药效 实验

细胞色素P450酶是许多同工酶组成的超大家族，主要位于肝脏微粒体中，参与生物体许多内源性和外源性物质的生物转化。许多临床相关药物间的相互作用与抑制和/或诱导CYP酶有关，改变CYP酶的活性对药效有重要影响，有时甚至会威胁生命。在众多肝脏细胞色素P450酶家族中，CYP3A4和CYP2D6与70%以上的药物代谢有关，其中CYP3A4占50%以上，而CYP2D6占20%左右，因此目前药物代谢研究集中于评价药物对CYP3A4和CYP2D6的影响。我们评价斑马鱼对细胞色素P450的影响作用有2个指标：1.对CYP3A4的影响作用；2.对CYP2D6的影响作用。利用斑马鱼模型评价促进生长发育功效。药效 实验

我们将受测试斑马鱼分成两组，分别是正常对照组和服用生长发育促进剂组（维生素D3、碳酸钙之类的生长发育促进剂通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内）。服用一段时间生长发育促进剂后，我们对斑马鱼做骨骼特异性荧光染色，观察斑马鱼脊椎骨的发育情况。可以看到，服用生长发育促进剂的脊椎骨数量明显比正常对照组增多。 1.经过每组30尾斑马鱼的对比实验，服用生长发育促进剂的斑马鱼脊椎骨数量比正常对照组增多。2.本实验证实了维生素D3、碳酸钙具有明显促进生长发育功效。体内药理药效评估利用斑马鱼模型评价糖尿病神经炎症消退功效。

贫血是指人体外周血红细胞容量减少，低于正常范围下限的一种常见的临床症状。溶血性贫血是由于红细胞的破坏增速、增多，超过造血补偿能力范围时所发生的一种贫血。斑马鱼造血系统的形成，包括红系、髓系、淋系及巨核系为主的造血系统，其相关的转录因子及信号转导通路同人类有高度的同源性，这些特点使斑马鱼在人类造血系统和血液疾病的研究中有着更加大量的应用。研究表明，苯肼是一种溶血剂。苯肼作用于红细胞膜，加速膜表面亮氨酸、赖氨酸及组氨酸的水解，使大量红细胞迅速遭到破坏；同时可选择性地氧化膜骨架和α珠蛋白，并将磷脂酰丝氨酸易位至红细胞表面，导致红细胞变形性降低，增强红细胞黏附到细胞外基质的能力从而破坏循环血中的成熟红细胞，使血红蛋白变性聚集、形成Heinz小体，使得红细胞的破坏速度远大于机体红细胞再造的能力，导致机体发生溶血性贫血。用邻联茴香胺染色法对红细胞进行特异性染色（呈红色），贫血斑马鱼心脏部位的红细胞较正常斑马鱼明显减少。由于斑马鱼早期出现血液循环时胚胎透明，在解剖显微镜下可以观察到。

我们先将测试斑马鱼喂食蛋黄粉和荧光标记的胆固醇（蛋黄粉和荧光标记的胆固醇通过溶解到养鱼用水中的方式摄入到斑马鱼体内），建立血脂高模型后，再将受测试斑马鱼分成两组，分别是模型对照组和服用降脂剂组，服用降脂组摄入阿托伐他汀钙、辛伐他汀、洛伐他汀之类的降脂剂。服用一段时间降脂剂后，我们对斑马鱼整体做脂肪特异性染色，观察体内甘油三酯聚积的变化，以及观察体内胆固醇的聚积情况，同时利用甘油三酯和胆固醇试剂盒检测斑马鱼体内甘油三酯和胆固醇含量的变化。斑马鱼模型评价半数致死浓度。

基于斑马鱼模型实验，可进行活性化合物发现、高通量药物筛选、药效评价、安全性评价、生物学质量控制等临床前研究，实验周期短、成本低，结果直观，助力医药企业的药物研发、品控及宣传推广。利用斑马鱼模型评价氧化应激。斑马鱼的基因与人类基因的相似度达到87％，与哺乳动物对外源化学物质的防御机制相当，包括酶的诱导和氧化应激。当生物暴露在环境污染物中，生物可能会发生氧化应激，主要表现为活性氧（ROS）产生和消耗的不平衡。在需氧生物的活细胞中，活性氧被一种由水和脂溶性低分子量自由基清除剂、特异性抗氧化酶组成的抗氧化防御机制解。应用ROS特异性荧光检测试剂，它的水解产物能被ROS氧化为高荧光物质，用多功能酶标仪检测荧光值反映氧化应激的程度。本方法已被授予国家发明专利。利用斑马鱼模型评价骨质疏松症。纳米药物的有效性与安全性评价

利用斑马鱼模型评价软骨修复功效。药效 实验

与药效学相关的临床前药代动力学研究，其目的在于揭示新药在动物体内的动态变化规律，阐明药物的吸收、分布、代谢和排泄的过程和特点。临床前药代动力学研究也是支持立题依据的重要内容，药物在体内的吸收、分布、代谢和排泄情况与药物的实际疗效及安全性密切相关，因此进行临床前药代动力学研究时不能孤立于药效学和毒理研究之外，从试验设计到结果评价都要与之紧密结合，充分发挥桥接作用。其意义在于：1.解释动物毒性研究结果，帮助完善毒理研究的设计。2.解释药效学研究结果，提示药物相互作用可能性的信息。3.提供药效和毒性反应种属差异的药代动力学原因。4.为给药途径和剂型等改变提供安全性、有效性与剂量相关性的依据。5.为临床研究（I期药代）提供参考。药效 实验