EndoC-BH2糖尿病细胞模型细胞复苏

EndoC-βH1使用慢病毒介导的基因转移从人类胎儿胰腺中产生功能性β细胞，这些胰腺处于发育的早期阶段，即9至11周，这段时间与β细胞分化的开始相吻合(33)。整合的转基因SV40LT受大鼠胰岛素启动子控制，在胰岛素阳性细胞中特异性表达。通过使用这种靶向方法，SV40LT在新形成的β细胞中表达，同时这些细胞头次产生胰岛素。因此，我们成功地模仿了用于产生功能性啮齿动物β细胞系的转基因方法(7,8,34)，用于从人胎儿胰腺中开发功能性人β细胞系。表达 EndoC-BH5 的 HLA-A2 重新利用抗yan药物或发现 I 类抗原肽加工和呈递的抑制剂,其细胞因子反应与原发性类似。EndoC-BH2糖尿病细胞模型细胞复苏

根据啮齿动物β细胞获得的数据，葡萄糖转运蛋白SLC2A2被认为是葡萄糖感知的主要决定因素，而后来的研究表明，葡萄糖激酶(GLK)是主要决定因素。在人类β细胞中，GLK被认为是葡萄糖感知的主要决定因素。为了克服这些限制，在HumanCellDesign中生成了新的β细胞系。EndoC-βH1是通过将表达SV40LT的慢病毒载体转导到人类胎儿胰腺芽中来开发的。随后将转导的芽移植到SCID小鼠体内，生成的表达SV40LT的细胞增殖并形成胰岛素瘤。人源胰岛B细胞模型对于与胰岛相关的代谢疾病研究，包括糖尿病，糖尿病炎症， 针对GLP-1R的Exendin4等类似药物开发有重要作用。通过干细胞诱导B细胞产生的胰岛B细胞存在纯度较低，缺乏成熟胰岛B细胞功能等问题。通过捐赠组织的胰腺B细胞提取，存在供应量较低，明显批次效应，耗时较长等问题。使用糖尿病动物模型进行研究会比糖尿病细胞模型成本更高昂，周期更长。胰岛制剂糖尿病细胞模型开展葡萄糖脂毒性研究接近生理学的人类胰腺B细胞模型，具有高度动态的葡萄糖刺激胰岛素分泌和肠促胰岛素调节。

根据从啮齿动物β细胞获得的数据来看，葡萄糖转运蛋白SLC2A2头次被认为是葡萄糖感知的主要决定因素，而后来的研究表明，葡萄糖激酶(GLK)是主要决定因素。在人类β细胞中，GLK被认为是葡萄糖感知的主要决定因素。为了克服这些限制，在HumanCellDesign中生成了新的β细胞系。EndoC-βH1是通过将表达SV40LT的慢病毒载体转导到人类胎儿胰腺芽中来开发的。随后将转导的芽移植到SCID小鼠体内，生成的表达SV40LT的细胞增殖并形成胰岛素瘤。

糖尿病患者的数量不断增长，凸显了对生理相关且易于获得的人类胰腺β细胞模型的需求，这些模型可以加速对疾病机制的理解和新药的开发，在糖尿病研究方面具有巨大潜力。EndoC-βH5细胞是EndoC-bH人类胰腺β细胞家族中较新一代的细胞，EndoC-βH5细胞聚集并形成球体，这些球体是大小和形状均质。EndoC-βH5细胞可直接作为冷冻验证的功能性人类β细胞使用，因此可以随时使用。EndoC-βH5细胞在迄今为止测试的所有功能测定中均表现良好，且表现出强大的标准化和批次间的再现性，可以进行可靠的数据解释。细胞以剂量依赖性方式响应葡萄糖而分泌胰岛素，并且肠jiang xue tang素进一步增强葡萄糖刺激的胰岛素分泌。糖尿病细胞模型可用于胰岛B细胞的靶标识别和炎症研究。

糖尿病细胞模型应用概括如下：1、细胞因子介导的糖尿病炎症反应（一/二型糖尿病）：胰岛β细胞保护机制研究，胰岛β细胞炎症反应研究，诱导胰岛β细胞炎症反应化合物筛选2、T细胞介导的胰岛细胞杀伤实验（一型糖尿病）：胰岛β细胞保护机制研究，T细胞抑制机制，β细胞和T细胞作用机制研究3、葡萄糖脂毒性研究:胰岛β细胞鉴定marker，胰岛β细胞功能性marker，胰岛β细胞糖脂化合物研究4、筛选胰岛素分泌促进药物：促胰岛素分泌药物筛选，功能机制研究，干细胞zhi liao糖尿病参照对比5、基于高通量筛选的siRNA靶标验证和筛选：高通量胰岛β细胞靶点鉴定和筛选，糖尿病疾病模型构建，促胰岛素分泌药物筛选6、干细胞zhi liao糖尿病：参照对比糖尿病细胞模型安全创新，已经进行了流氏分析和免疫荧光分析、RNA-seq等功能验证。安徽糖尿病糖尿病细胞模型

IFNg 和 IL1b 处理细胞 24 小时后进行 RNA-seq 以检查 EndoC-BH5 细胞对细胞因子的反应性。EndoC-BH2糖尿病细胞模型细胞复苏

然后将转导的芽移植到SCID小鼠体内，使其发育成成熟的胰腺组织。分化后，新形成的表达sv40lt的β细胞增殖并形成胰岛素瘤。然后用人端粒酶逆转录酶(hTERT)转导β细胞，移植到其他SCID小鼠体内，在体外扩增生成细胞系。其中一种细胞系，EndoC-βH1，表达了许多β细胞特异性标记，而没有任何其他胰腺细胞类型标记的实质性表达。在葡萄糖或其他胰岛素分泌剂的刺激下，细胞分泌胰岛素，细胞移植逆转了化学诱导的小鼠糖尿病。Human cell design 构建了EndoC-BH1,En-doC-BH3, EndoC-βH5, GLTx EndoC-βH5 , HLA-A2 EndoC-βH5等一系列的胰岛B细胞模型。EndoC-BH2糖尿病细胞模型细胞复苏