杨浦区疾病动物模型建模优势

1、动物模型名称：卵清蛋白联合氢氧化铝致支气管豚鼠模型2、实验动物种属：豚鼠3、实验动物性别：雌雄不限4、实验动物年龄：7~8周龄5、实验动物体重：250~350g6、实验动物环境：SPF级。1、实验方法：卵清蛋白联合氢氧化铝诱导。每只豚鼠腹腔注射100µg卵清蛋白（OVA）+30mg氢氧化铝（Al(OH)3）致敏。次致敏后第5天再致敏1次，共2次。一次致敏后第21d开始采用超声雾化器喷雾10μgOVA/只，豚鼠置于一直径约50cm的有盖大圆盆中，给药过程中对盆内通O2。动物模型的优越性主要表现在以下几下方面！杨浦区疾病动物模型建模优势

上海东寰生物科技有限公司模型特点：烟雾、空气污染物或者有害气体诱导模型使用的物质、暴露的剂量、频次和时间不尽相同；脂多糖造模时间短，可用来模拟急性加重反应，但不能反应慢性病变的过程，使动物机体内存在致敏物，然后气道局部激发（反复雾化或者滴鼻激发），诱导。模型特点：造模时的致敏激发的时间间隔、剂量和频次不尽相同，通常通常需要和其他造模方法联用。2.基因模型实验动物：α1-抗胰蛋白酶等基因敲除小鼠获得方式：直接购买模型特点：α1-抗胰蛋白酶基因敲除小鼠是经典的COPD转基因模型，更准确地理解易感基因的致病机制。宝山区口碑好的疾病动物模型建模上海东寰在动物建模方面已经有了多年的技术经验。

具体实施方式下面结合附图和具体实施方式对发明作进一步阐述。本发明构建了pirb基因敲入的小鼠动物模型，将pirb基因敲入c57bl/6j小鼠的rosa26基因的内含子1内。具体来说，构建一个cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒，将其克隆进入rosa26基因的内含子1中。rosa26基因(ncbireferencesequence：)位于小鼠的七号染色体。本发明pirb基因敲入的小鼠动物模型的构建方法，具体按照以下步骤具体实施:步骤1、根据小鼠rosa26基因(genebank：))序列，利用cas-desigher软件在1号内含子设计grna靶序列，并搜索小鼠dbm-db基因组数据库基因，采用crispr脱靶效应软件cas-offinder检测潜在的脱靶位点：**终选取两个grna，grna1的基因序列如seqid**所示，grna2的基因序列如：seqid**:ggcaggcttaaaggctaacctgg将grna1和grna2分别与trancrrna在25℃孵育10min形成二级结构；步骤2、利用c57bl/6小鼠文库bac克隆，通过pcr扩增获得pirb基因cds的同源臂，采用in-fusion方法构建含有cagpromoter-loxp-stop-loxp-kozak-mousepirbcds-polya的基因盒的质粒打靶载体，通过酶切、pcr及测序对打靶质粒载体进行验证，图1为构建好的pirb基因打靶载体的示意图。

1、动物模型名称：胆管结扎致肝胆管性肝硬化大鼠模型2、实验动物种属：SD大鼠3、实验动物性别：雄性4、实验动物年龄：5周5、实验动物体重：200~220g6、实验动物环境：SPF级1、实验方法：用胆管结扎法。大鼠按10mg/kg体重腹腔注射3％戊巴比妥钠麻醉，腹部皮肤消毒，无菌操作沿腹部正中线剪开腹腔，分离出胆管，在胆管近端和远端2处结扎胆管。手术后正常饲养28天。28天后解剖取肝脏进行组织病理学检查。2、检测标准：肝脏病理切片镜下小胆管伴纤维组织增生积分按程度为0-3分：0分：无明显病变；1分：呈局灶性分布，受累面积在30%以下者；2分：呈多灶性分布，受累面积在30%-70%之间者；3分：呈弥漫性分布，受累面积在70%以上者。利用动物疾病模型来研究人类疾病可以克服平时一些不易见到不便于在病人身上进行实验的人类疾病的研究。

l型棒10的第二端12露在椎间孔外，有利于调整插入位置。***端11的长度大于等于第二端12的长度。在本实施例中l型棒的材料选择的是h62黄铜。在另外的实施例中其材料可以是聚乳酸等其他材料，甚至可以用1个u型棒来代替2根l型棒插入腰4椎间孔和腰5椎间孔。u型棒的两臂均为4mm长。手术成功标志为：当l型棒或u型棒正确插入，压迫到背根神经节时，手术侧的后肢肌肉呈现轻微的暂时性抽搐，且不引起鼠尾摆动。需要根据大鼠体重选择l型棒或u型棒的直径大小：当大鼠体重在200g到不足220g范围时，采用直径为；当大鼠体重在220g到不足250g范围时，采用直径为；当大鼠体重在250g到不足300g范围时，采用直径为；当大鼠体重在300g到350g范围时，采用直径为。实施例2、模型的效果检测本发明已通过实验验证了该模型的效果。通过28天的观察，确定了实施例1获得的模型稳定且准确的模拟了腰椎间盘突出压迫神经根后的跛行以及疼痛症状。图3显示了术后大鼠出现手术侧(左侧)后爪(见a部所示)没有同其他三只爪一起抓握网架，而是蜷缩着，呈现不敢承重的表现。表1大鼠术后不同天数缩足阈值(单位：g)表1显示了术后28天内11只大鼠双下肢缩足阈值的具体的均值和标准误。小鼠疾病模型有助于遗传性疾病致病基因的发现与验证。哪家公司提供疾病动物模型建模优势

很多自发性动物模型在研究人类疾病时具有重要的价值。杨浦区疾病动物模型建模优势

    动物的选择目前常用的模式生物有果蝇、酵母、小鼠、斑马鱼等。目前主要是小鼠黑色素瘤模型。造模方法黑色素瘤小鼠模型可分为诱发性模型、移植性模型、转基因模型。一、诱导性模型应用：诱导的小鼠模型模拟人类受外界因素影响获得的黑色素瘤，常用于研究预防黑色素瘤形成。1紫外线诱导的小鼠模型通过紫外线照射获得的黑色素瘤模型被认为是临床上可靠的模型。方法：有研究者将HGF/SFcDNA表达的小鼠置于日光灯下用不同剂量(kJ/m2UVB、kJ/m2UVA、)进行紫外诱导15min。模型验证：诱导后的小鼠出现皮肤发红，偶有浅表皮脱屑，在组织病理学中观察到小鼠产生的大多数皮肤黑色素瘤中具有真皮成分，病变显示具有垂直生长期或浸润性恶性黑色素瘤以及淋巴结转移，这些病变与人类患者黑色素瘤页面状扩散的表皮内病变特征相似。缺点：但野生型或正常型小鼠一般不易发生UV诱导的黑色素瘤，因此UV诱导的黑色素瘤小鼠模型往往需要联合免疫缺陷小鼠，其操作技术较难、成本较高。2化学诱导化学致物诱导黑色素瘤小鼠模型大多采用DMBA和TBA诱导。DMBA是一种免疫抑制多环芳烃，其致机理是其活性代谢物被CYP450代谢成致物1，2－环氧化物-3，4-二醇DMBA，进而损伤DNA。TPA是通过蛋白激酶C充当启动子。杨浦区疾病动物模型建模优势