K放入盛有900mL水的玻璃烧杯中；2)放入搅拌转子，放置于磁力搅拌器上，设置搅拌程序以形成一个较小的漩涡；3)等待PEIMAX40K完全溶解，通常需要5分钟左右；4)用25mL塑料移液管加入1N氢氧化钠滴定至pH6.9~7.1；5)如果不小心超过7.1，则使用1N的盐酸和新的塑料移液管将pH重新滴定至6.9~7.1；6)将溶液转移到1L玻璃量筒中，加入水定容至1L；7)用无菌真空过滤膜过滤配制的转染试剂溶液；8)按需分装，4°C储存（切记不可冷冻）；注：未经配制的粉末有效期为2年。配置成液体后分装在合适的瓶子中，并且保存在4℃的转染试剂将可在6个月之内保持性能。如jin用于蛋白定性研究，分装的转染试剂可延长有效使用期至1年。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！

材料：质粒DNA指数生长的真核细胞PEI（聚乙烯亚胺）1×HBS（pH7.4）配方：PEI储存液（100μM）：称取125mgPEI粉末溶解于50ml1×HBS（pH7.4）中，0.2μm滤膜过滤，储存于4℃备用。1×HBS（pH7.4）：将8.76gNaCl溶解于900ml超纯水，加入20ml1M的HEPES，调pH值到7.4，定容至1L，过滤（0.2μm滤膜）后储存于4℃备用。方法：1．细胞分盘：通过胰酶消化收集细胞，用适当的完全培养基以4×105至8×105细胞/cm2的密度平铺细胞于60mm组织培养皿上（根据实验需要选择培养皿，使细胞贴壁后所占总面积达到培养皿面积的70-90％）。根据细胞贴壁情况于含5％CO2的37℃温箱中孵育8-24h,当细胞贴壁完全后即可开始转染。转染前换入2mL预热的无血清培养基。如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！​PEI转染试剂是带正电的阳离子聚合物与核酸中带负电的磷酸基团形成带正电的复合物后，通过胞吞进入细胞。

接种细胞：转染前，用胶原酶（WORTHINGTONG公司LS004196)消化细胞并计数（不建议用胰酶）。调整细胞浓度，将细胞铺入细胞培养的器皿，每个孔置入的细胞量应能使转染时细胞汇合度达到70~80%。2.准备DNA-PEI复合物：DNA、PEI试剂和稀释剂在进行以下步骤前需先使其升至室温。依据表1所示，用Opti-MEMITM（Invitrogen）或其他适合的无蛋白培养基稀释适量DNA。用同样的培养基稀释PEI试剂。每1μgDNA需用1.5-5μL线性PEI转染试剂(这个需要客户自行摸索配比，每一批转染试剂和每一批DNA比例可能会稍有不同）。一边轻轻涡旋装有DNA溶液的试管，一边将稀释的线性PEI转染试剂滴加至试管中（注意：请勿颠倒添加顺序）。充分混匀后，室温静置10~25min以形成DNA-PEI复合物。当溶液体积较大时，请用圆底聚丙烯管，例如NEST5mL/14mL离心管。3.转染细胞：直接向每个孔中加入DNA-PEI复合物并轻轻涡旋培养板/培养皿。在无血清条件下转染时，去除生长培养基，替换成无血清培养基，然后滴DNA-PEI复合物。转染1.5h后，添加½体积的包含30%血清的生长培养基。更多PEI相关产品信息，欢迎咨询上海曼博生物！如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！有哪些不错的PEI转染试剂品牌？云南PEI转染试剂试用装操作说明清晰

哪个品牌的PEI转染试剂质量好？高效率PEI转染试剂试用装可高效转染多种类型细胞

PEI在于可以应用于体内试验。当初试验经费很有限，被逼无奈只能放弃脂质体2000，选择PEI，以至于相当长的时间内，转染试验都不顺利。下面是几点关于PEI转染的注意要点：1.PEI的使用量可以参照脂质体2000的说明书，所用质粒尽量去内2.转染时，一定要把PEI+DMEM加入到质粒+DMEM中，顺序不可错，轻微混匀，静止20min3.转染后4小时，一定要换液！换含有FBS的完全培养液！因为PEI对细胞毒性太大4.如果后续试验涉及到稳定筛选，建议把血清浓度适当提高。PS：事实证明，PEI是可行的，已经做出稳定细胞系了。更多关于PEI转染试剂相关的信息，可咨询上海曼博生物医药科技有限公司！如想申请PEI试用装，请关注我们的公众号：Mine-bio，回复关键词“PEI申请”，即可参加！高效率PEI转染试剂试用装可高效转染多种类型细胞