EndoC-BH5糖尿病细胞模型操作指南

Human Cell Design 根据法国生物伦理立法收集人类胎儿组织，获得法国生物医学局（巴黎）的批准，批准号为 PFS08-005。糖尿病细胞模型应用概括如下：细胞因子介导的糖尿病炎症反应（一/二型糖尿病）：胰岛β细胞保护机制研究，胰岛β细胞炎症反应研究，诱导胰岛β细胞炎症反应化合物筛选；T 细胞介导的胰岛细胞杀伤实验（一型糖尿病）：胰岛β细胞保护机制研究，T 细胞抑制机制，β细胞和 T 细胞作用机制研究。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。通过多轮次优化改良，获得的功能胰腺B细胞，无限接近天然人源胰岛B细胞，其胰岛素分泌功能与天然细胞类似，基于PDX1/NKX6.1关键基因验证的细胞均一性达到90%以上（左图），在2.8 mM and 11 mM葡萄糖剂量下表现出10倍的胰岛素分泌反应（右图），对GLP-1R激动剂， Exendin4刺激产生明细那反馈， 且可实现批量化生成，实现稳定供应。EndoC-BH5 细胞具有加速糖尿病研究的巨大潜力。EndoC-BH5糖尿病细胞模型操作指南

Human cell design成立于 2001年，总部位于法国，专注于人源细胞模型开发，以助力科研和生物医药企业的发展。其中可作为糖尿病细胞模型的EndoC-BH5,EndoC-BH3,EndoC-BH1等人源胰岛B细胞为其优势产品，这些人源胰岛B细胞诱导产生的胰岛素接近于天然胰岛细胞分泌的胰岛素量。人源胰岛B细胞模型构建技术性文章早期发表于2011年,相关文章总引用量达到600+,人源胰岛B细胞模型已经被全球200多家生物医药和生命科研机构作为糖尿病细胞模型使用。商业可用糖尿病细胞模型胰腺B细胞基因特异性表达EndoC-B h1是一种永生细胞系，可进行反复的复苏冻融，有效节约成本。

Humancelldesign开发了创新且安全的人类β细胞系生产方法。首先，将每个转导的人类胎儿胰腺芽移植到2或3只SCID小鼠的肾被膜下，因为该部位是人类胰腺发育的允许部位。在6到8个月内，所有移植的小鼠都发生了原发性胰岛素瘤，这导致它们的血糖水平下降。与其他胰腺移植相比，原发性胰岛素瘤是高度血管化的。然后将原发性胰岛素瘤中这些高度血管化的区域分离，用在大鼠胰岛素启动子控制下表达hTERT的慢病毒进行转导，并移植到其他SCID小鼠中。这些小鼠在2至3个月内出现低血糖，胰岛素阳性细胞大量扩增。这种体内扩增有助于维持大量增殖的胰岛素细胞，并允许定义允许的培养条件，在这种条件下，可以在体外建立永生化细胞系。

EndoC-βH1使用慢病毒介导的基因转移从人类胎儿胰腺中产生功能性β细胞，这些胰腺处于发育的早期阶段，即9至11周，这段时间与β细胞分化的开始相吻合(33)。整合的转基因SV40LT受大鼠胰岛素启动子控制，在胰岛素阳性细胞中特异性表达。通过使用这种靶向方法，SV40LT在新形成的β细胞中表达，同时这些细胞头次产生胰岛素。因此，我们成功地模仿了用于产生功能性啮齿动物β细胞系的转基因方法(7,8,34)，用于从人胎儿胰腺中开发功能性人β细胞系。糖尿病细胞模型安全创新，已经进行了流氏分析和免疫荧光分析、RNA-seq等功能验证。

EndoC-βH5,GLTxEndoC-βH5,HLA-A2EndoC-βH5等细胞可在体外在葡萄糖剂量刺激下产生正常的胰岛素分泌反应，对GLP-1R/GLP-1等胰岛素刺激因子产生正常响应，可以响应细胞因子刺激，表达HLA-A2等T细胞受体，因此可用于糖尿病炎症相关等多种药物开发实验。EndoC-BH5细胞可批量稳定生产，因此可以进行基于siRNA的高通量筛选研究中，用于鉴定出潜在的2型糖尿病药物靶点。另外，Humancelldesign根据法国生物伦理立法收集人类胎儿组织，获得法国生物医学局（巴黎）的批准，批准号为PFS08-005。全世界有超过 5 亿成年人患有糖尿病，糖尿病细胞模型可用于研究胰腺内分泌细胞功能、糖尿病机制和研究策略。云南糖尿病细胞模型无菌环境操作

糖尿病细胞模型人源胰岛B细胞已经进行了功能性验证。EndoC-BH5糖尿病细胞模型操作指南

HumanCellDesign在人源胰岛β细胞模型的研发中不断突破，致力于提供更高效、更可靠的细胞工具。通过多年的研究和实验，HCD的科学家们成功地开发出了一系列高质量的细胞模型，这些模型在糖尿病研究中表现出优异的功能性和稳定性。这些细胞不仅能够模拟天然胰岛β细胞的胰岛素分泌功能，还能够在实验室环境中稳定生长和繁殖，为研究人员提供了宝贵的研究资源。作为一个开创性的生物技术公司，HumanCellDesign已经走在了人源细胞模型研发的前沿。通过其独特的细胞工程技术，HCD能够生成高度均一、功能性强的人源胰岛β细胞。这些细胞不仅能够在实验室环境中大量生产，还能稳定表达各种重要的胰岛细胞标记物。这些细胞模型广泛应用于糖尿病研究中，从基础研究到药物筛选，HCD的细胞系都发挥了重要作用，为科学家们提供了宝贵的研究工具。EndoC-BH5糖尿病细胞模型操作指南