湖南Ham's F12培养基报价

时间:2024年11月13日 来源:

    发酵培养基为:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,cecl30-40mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;发酵工艺同实施例1,100l发酵罐中含有70l发酵培养基。设置cecl3的添加浓度为0,,如图1-2所示,随着cecl3添加量的增加,菌体浓度和谷氨酸含量均有所提升,当添加量为10mg/l时,菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值,然后出现下降趋势,但是整个过程中,糖酸转化率没有明显改变(附图未显示);说明cecl3稀土盐能够促进菌株增殖,提高谷氨酸相关合成酶的活力,提高谷氨酸的产量,但是过高的浓度会造成菌株增殖放缓和死亡,谷氨酸产量相应下降。二、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l,在此基础上,研究2-羟基乙胺对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。设置2-羟基乙胺的浓度为,5,10,20,40,80,160mg/l,如图3-4所示,随着2-羟基乙胺添加量的增加,菌体浓度随之增加,相应地,谷氨酸含量和糖酸转化率也有所提升,当添加量为40mg/l时,菌体浓度和谷氨酸含量达到峰值,继续增加2-羟基乙胺的浓度,产生明显的抑菌效果,菌株密度下降明显;原因是,低浓度的2-羟基乙胺可能促进磷脂酰乙醇胺细胞壁组分的合成。F12培养基提供了丰富的营养成分,支持细胞的快速增殖。湖南Ham's F12培养基报价

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    从而提高菌株增殖速率,但是浓度过大会导致抑菌现象,后期菌株增殖放缓,以产酸为主,2-羟基乙胺还能够作为阳离子表面活性剂,使得细胞壁疏松,提高细胞通透性,促进谷氨酸释放到发酵液,从而提高了谷氨酸产量和糖酸转化率。三、通过上述实验确定cecl3添加量为10mg/l、2-羟基乙胺的添加量40mg/l,在此基础上,研究发酵培养基b对菌体浓度、谷氨酸含量以及糖酸转化率的影响。对照组1采用发酵培养基a进行发酵,不采用发酵培养基b,100l发酵罐中含有70l发酵培养基a;发酵工艺参照实施例1。对照组2:发酵培养基b中不添加琥珀酸,其余同实施例1。对照组3:发酵培养基b中不添加壳聚糖,其余同实施例1。对照组4:发酵培养基a中添加5g/l的琥珀酸,其余同对照组1。实验组为实施例1。具体结果见表1。表1组别菌浓度od600nm谷氨酸产量g/l糖酸转化率%对照组:对照组1采用单一发酵培养基发酵,谷氨酸产量和糖酸转化率明显低于实验组,各组别菌体浓度差异并不大;对照组4在对照组1的基础上添加了琥珀酸,对菌体浓度并没有影响,谷氨酸产量和糖酸转化率也没有明显差异,可能原因是,发酵前期以菌体增殖为主,产酸较少,琥珀酸对菌体增殖并没有明显的刺激作用。四川DMEM/F12培养基价格查询RPMI1640培养基能够维持细胞的代谢活性。

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    但酚红在无血清细胞培养基中可能带来胞内钠/钾失衡,影响细胞生长。碳酸氢钠在细胞培养基中主要是作为缓冲系统,此外还具有调节渗透压的作用。通常产品使用说明中的碳酸氢钠推荐量是一个标准、安全量,是在科学的基础上根据实践经验所得。但是由于不同的细胞系(株)不同,同一株细胞适应环境也可能不同(细胞耐受性不同等),且存在的地域性水质差异等,在实际生产过程中也可稍作改动,但使用者需做相应的检测(理化及细胞生产试验等)。HEPES是一种非离子缓冲液,在pH~,在高浓度时对一些细胞可能**。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠(g/L)共用,以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。其安全浓度范围是10~25mmol/L。**酸钠可以作为细胞培养中的替代碳源,尽管细胞更倾向于以葡萄糖作为碳源,但是在没有葡萄糖的条件下,细胞也可以代谢**酸钠。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,4℃下放置1周可分解50%,使用中**好单独配制,置-20℃冰箱中保存,使用前加入细胞培养液中。

    文献2“混合硝酸稀土对谷氨酸产生菌的影响,氨基酸杂志”发现,在发酵培养基中添加一定量的稀土元素,能够提高谷氨酸的产量。申请人之前的**技术“一种谷氨酸发酵培养基制备方法”,在常规培养基的基础上进行了改进,通过添加菌体蛋白浸膏来替代酵母膏氮源,不但节约了成本,还能提高氨基酸发酵产率,一举两得。技术实现要素:在已有发酵培养基的基础上,申请人针对微生物发酵的特点,继续进行了改进,以提高发酵效率,据此,提出了一种优化的谷氨酸发酵培养基。本发明是通过如下技术方案来实现的:一种优化的谷氨酸发酵培养基,其包括发酵培养基a和发酵培养基b;所述发酵培养基a首先添加,然后间隔12h以上添加发酵培养基b。进一步地,所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖,酵母浸膏,k2hpo4,mgso4·7h2o,2-羟基乙胺,cecl3,mnso4·h2o,feso4·7h2o,vb1,生物素;将各原料搅拌均匀后,调节ph,**,制得发酵培养基a。进一步地,所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸,尿素,壳聚糖;将各原料搅拌均匀后,调节ph,**,制得发酵培养基b。推荐地,所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖50-100g/l,酵母浸膏10-30g/l,k2hpo41-5g/l。F12培养基在组织工程和再生医学中有广泛应用。

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    从而使培养基的预热、加热**及冷却过程可在同一设备内完成。该流程的加热和冷却时间比喷射加热连续**流程要长些,但由于在培养基的预热过程同时也起到了**后培养基的冷却,因而节约了蒸汽和冷却水的用量。(2)蒸汽直接喷射型的连续**系统流程中采用了蒸汽喷射器,它使培养液与高温蒸汽直接接触,从而在短时间内可将培养液急速升温至预定的**温度然后在该温度下维持一段时间**,**后的培养基通过一膨胀阀进入真空冷却器急速冷却,从图中可以看出,由于该流程中培养基受热时间短,营养物质的损失也就不很严重,同时该流程保证了培养基物料**先出,避免了过热或**不彻底等现象。(3)由连消塔、维持罐和喷淋冷却组成的**系统连续**的基本设备一般包括:①配料预热罐,将配制好的料液预热到60-70℃,以避免连续**时由于料液与蒸汽温度过大而产生水汽撞击声;②连消塔,连消塔的作用主要是使高温蒸汽与料液迅速接触混和,并使料液的温度很快升高到**温度(126-132)℃;③维持罐,连消塔加热的时间很短,光靠这段时间的**是不够的,维持罐的作用是使料液在**温度下保持5-7min,以达到**的目的;④冷却管,从维持罐出来的料液要经过冷却排管进行冷却。无血清培养基确保了实验结果的高度准确性。湖南Ham's F12培养基报价

无血清培养基适合于无血清环境的细胞培养。湖南Ham's F12培养基报价

    mgso4·7h2o20-200mg/l,2-羟基乙胺10-50mg/l,cecl31-20mg/l,mnso4·h2o1-10mg/l,feso4·7h2o1-10mg/l,vb15-50mg/l,生物素1-10μg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为6-7,121℃**,自然冷却,制得发酵培养基a。更推荐地,所述发酵培养基a的制备方法为:取各原料:葡萄糖80g/l,酵母浸膏20g/l,k2hpo42g/l,mgso4·7h2o50mg/l,2-羟基乙胺40mg/l,cecl310mg/l,mnso4·h2o3mg/l,feso4·7h2o3mg/l,vb110mg/l,生物素7μg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基a。推荐地,所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸1-10g/l,尿素1-5g/l,壳聚糖20-100mg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph,**,制得发酵培养基b;更推荐地,所述发酵培养基b的制备方法为:取各原料:琥珀酸5g/l,尿素2g/l,壳聚糖80mg/l;将各原料搅拌均匀后,调节ph为,121℃**15min,自然冷却,制得发酵培养基b。与现有技术相比,本发明取得的有益效果主要包括但是并不限于以下几个方面:本发明发酵培养基采用两部分组成,发酵培养基a侧重于菌株增殖的提升,发酵培养基b侧重于谷氨酸的合成和分泌;前期细胞增殖时。湖南Ham's F12培养基报价

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