宁夏斑马鱼实验用途
报告基因选用GFP或RFP,**小启动子来自斑马鱼gata2基因;将上述载体与体外转录得到的Tol2转座酶的mRNA共同注射到斑马鱼的单细胞受精卵中,受精卵长大后成为founder;Founder外交(out-cross)得到F1代胚胎,从中挑选出对于报告基因具有组织特异性表达模式的胚胎,拍照记录后分类培养;F1长大后通过linker-mediatedPCR的方法鉴定对应于GFP(或RFP)表达图式的Tol2插入位点,并通过与已知基因组数据比较,对插入位点进行定位与分析;通过外交纯化得到转基因鱼,直至得到只含有单个插入品系的转基因鱼。斑马鱼可用于人类疾病的研究的模式生物。宁夏斑马鱼实验用途
斑马鱼模型现已在欧美国家广泛应用于人类疾病模型研究、新药筛选、药物毒性与安全性评价。目前国际上已有19个基于斑马鱼模型研发的药物(包括老药新用)已获得美国FDA的临床实验许可或上市许可,如PGE2、Lenaldekar、Thalidomide和Rosuvastatin等。诺华、辉瑞、罗氏、默克和阿斯利康等跨国医药巨头公司均通过自建或合作方式用斑马鱼进行药物早期研发,极大地推动了斑马鱼模型在药物研发应用中的标准化和规范化进度。由多个不同实验室进行的实验结果表明,斑马鱼模型对药物心血管毒性、发育毒性和胃肠道毒性等的评价结果与人体实验结果的一致性平均达到了80%以上(表2),按照欧洲选择性分析方法评价中心(ECVAM)的评价标准,大部分的预测准确率已达到了良好(75-85%)或***(85%)的水平。黑龙江斑马鱼实验使用斑马鱼技术进行药物筛选研发。
斑马鱼转基因品系制备服务简介1.转基因斑马鱼转基因技术包括显微注射、电穿孔技术(电脉冲介导)、精子载体法、GAL4/UAS转录系统、Tol2转座子介导、拟型反转录病毒介导、重组杆状病毒介导等方法。2.转基因技术目的2.1通过定点敲除技术进行基因鉴定和功能研究;2.2利用报告基因对受体等蛋白质进行功能研究;2.3构建各种斑马鱼突变体,通过斑马鱼疾病模型进行人类疾病研究和药物筛选;2.4构建含有特异性启动子的生物感应器,用于环境监测。3.Tol2转座子介导的转基因技术优点3.1Tol2转座子可携带大片段DNA;3.2Tol2转座子没有位置偏好性,几乎能整合到染色体的任意位置;3.3Tol2转座子的耐受范围很广;3.4Tol2作为天然的具有自主转座活性的脊椎动物转座子,能够在胚胎发育的不同时期进行有效的转移;3.5Tol2转座子介导的转基因技术能够有效克服外源基因在后代传递频率低的技术难题。服务流程▲客户提出转基因品系制备需求→▲分析可行性→▲构建载体→▲斑马鱼胚胎注射→▲founder筛选→▲F1代斑马鱼养殖→▲F2代斑马鱼养殖环特生物优势1.特有的养殖方法可缩短服务周期;2.丰富的经验和及时沟通助力科研实验。
依托业界的斑马鱼实验能力和创新平台资源,环特生物可为科研单位或个人提供基于斑马鱼技术的课题设计、中期审核、结题报告、实验场地、仪器设备、科研咨询、文献检索、样品安全与功效检测、文章发表、专利申请等科研课题整体解决方案。斑马鱼,作为一种新的科研工具,其特色优势:可靠、快速、高效、高通量、高性价比,且创新性强,易于从众多课题项目中脱颖而出,能针对性地提供快速、准确、可靠的科研数据,协助科研人员发表论文专著、申报,实现项目顺利结题。在科研合作前期,会针对性地对每个项目进行的可行性评估,后期对该项目提供实验执行和技术支持等的科研服务,实现双方的学术共赢。借助本单位的资源优势,环特生物可助您:快速毕业、职称晋升阶段的技术障碍。即使面临繁忙工作的困扰,也一样能获得快速成长,高效实现科研目标。斑马鱼实验降低药物研发风险。
斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势,又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点,可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层,完善现有药物研发体系。将斑马鱼模型鱼体外实验和哺乳动物实验相结合,可以从整体上缩短药物临床前早期研发的实验周期,降低实验成本,提高实验预测的准确性,进而提高药物研发效率,降低药物研发风险。全球医药巨头辉瑞、罗氏、诺华、葛兰素史克、阿斯利康等都逐渐开始使用斑马鱼技术进行药物筛选研发。2009年,斑马鱼药物毒理学评价技术通过FDA和EMA的GLP认证,这标志着斑马鱼模型的安全药理学和毒理学评价结果可以作为正式材料纳入临床试验申报资料。2013年,斑马鱼资料用于CFDA临床申报,目前,中国使用斑马鱼实验数据申报CFDA临床试验批件的新药研发项目已经有4项,2项已经获得批件。美国食品药品监督管理局(FDA)越来越多地应用斑马鱼对临床前药物进行安全性与毒理性评价,并在其官网介绍其研究成果。斑马鱼基因功能研究实验模型。天津斑马鱼实验标准
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传统药物临床前研究模式主要包括两个环节:体外实验和体内实验。体外实验(包括细胞实验、生化实验、微生物实验等)具有快速高效的优点,但是体外实验的结果与人体实验结果的可比性差。常规的哺乳类动物实验——包括老鼠、兔、犬、猪及猴子等——可提供可比度较高的筛选评估结果,但实验周期较长、成本高、审批程序复杂,严重影响药物研发的进度。斑马鱼模型既具有体外实验快速、高效、费用低等优势,又具有哺乳类动物实验预测性强、可比度高等优点,可以有效弥补体外实验和哺乳类动物实验之间的巨大生物学断层,完善现有药物研发体系。宁夏斑马鱼实验用途
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